在唇腭裂序列治疗平台下医学生综合素质培养探索

目的　通过引入唇腭裂序列治疗平台理念与方法,探讨培养医学生综合素质的可行性与初步成效。方法　将汕头大学医学院本科二年级学生分为实验组和对照组（各20人）。实验组学生为唇腭裂序列治疗中心义工队成员,在临床教学中导入唇腭裂序列治疗平台的特色理念与方法;对照组实施常规教学。通过模糊评价方法科学量化测评指标,包括智育素质（60分）、思想品德（15分）、人文素质（5分）、身心素质（10分）、社会实践（10分）五方面;并成立专业测评小组对两组学生实施评价;组间比较采用SPSS 19.0行t检验。结果　实验组学生前述各项目平均得分为（51.477±2.381）（10.613±0.169）（4.228±0.124）（8.677±0.296）（8.565±0.421）,总分均值为（83.559±2.333）;对照组学生前述各项目平均得分为（49.746±3.176）（10.268±0.266）（4.008±0.195）（8.207±0.354）（7.575±0.321）,总分均值为（79.804±3.510）。两组之间,除了智育素质平均得分差异无统计学意义之外,其他得分差异均有统计学意义（P<0.05）。结论　在智育水平没有显著差异的情况下,思想品德、人文素质、身心素质、社会实践能对综合素质起影响性作用,在提高医学生的综合素质方面,唇腭裂序列治疗平台具有积极意义。     

全反式维甲酸对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏TGF-β1/Smad3信号通路的影响

目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾脏组织TGF-β1/Smad3信号通路的影响.方法:雄性Wistar大鼠72只随机分成3组:假手术组、UUO组、ATRA干预组,每组均为24只.UUO组和ATRA组大鼠腹腔注射麻醉后,行左侧输尿管结扎术.在同样的条件下,假手术组只探及肾包膜.ATRA组自...     

血管紧张素转换酶基因插入/缺失多态性与IgA肾病关联性Meta分析

目的 探讨不同人群中血管紧张素转换酶(ACE)基因插入(I)/缺失(D)多态性与IgA肾病(IgAN)发病的关系.方法 检索PubMed、Cochrane图书馆、清华同方、重庆维普数据库,时间从该数据库建立至2010年3月1日.全面收集有关IgAN ACE I/D基因多态性研究文献,根据文献纳入标准纳入相关文献.应用Revman 4.2.8 软件进行Meta分析,计数资料采用优势比(OR)及其95%CI表示,对IgAN组和健康对照组等位基因D/I,DD/(ID+II)和II/(ID+DD)进行分析.亚组内各研究间无统计学异质性(P≥0.1)时,采用固定效应模型;研究间存在统计学异质性(P<0.1)时,采用随机效应模型.结果 纳入20篇符合条件的文献,其中11篇是在亚洲人中进行研究,9篇是对欧洲人群的研究.健康欧洲人群D等位基因的表达比健康亚洲人群高(57.6% vs 32.6%);亚洲人群中D等位基因和DD基因型与IgAN发病关系密切(OR=1.27,P=0.006 0;OR=1.83,P＜0.000 1);而与欧洲人IgAN的发病无明显相关(OR=1.04,P=0.460 0;OR=1.13,P=0.120 0).在亚洲人群中,II基因型是IgAN发病的一种保护性因素(OR=0.81,P=0.020 0),而欧洲人群未发现有关系(OR=1.05,P=0.580 0).结论 亚洲人ACE I/D基因多态性与IgAN的发病关系密切,而欧洲人群未见两者有联系.     

全反式维A酸对缺氧性肾小管上皮细胞Prohibitin1和Prohibitin2表达的影响

目的 探讨全反式维A酸(ATRA)对缺氧性肾小管上皮细胞(RTEC) Prohibitin1(PHB1)和Prohibitin2(PHB2)表达的影响.方法 购自上海生物细胞库的大鼠近端肾小管上皮细胞株NRK-52E,采用混有胎牛血清和双抗的培养基(100 mL培养基中加5 mL胎牛血清和1 mL双抗)在37℃、50 mL/L二氧化碳的培养箱中培养.传代3次后分为正常组、模型组和ATRA干预组.正常组细胞不做任何处理,模型组细胞置于真空罐中,负压吸引器吸尽残余空气,充人缺氧气体(950 mL/L氮气和50 mL/L二氧化碳)密封建立缺氧性RTEC损伤模型,ATRA干预组细胞中加入0.1 μmol/L ATRA后参照模型组的方法进行缺氧.于缺氧24 h、36 h采用实时荧光定量PCR法测定各组NRK-52E细胞PHB1、PHB2、转化生长因子-β1(TGF-β1)的mRNA表达,Western blot法检测各组NRK-52E细胞PHB1、PHB2、TGF-β1的蛋白表达.结果 1.与正常组比较,模型组和ATRA干预组2个时间点NRK-52E细胞的PHB1和PHB2的蛋白表达量及其mRNA表达量均显著下降(P均＜0.05),缺氧时间越长,表达量越低；与模型组比较,ATRA干预组2个时间点NRK-52E细胞的PHB1和PHB2的蛋白表达量及其mRNA表达量均显著上升(P均＜0.05).2.与正常组比较,模型组和ATRA干预组2个时间点NRK-52E细胞的TGF-β1的蛋白表达量及其mRNA表达量均显著上升(P均＜0.05),缺氧时间越长,表达量越高；与模型组比较,ATRA干预组2个时间点NRK-52E细胞的TGF-β1的蛋白表达量及其mRNA表达量均显著下降(P均＜0.05).结论 ATRA可显著增强缺氧性RTEC中PHB1和PHB2蛋白表达量及其mRNA表达量,可能对缺氧性RTEC有保护作用.     

肾小球硬化大鼠血清和肾脏apoE水平及作用

载脂蛋白E(apolipoprotein,apoE)作为脂类代谢中一种重要配体,在肾脏中主要表达于肾小球系膜细胞和肾小管上皮细胞.肾脏疾病患者常出现继发性脂代谢紊乱和apoE水平升高.研究提示,apoE可能参与肾小球硬化(glomerulo-sclerosis,GS)复杂的病理过程[1].本研究通过建立GS大鼠模型,采用免疫组化法检测肾脏组织apoE、Ⅳ型胶原(collagenⅣ,Col-IV)和纤维连接蛋白(fibronectin,FN)的表达,用双抗体夹心ELISA试剂盒检测血清中apoE蛋白表达,实时荧光定量PCR法检测肾脏组织apoE mRNA表达,初步探讨apoE在GS发病中的作用机制.     

肾小球硬化大鼠肾脏组织载脂蛋白E的表达及作用

摘要：目的 探讨载脂蛋白E（apoE）在肾小球硬化(GS)大鼠肾脏组织中的表达及作用。方法 80只雄性8周龄Wistar大鼠随机分组为假手术组和模型组,每组40只。采用左侧肾切除加1周后尾静脉注射阿霉素(5mg/kg)的方案建立大鼠GS模型。于造模后第9周末和第13周末,每组各处死20只大鼠,取右侧肾组织作肾脏病理学检查并计算肾小球硬化指数（GSI）,免疫组织化学法检测肾组织IV型胶原（Col-IV）、纤维连接蛋白（FN）和apoE蛋白表达,用RT-PCR检测肾脏组织apoE mRNA表达。结果　（1）与假手术组比较,模型组大鼠各时间点：①病理学检查显示：GSI指数显著增高（P<0.01）,病程越长,GSI越高。②肾脏组织Col-IV和FN蛋白表达均显著增高（P<0.01）,病程越长,表达越高。③肾脏组织apoE蛋白及其mRNA表达显著增加（P<0.01）,病程越长,表达越高;（2）相关性分析：模型组大鼠肾脏组织apoE蛋白表达与GSI、Col-IV和FN蛋白表达均呈显著正相关（r=0.911,0.935,0.906;P均<0.01）。     

转化生长因子-β1/Smad3信号通路在肾间质纤维化大鼠肾脏组织中的表达和作用

目的 通过检测单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾脏组织转化生长因子-β1(TGF-β1)和Smad3的表达,探讨TGF-β1/Smad3信号通路在肾间质纤维化(RIF)中的作用.方法 雄性6周龄Wistar大鼠48只随机分为假手术组和UUO组,每组24只.UUO组大鼠麻醉后,背侧切口行左侧输尿管结扎术,假手术组大鼠在同样条件下仅探及肾包膜.分别于造模第7、14、21、28天每组各处死6只大鼠,取其左侧肾脏.HE染色和Masson染色行肾脏病理学检查,并计算RIF指数,应用Western blot法和实时荧光定量-PCR检测肾脏组织Smad3蛋白及其mRNA表达;免疫组织化学法检测肾脏组织TGF-β1、Ⅳ型胶原蛋白(Col-Ⅳ)和纤维连接蛋白(FN)的蛋白表达.结果 1.与假手术组大鼠比较,UUO组大鼠各时间点:(1)病理学检查显示,肾小管上皮细胞萎缩,胶原纤维化形成,弥散性单核细胞、淋巴细胞浸润,RIF指数显著增高(P<0.01),梗阻时间越长,RIF指数越高;(2)肾脏组织Smad3蛋白及其mRNA表达均增高(Pa<0.05),梗阻时间越长,表达水平越高;(3)肾脏组织TGF-β1、Col-Ⅳ和FN的蛋白表达均增高(Pa<0.05),梗阻时间越长,表达水平越高.2.相关性分析:(1)UUO组大鼠肾脏组织Smad3、TGF-β1蛋白表达与RIF指数均呈显著正相关(r=0.520、0.727,Pa< 0.01);(2)Col-Ⅳ和FN的蛋白表达与RIF指数均呈显著正相关(r= 0.794、0.786,Pa<0.01);(3) Smad3的蛋白表达与TGF-β1、Col-Ⅳ和FN的蛋白表达均呈显著正相关(r= 0.592、0.672、0.508,Pa<0.01).结论 UUO所致RIF大鼠肾脏组织TGF-β1及Smad3表达均显著升高,梗阻时间越长,表达水平越高,RIF程度越重.TGF-β1/Smad3信号通路可能参与了RIF的发生发展.     

单侧输尿管梗阻肾间质纤维化大鼠肾组织PHB1和 PHB2的表达及意义

目的：观察单侧输尿管梗阻（ UUO）肾间质纤维化（ RIF）大鼠肾组织PHB1和PHB2的表达,并探讨其意义。方法80只雄性6周龄Wistar大鼠随机分为模型组和假手术组各40只。模型组大鼠分离左侧输尿管后行双重结扎,假手术组只探查到肾包膜。于造模后第2周末和第4周末,每组各处死20只大鼠,取左侧肾组织进行肾脏病理学检查,并计算RIF指数;应用实时荧光定量PCR检测大鼠肾组织PHB1、PHB2、TGF-β1 mRNA;Western blot检测肾组织PHB1、PHB2、TGF-β1、Ⅳ型胶原（ Col-Ⅳ）和纤维连接蛋白（ FN）。结果与假手术组比较,模型组大鼠各时间点RIF指数增高,梗阻时间越长RIF指数越高,P均＜0．01;肾组织PHB1、PHB2 mRNA及蛋白表达均降低,梗阻时间越长表达水平越低,P均＜0．01;TGF-β1 mRNA及蛋白、Col-Ⅳ和FN蛋白表达均增高,P均＜0．01。肾组织PHB1蛋白表达与RIF指数、TGF-β1、Col-Ⅳ、FN呈负相关（ r分别为－0．86、－0．87、－0．70、－0．73,P均＜0．05）;PHB2蛋白表达与RIF指数、TGF-β1、Col-Ⅳ、FN呈负相关（r分别为－0．73、－0．81、－0．91、－0．84, P均＜0．05）;PHB1蛋白表达与PHB2蛋白表达呈正相关（ r＝0．78,P＜0．05）。结论在UUO所致RIF大鼠肾组织中,PHB1和PHB2表达显著降低,参与RIF的发生发展。     

Prohibitin1和Prohibitin2在缺氧性肾小管上皮细胞损伤中的表达及作用

目的探讨Prohibitn1(PHB1)、Prohibitin2(PHB2)在缺氧性肾小管上皮细胞(RTEC)损伤中的表达和作用。方法以体外培养的大鼠近端肾小管上皮细胞株(NRK-52E)为对象,NRK-52E细胞置于50 mL.L-1二氧化碳(CO2),37℃培养箱中孵育至80%,传代后随机分为正常组和模型组。正常组细胞继续培养,模型组细胞置于真空罐中,负压吸引器抽尽残余空气,充以配好的缺氧气体(950 mL.L-1氮气和50 mL.L-1CO2)密封建立缺氧性RTEC损伤模型,分别于造模第12、24、36小时采用实时荧光定量PCR检测PHB1、PHB2、转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA表达,Western blot检测PHB1、PHB2蛋白表达。结果 1.与正常组比较,模型组各时间点NRK-52E细胞的PHB1、PHB2蛋白及其mRNA表达均降低(Pa<0.05),缺氧时间越长,表达量越低;NRK-52E细胞的TGF-β1 mRNA表达均增高(Pa<0.05),缺氧时间越长,表达量越高。2.相关性分析:模型组NRK-52E细胞的PHB1、PHB2 mRNA表达与TGF-β1 mRNA表达均呈负相关(r=-0.97、-0.99,Pa<0.05)。结论缺氧所致NRK-52E细胞的PHB1、PHB2蛋白及mRNA表达均降低,缺氧时间越长,表达量越低,NRK-52E细胞损伤越重。PHB1、PHB2可能参与RTEC损伤的发生发展。     

Prohibitin基因转染对肾小管上皮细胞表型转化的影响

目的探讨转染外源性Prohibitin(PHB)基因对体外培养的肾小管上皮细胞株(NRK-52E)表型转化的影响。方法将构建的pcDNA3.1(+)-PHB1、pcDNA3.1(+)-PHB2质粒转染体外培养的NRK-52E细胞作为转染组,以空载体转染NRK-52E细胞为阴性对照组,以正常NRK-52E细胞为空白对照组,分别应用实时荧光定量PCR和Western blot检测转染24 h、48 h、72 h各组NRK-52E细胞PHB1、PHB2及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的mRNA及蛋白表达。结果 1.转染24 h、48 h、72 h时转染组NRK-52E细胞的PHB1、PHB2 mRNA及其蛋白表达均较阴性对照组和空白对照组增高(Pa<0.05),且48 h表达量最高,而阴性对照组与空白对照组比较差异无统计学意义。2.转染24 h、48 h、72 h时转染组NRK-52E细胞α-SMA mRNA和蛋白表达均较阴性对照组和空白对照组降低(Pa<0.05),48 h表达量最低,阴性对照组与空白对照组比较差异无统计学意义。3.转染组48 h NRK-52E细胞PHB1、PHB2蛋白表达量与α-SMA蛋白表达量均呈负相关(r=-0.942、-0.869,Pa<0.05)。结论转染外源性PHB基因可以抑制体外培养的NRK-52E细胞的表型转化。