小鼠胚胎心脏发育过程中胰岛素基因增强子结合蛋白1的时序表达与组蛋白乙酰化酶p300的关系

目的观察小鼠胚胎心脏发育过程中转录因子胰岛素基因增强子结合蛋白1(Islet-1)的时序性表达规律,并探讨其与组蛋白乙酰化酶p300介导的组蛋白乙酰化调控网络中的关系。方法以健康6～8周龄昆明小鼠为研究对象,下午1700雄雌按12比例合笼,次日观察阴栓,观察到阴栓最早之日计为胎龄0.5 d(E0.5)。取胎龄为E11.5、E14.5、E17.5的胎鼠和新生鼠的心脏,利用Western blot方法定量分析Islet-1的时序性表达规律,并利用蛋白质免疫共沉淀(Co-IP)和串联质谱分析方法(MS)鉴定Islet-1与组蛋白乙酰化酶p300的关系,同时应用Western blot方法反验证实验结果。结果 1.在小鼠胚胎心脏发育过程中,Islet-1在E14.5时的表达水平(0.434±0.353)明显高于与其在E11.5(0.074±0.456)、E17.5(0.120±0.127)和新生鼠(0.049±0.083)的表达水平,差异均有统计学意义(Pa<0.05),而其他时间点(E11.5、E17.5和新生鼠)间的表达差异无统计学意义(Pa>0.05)。2.在胚胎心脏发育过程中,Islet-1与组蛋白乙酰化酶p300相互结合,以蛋白复合物的形式存在。结论在小鼠胚胎心脏发育过程中,Islet-1可能作为枢纽因子,募集组蛋白乙酰化酶p300参与组蛋白乙酰化修饰调控。     

力欣奇继续医学教育园地——思考病例系列(1)答案

入院后诊疗经过:患儿考虑诊断急性消化道大出血、失血性贫血(中度),予禁食、补液、奥美拉唑抑酸、卡络磺钠联合蛇毒血凝酶静脉止血及红细胞悬液输注纠正贫血等处理。鉴于患儿反复消化道出血原因不明,既往胃镜检查提示正常上消化道黏膜,故定位考虑中下消化道出血,重点警惕美克尔憩室?消化道血管畸形?高位结肠息肉?     

先天性心脏病发生的高危因素和预防

先天性心脏病(CHD)是常见的先天畸形,每年我国新增CHD患儿15万～20万例,给家庭和社会带来巨大压力。目前CHD的高危因素分为遗传因素(如染色体畸变、单基因遗传、多基因遗传等)和母亲及环境相关因素(如宫内感染、妊娠早期患病服药、抽烟饮酒、环境问题等),认识CHD的高危因素以及有针对性地进行预防,对于减少CHD的发生、降低儿童病死率和促进我国优生优育有重要意义。     

组蛋白H3高乙酰化对心脏相关转录因子Islet-1的调控作用

目的：探讨组蛋白H3乙酰化修饰对心脏发育早期相关转录因子胰岛素基因增强结合蛋白1（Insulin gene enhancer protein 1,Islet-1）的调控作用。方法：体外培养心肌祖细胞,分别用不同浓度组蛋白去乙酰化酶抑制剂辛二酰苯胺异羟肟酸（Suberoylanilide hydroxamic acid,SAHA）干预（0、0.5、1.0、2.0、4.0 μmol/L）,噻唑蓝（Methyl thiazoyl tetrazolium,MTT）比色实验检测SAHA对细胞增殖的影响,筛选出SAHA的合适干预浓度,用Western blot技术检测心肌祖细胞组蛋白H3乙酰化状态,Real-time PCR检测Islet-1的mRNA表达水平变化,染色质免疫共沉淀（Chromatin immunoprecipitation,ChIP）Real-time PCR技术检测Islet-1启动子区组蛋白H3的乙酰化水平。结果：SAHA 0.5、1.0 μmol/L处理组较对照组细胞增殖率有所提高,但差异没有统计学意义（P >0.05）,SAHA 2.0 μmol/L处理组与对照组细胞增殖率相当（P >0.05）。SAHA 4.0 μmol/L处理组与对照组比较,细胞增殖受到抑制（P<0.05）。SAHA 2.0 μmol/L处理48 h后心肌祖细胞H3乙酰化水平与对照组比升高7.23倍（P<0.05）。Islet-1的mRNA表达与对照组比提高了4.68倍（P<0.05）,Islet-1启动子区组蛋白H3乙酰化水平是对照组的2.08倍（P<0.05）。结论：在心肌祖细胞中,组蛋白H3高乙酰化水平促进Islet-1表达,Islet-1受到组蛋白H3乙酰化调控。