法洛四联症患儿22q11区微缺失的研究

法洛四联症(tetralogyofFallot,TOF)是最常见的青紫型先天性心脏病(简称先心病,conotruncalcardiacdefects,CTD),尽管多数为单纯心脏畸形,亦有一部分合并于一些遗传综合征,如DiGeorge综合征(DGS)、腭-心-面综合征(VCFS)等[1]。DGS中80%以上存在22q11区基因的微缺失[2],相同区域的缺失亦在一部分单纯TOF患儿中发现[3]。在缺失区域及其两侧存在着多个具有多态性的微卫星DNA标记,该区的多个微卫星标记及它们在22号染色体上的分布见文献[4]。微卫星DNA广泛分布于基因组中,具有高度多态性、遗传稳定性高等优点。据报道,以聚合酶链反…     

肥厚性心肌病相关基因的研究进展

肥厚性心肌病(hypertrophic cardiomyopathy,HCM)是以左心室或室间隔不对称性肥厚为基本特征的原发性心肌病,其发病率约为0.2％,是青少年和运动员心源性猝死的首要原因,目前被普遍认为是一种基因突变所致的常染色体显性遗传性疾病.至今为止,至少有20种基因的450余种突变被报道与HCM相关,主要定位于心脏肌节蛋白基因.此外越来越多的线粒体基因、修饰基因突变也被发现与HCM的发生发展有关.该文将对HCM的相关基因的研究进展作一个综述.     

RNA干扰的研究进展

RNA干扰(RNA interference)是指双链RNA(dsRNA)分子在mRNA水平关闭相应序列基因的表达或使其沉默的过程,是一种序列特异性的转录后基因沉默.RNA干扰在许多生物体如线虫、果蝇、植物以及哺乳动物中都存在,防止生物体受到外源性核酸的入侵.RNA干扰现象被发现以后,广泛应用于基因的功能、基因治疗等研究.     

心脏发生的分子调控

本文对心脏发生分子调控过程中的机制作一综述。心脏的形成要求多种胚胎细胞的迁移、分化与精确的相互作用，心脏发生的易感性反应了心脏形成过程的复杂性。近来已发现许多与心脏发生有关的基因，这些基因在种系间高度保守，对这些基因功能的阐明有助于了解先天性心脏病（ＣＨＤ）的发生，为ＣＨＤ的预防及干预性治疗提供基础。     

CArG调控元件辐射诱导活性的研究

目的构建含有人工合成CArG调控元件的荧光素酶报告基因重组质粒,研究该元件在多种肿瘤细胞中不同剂量放射线照射下的放射诱导活性。方法将含有9个串联的CCATATAAGG结构的CArG增强子与CMVIEbasalgenepromoter构成的嵌合调控元件插入到pGL3Basic质粒,构建荧光素酶报告质粒。利用脂质体将该报告质粒瞬时转染肿瘤细胞株HeLa、A549、HepG2,给予不同剂量137Csγ射线照射,36h后检测荧光素酶活性,观察该调控序列的放射诱导活性。结果该CArG调控元件在低剂量放射线的诱导下能明显增强下游基因的表达,在3Gy的γ射线照射下诱导活性最强。结论人工合成的CArG调控元件在低剂量的放射线作用下能有效诱导下游基因的表达,在肿瘤的放射-基因治疗中具有较强的应用潜力。     

31例川崎病患儿脑脊液临床指标分析

目的探讨患儿脑脊液（CSF）改变与急性期川崎病的关系,研究JII崎病并发无菌性脑膜炎患儿脑电图及实验窒指标的异常改变。方法从426例确诊的川崎病患儿中选择进行腰椎穿刺术病例,根据CSF中白细胞计数诊断无菌性脑膜炎,根据就状动脉内径诊断冠状动脉扩张。分析无菌性脑膜炎组患儿的脑电图特征,比较无菌性脑膜炎组与白细胞计数正常组以及冠状动脉扩张组与冠状动脉非扩张组各项实验室指标的差异。结果共入选31例急性期川崎病,其中7例（22．6％）患儿CSF中白细胞计数升高（4例出现脑电图异常）,8例（26．7％）患儿出现冠状动脉扩张。无菌性脑膜炎组患儿血中自细胞计数显著高于CSF白细胞计数正常组,差异有统计学意义（P=0．029）;两组间其他实验室指标比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。冠状动脉扩张组与非扩张组之间各项实验室指标比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论川崎病患儿常见并发无菌性脑膜炎,腑电图异常比重大,血中白细胞计数过高对于川崎病患儿并发无菌性脑膜炎有提示意义。     

中国人22q11区微卫星多态性及在法洛四联症/肺动脉闭锁基因诊断中的应用

目的 检测中国人22q11区微卫星多态性、法洛四联症/肺动脉闭锁(TOF／PA)病人22q11区基因的缺失以及缺失片段与疾病表型之间的关系。方法 选取5个微卫星DNA标记D22S420、D22S941、D22S944、D22S311、D22S306,分析了50例正常人与10例TOF/PA患儿及其父母的等位基因片段,并进行家系分析。结果 2／10例(20％)TOF／PA病人存在22q11区基因缺失,均为母源性缺失;没有基因缺失的病人与存在基因缺失的病人的临床表现没有明显差异。结论 TOF/PA中2／10(20％)存在基因缺失,缺失片段的有无与疾病的严重程度无明显相关,这些结果尚需更多样本的研究加以证实。     

Survivin基因启动子在肿瘤细胞株中的活性

目的 研究survivin基因启动子在多种肿瘤细胞株中的活性,为该启动子在肿瘤靶向性基因治疗中的应用提供依据.方法 ①用RT-PCR和Western blotting法检测survivin基因在多种肿瘤细胞株A549、MDA-MB231和HepG2中的表达;②利用脂质体将不同长度的survivin基因启动子调控荧光素酶的报告基因载体瞬时转染A549、MDA-MB231和HepG2细胞,48 h后经荧光素酶检测,比较不同长度survivin基因启动子的活性.结果 survivin基因在多种肿瘤细胞株中表达;987 bp、596 bp、269 bp 和158 bp的survivin基因近端启动子在多种细胞株中均显示出较高的活性,其中翻译起始位点上游269 bp的启动子活性最高.结论 survivin启动子在转录水平上可以驱动报告基因在多种肿瘤细胞中表达,是一个在肿瘤基因治疗中有潜力的启动子.     

表型不同的同卵双生子在寻找疾病致病基因中的应用

理论上,同卵双生子具有相同的遗传背景,胚胎发育和生活环境也大体相似,通过对表型不同的同卵双生子进行对比研究,可以最大程度排除其他可能因素的干扰,缩小研究范围,更加精确地寻找到疾病的致病基因或相关因素.因此,表型不同的同卵双生子是一种具有巨大优势和潜力的遗传学研究工具.此文结合国际研究进展和我国现有情况,主要从遗传学和表遗传学方面,就表型不同的同卵双生子在寻找疾病致病基因的应用方面进行分析概述.     

心脏圆锥动脉干畸形患儿TBX1C基因3′UTR区域突变分析

目的 筛查心脏圆锥动脉干畸形（CTHD）患者中TBX1C基因3′UTR区域存在的基因突变,探讨该区域突变影响TBX1C基因表达的可能机制。方法 选取无22q11-2区微缺失的52例CTHD患儿（CTHD组）和89名健康儿童（对照组）作为研究对象,PCR扩增TBX1C基因完整3′UTR区序列,所有扩增片段均进行双向测序;将测序结果与GenBank中TBX1C 3′UTR序列（NM 080647.1）进行比对,筛查出可能存在的基因突变;PicTar和TargetScan在线预测软件预测可能与TBX1C基因3′UTR区结合的微RNA （miRNA）,分析TBX1C基因3′UTR区突变对miRNA调控TBX1C基因表达的影响。结果 在CTHD组中发现1例突变c.＊164_＊165insC,即在距离终止密码子164位与165位核苷酸之间插入1个胞嘧啶;该突变在对照组中不存在,其他研究中未见报道,为新发突变;预测结果显示10种miRNA能与TBX1C基因3′UTR区结合,该突变并不位于10 种miRNA与TBX1C3′UTR的结合区域。结论 TBX1C基因3′UTR区域存在新发突变c.＊164_＊165insC,该突变可能改变TBX1C3′UTR区域与miRNA结合的空间构象,进而影响miRNA对TBX1C基因表达的调控作用。