2例X-连锁低血磷性佝偻病患者PHEX基因新发突变的研究

目的研究2例X-连锁低血磷性佝偻病(XLH)患儿及家系磷酸盐调节基因(PHEX)的突变类型,以明确其遗传学病因。方法回顾性分析2例XLH患者临床资料,应用高通量测序技术从基因组水平对先证者的XLH致病基因PHEX进行检测,并应用PCR-Sanger测序法对突变基因的家系分布进行验证。结果 2例患儿均检测到PHEX基因新发突变,1例为移码突变c.931dupC,导致翻译提前终止,产生截短蛋白p.Gln311Profs*13;另1例为剪接位点突变IVS14+1GA,导致外显子15跳跃,产生不完整的氨基酸链。2例患儿父母的基因表型均正常。结论 c.931dup C和IVS14+1GA是PHEX基因的两个新突变,可能是XLH新的致病性突变。     

结合学生满意度调查探讨教师在儿科多学科整合型PBL教学中的作用

目的　结合PBL教学后对学生的调查情况,探讨教师在儿科多学科整合型PBL教学中的作用。方法　重庆医科大学儿科学院构建了多学科整合型PBL,并在临床医学（儿科方向）五年制专业的部分示教课程中实施已逾2年。研究者从2016年9月28日至10月25日,针对该学院26名在专业课见习阶段接受PBL教学的本科生进行调查。在每次PBL课结束后,通过重庆医科大学网络教学平台,发放复旦大学钱睿哲等推荐的教学情况评价问卷;由学生无记名填写后回收;该调查共实施3次。用Excel 2007对问卷数据进行汇总。结果　共发放问卷77份,收回有效问卷77份。对多学科整合型PBL教学中教师应该达到的各项要求的评价方面,94.8%~97.4%的学生给予高分评价;针对教师的各项评价均达到“优”级。在对问卷开放式问题的回答中学生认为,教师在教学中能启发学生积极思考,鼓励学生发表不同的观点,为学生营造互相信任的环境,培养学生人际交流、沟通合作能力。结论　在儿科多学科整合型PBL教学中,教师应教会学生正确的学习方法,判断每名学生的知识和思维层次,针对每名学生存在问题与特点开展个性化施教。     

低磷性佝偻病的新认识

低磷性佝偻病是儿童常见的代谢性骨病,是由于磷代谢失衡(先天遗传/后天获得)导致骨矿化障碍所造成的.磷的动态平衡依赖于一个复杂的骨-肾轴,其机制迄今知之甚少.现通过参与血磷代谢平衡的器官、细胞、激素、调节因子等进一步阐述低磷性佝偻病的发病机制,重点阐述成纤维细胞生长因子23、细胞外基质磷酸化糖蛋白、分泌型卷曲相关蛋白、成纤维细胞生长因子7等磷调节因子在低磷性佝偻病发病机制中的作用,以及常见低磷性佝偻病的诊断及治疗进展.     

儿童身材匀称性指标的临床应用

身材匀称性指标的评价在儿童青少年体格生长过程中有着十分重要的意义,正确认识身材匀称度指标的发展规律和特点,准确全面的测量和评估身材匀称度指标,有助于儿科医师及时发现体格生长偏离的儿童,对生长障碍儿童的临床诊断和病因鉴别有着十分重要的意义。     

住院1型糖尿病患儿低血糖发生现状及影响因素研究

目的分析住院1型糖尿病(T1DM)患儿低血糖发生现状并探讨其影响因素。方法回顾性收集2016年1月1日至2022年1月1日在重庆医科大学附属儿童医院住院T1DM患儿的病历资料, 包括年龄、性别、照护者文化程度、病程、胰岛素注射方案、入院有无酮症酸中毒、糖化血红蛋白、有无合并症、住院天数等指标。将住院期间有一次及以上血糖<3.9 mmol/L的T1DM患儿纳入低血糖组, 其余纳入无低血糖组。分析低血糖发生的特点, 组间比较采用独立样本t检验、χ2检验、Mann-WhitneyU检验。采用二分类logistic回归分析法分析低血糖的影响因素。结果本研究共纳入854例T1DM患儿, 其中男414例、女440例, 年龄(7.41±3.89)岁。住院期间血糖监测总次数为69 553次, 低血糖发生3 863次, 发生密度为5.55%(3 863/69 553), 其中1级低血糖占4.07%(2 828/69 553), 2级低血糖占1.49%(1 035/69 553)。有80.21%(685/854)的患儿在住院期间发生过至少1次低血糖, 其中发生单次低血糖的患儿占16.51%(141/...     

P38MAPK通路在BMP9诱导C3H10T1/2干细胞向心肌样细胞分化中的作用

目的：研究P38丝裂原活化蛋白激酶（P38 mitogen-activated protein kinases,P38MAPK）通路在骨形态发生蛋白9（Bone morphogenetic protein 9,BMP9）诱导 C3H10T1/2干细胞向心肌样细胞分化中的作用。方法：免疫印迹检测经pAdEasyBMP9诱导24 h的C3H10T1/2干细胞磷酸化P38MAPK和P38MAPK表达水平,免疫荧光定位磷酸化P38MAPK;SB203580抑制C3H10T1/2干细胞磷酸化P38MAPK活性,pAdEasyBMP9诱导21 d时免疫印迹检测心肌特异性蛋白CX43、cTnT表达,免疫荧光检测心肌特异性蛋白cTnT、α-MHC表达,RT-qPCR检测心肌特异性基因GATA4、MEF2C表达。结果：pAdEasyBMP9促进磷酸化P38MAPK表达增高,却不影响P38MAPK表达水平;磷酸化P38MAPK有表达于胞浆和胞核、仅表达于胞核的不同状态。SB203580可显著性地抑制由pAdEasyBMP9诱导的C3H10T1/2干细胞CX43、cTnT、α-MHC、GATA4、MEF2C表达。结论：pAdEasyBMP9诱导C3H10T1/2干细胞能激活P38MAPK通路,并促进其向心肌样细胞分化。     

P38 MAPK信号通路参与BMP-13诱导C3H10T1/2细胞向心肌样细胞分化

 目的 探讨P38MAPK对BMP-13诱导C3H10T1/2细胞向心肌样细胞分化的影响。方法 实验4个部分分组如下：1.BMP-13腺病毒（Ad-BMP-13）对P38MAPK的作用：Ad-BMP-13转染组、Ad-GFP转染组和C3H10空白组。Western blot检测磷酸化P38MAPK（p-P38MAPK）和总P38MAPK（t-P38MAPK）的表达变化,免疫荧光技术定位p-P38MAPK;2.P38MAPK干扰腺病毒（Ad-si-P38）对P38MAPK的作用：si-P38干扰组、si-NC干扰对照组和C3H10空白组。Western blot检测t-P38MAPK的表达;3.Ad-si-P38阻断P38MAPK后对BMP-13诱导分化的影响：si-P38+Ad-BMP-13转染组、si-NC+Ad-BMP-13转染组、si-NC+Ad-GFP转染组和C3H10空白组。Western blot检测cTnT和Cx43的表达,荧光定量PCR检测GATA-4和MEF-2C的mRNA表达;4.SB203580阻断P38MAPK后对BMP-13诱导分化的影响： DMSO+Ad-BMP-13转染组、SB203580(2、5和10μmol/L)+Ad-BMP-13转染组 。荧光定量PCR检测GATA-4和MEF-2C的mRNA表达。结果 BMP-13促进P38MAPK的磷酸化。Ad-si-P38可以有效降低P38MAPK表达水平。Ad-si-P38阻断P38MAPK后BMP-13诱导组cTnT、Cx43表达有明显降低（P<0.05）,GATA-4和MEF-2C的表达也有显著降低（P<0.05）。随P38MAPK特异性抑制剂SB203580浓度增加,BMP-13诱导组GATA-4和MEF-2C的表达降低（P<0.05）。结论 Ad-BMP-13可以通过激活P38MAPK信号通路来调控C3H10T1/2细胞向心肌样细胞分化。     

重组人生长激素治疗儿童特发性矮小症远期疗效分析

[摘要]目的：评价重组人生长激素（rhGH）治疗儿童特发性矮小症（ISS）的远期疗效及安全性。方法：连续收集2006年8月至2010年12月在我院就诊的ISS患儿。将愿意接受rhGH治疗的80例患儿纳入治疗组,给予每晚睡前皮下注射rhGH 0.15~0.18 IU/（kg·d）,疗程为6个月;另从拒绝接受rhGH治疗的患儿中选取80例年龄、性别及生长发育情况与治疗组患儿相仿的患儿设为对照组,保持自然生长并定期随访。治疗组患儿治疗结束后再随访5年观察治疗效果和不良反应情况。结果：治疗组72例、对照组76例完成5年随访,随访完成率为92.50%（148/160）。随访结束时,治疗组患儿身高从治疗前的（119.27±15.81）cm提高到（151.84±11.53）cm,生长速率从治疗前的每年（3.58±0.57）cm提高到每年（7.45±1.72）cm,且均高于对照组（P均<0.05）。治疗组不良反应/事件发生率为9.72%,予对症处理后不良反应均可消失。结论：rhGH治疗ISS的远期疗效显著,能提高患儿的身高和生长速率,不良反应/事件的发生率较低且可控。     

干扰SEDL基因表达对软骨细胞生理活性的影响

目的 初步研究干扰SEDL基因表达后对人软骨细胞中II型胶原蛋白表达水平、内质网位置分布及超微结构和软骨细胞活性的影响。方法 将靶向干扰SEDL基因的病毒转染入人软骨细胞中,QPCR及Western Blot分别检测SEDL基因及Sedlin蛋白表达水平,评价干扰SEDL基因的软骨细胞模型是否建立成功;免疫荧光及Western Blot检测II型胶原蛋白表达情况,荧光探针检测内质网位置分布改变,电镜检测内质网超微结构改变,MTT法检测软骨细胞增殖活性情况。结果 （1)转染干扰SEDL基因病毒的软骨细胞SEDL基因表达明显降低,具有统计学差异（P <0.05)。Sedlin蛋白表达降低,表明干扰SEDL 基因的细胞模型构建成功。（2)随着Sedlin蛋白的减少,II型胶原蛋白表达量降低,具有统计学差异（P<0. 05)。（3)细胞模型中内质网分布发生改变,其形态变圆,触角变少,颜色变淡,细胞与细胞间内质网荧光排列不规则,紊乱。（4)电镜下观察,细胞模型中内质网超微结构出现水肿扩张。（5)转染干扰SEDL基因病毒的软骨细胞活性在48 h达峰,之后细胞活性下降, 且具有统计学差异（P<0.05)。结论 Sedlin降低影响软骨细胞II型胶原蛋白表达,软骨细胞中内质网形态位置分布及超微结构发生改变,致使软骨细胞活性降低。     

P38MAPK通路在BMP9诱导C3H10T1/2干细胞向心肌样细胞分化中的作用

目的:研究P38丝裂原活化蛋白激酶(P38mitogen-activated protein kinases,P38MAPK)通路在骨形态发生蛋白9(Bonemorphogenetic protein 9,BMP9)诱导C3H10T1/2干细胞向心肌样细胞分化中的作用。方法:免疫印迹检测经pAdEasyBMP9诱导24 h的C3H10T1/2干细胞磷酸化P38MAPK和P38MAPK表达水平,免疫荧光定位磷酸化P38MAPK;SB203580抑制C3H10T1/2干细胞磷酸化P38MAPK活性,pAdEasyBMP9诱导21 d时免疫印迹检测心肌特异性蛋白CX43、cTnT表达,免疫荧光检测心肌特异性蛋白cTnT、α-MHC表达,RT-qPCR检测心肌特异性基因GATA4、MEF2C表达。结果:pAdEasyBMP9促进磷酸化P38MAPK表达增高,却不影响P38MAPK表达水平;磷酸化P38MAPK有表达于胞浆和胞核、仅表达于胞核的不同状态。SB203580可显著性地抑制由pAdEasyBMP9诱导的C3H10T1/2干细胞CX43、cTnT、α-MHC、GATA4、MEF2C表达。结论:pAdEasyBMP9诱导C3H10T1/2干细胞能激活P38MAPK通路,并促进其向心肌样细胞分化。