胶质细胞源性神经营养因子/PI3K/AKT通路参与电针促进面神经压榨损伤模型兔的面神经再生

文题释义： 胶质细胞源性神经营养因子(glial cell-derived neurotrophic factor，GDNF)：是于1993年发现的由二硫键结合的同源二聚体蛋白质，含有134个氨基酸，分子质量为33-35 kD，是神经营养因子中的一种，属于转化生长因子超家族的远系成员，在全身各组织中均有表达，尤其在中枢神经系统内分布较广，具有显著的提高多巴胺能神经元存活与分化、抑制运动神经元凋亡、营养外周神经元、调整细胞间信息等作用。 PI3K：是由Sugimoto和Macara等(1984)发现的一种胞内磷脂酰肌醇激酶，由一个催化亚基(110 kD，p110 )和一个调节亚基(85 kD，p85 )构成，可特异地使肌醇环上的3位羟基磷酸化，其产物是在3位上有磷酸根的多磷酸肌醇脂，包括3，4-二磷酸磷脂酰肌醇(PI-3，4-P2)和3，4，5-三磷酸磷脂酰肌醇(PI-3，4，5-P3)等，它们都是位于质膜上的第二信使。PI3K是许多生命活动中关键的信号分子，PI3K介导的信号转导通路调节细胞的分裂、分化、凋亡等活动。 背景：多穴位电针治疗周围性面瘫的机制不明。胶质细胞源性神经营养因子(glial cell-derived neurotrophic factor，GDNF)是促进体外运动神经元存活的最有效因子，PI3K/AKT信号通路在保护受损神经元方面发挥着重要作用。目前暂没有GDNF/PI3K/AKT通路参与电针促进兔周围面神经再生的研究。 目的：观察电针对周围面神经压榨损伤后再生的影响，并从GDNF/PI3K/AKT介导的信号通路角度探讨电针对面神经元的保护机制。 方法：成年健康新西兰大白兔由西南医科大学动物实验中心提供，随机分成正常组和模型组。模型组制备右侧面神经颊支压榨性损伤的病理模型，造模成功后随机分为模型对照组和电针组，模型对照组自然康复，电针组取右侧翳风、颊车、四白、地仓、阳白、颧髎穴位进行电针治疗，1次/d，每次30 min。观察动物面瘫症状的改善情况并进行评分；正常组直接取材，模型组分别于术后 1，4，7，14，28 d取含面神经元的脑桥组织，进行苏木精-伊红染色观察神经元形态，尼氏染色观察尼氏小体，免疫组化测定GDNF的阳性表达，Western blotting检测3组各时间点面神经元组织中GDNF、PI3K、AKT、P-AKT的蛋白表达。实验方案经西南医科大学动物伦理学委员会批准，批准号为20170120001。 结果与结论：①与模型对照组相比，电针组动物的面瘫症状(患侧口角歪斜下垂，触须倒伏且运动减弱，眼睑上抬不能)恢复较快且完全；②电针组面神经元形态学改变、尼氏体变化均较模型对照组病理变化轻；③术后各时间点，面神经元GDNF免疫反应较强，阳性细胞数多于模型对照组(除术后1 d，其余各时间点P < 0.001)，且面神经元组织中GDNF、PI3K和P-AKT蛋白表达明显增高(P < 0.05/0.01/0.001)。提示：电针可有效治疗由压榨面神经颊支引起的周围性面瘫，促进面神经元形态恢复，其面神经元保护机制可能与上调GDNF在面神经元中的表达，激活PI3K/AKT信号通路有关。 ORCID: 0000-0002-9531-7400(李雷激) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程     

叉头框蛋白O亚型3a和p27激酶蛋白抑制剂1在电针促进面神经再生中的作用研究

目的 通过观察叉头框蛋白O亚型3a(Foxo3a)和p27激酶蛋白抑制剂1(p27 kip1)在电针治疗面神经压榨性损伤过程中的表达变化,探讨电针促进面神经再生可能的作用机制。方法 将42只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为3组。正常组6只,不做任何处理;模型组18只,建立右侧面神经上颊支压榨损伤模型;电针组18只,建立右侧面神经上颊支压榨损伤模型后予穴位电针治疗。模型组、电针组均于术后4、14、28 d分别随机抽取6只大鼠取材。采用苏木素-伊红染色观察面神经元的形态变化,蛋白免疫印迹法及免疫组化法检测面神经元中Foxo3a及p27 kip1的表达,进行统计分析。结果 与模型组比较,电针组面神经元在术后各时间点细胞团更聚集,边界更清晰,细胞数目、神经元突起增多。术后模型组及电针组Foxo3a、p27 kip1蛋白表达量及免疫组化阳性细胞数均呈现出先下降后上升的趋势。术后4、14 d与正常组比较,模型组和电针组Foxo3a、p27 kip1蛋白表达量及免疫组化阳性细胞数均低于正常组(P 0. 05),且电针组低于模型组同期(P 0. 05)。术后第28 d,模型组、电针组Foxo3a蛋白表达量及免疫组化阳性细胞数与正常组比较差异均无统计学意义(P 0. 05);术后28 d,电针组p27 kip1蛋白表达低于正常组(P 0. 05),p27 kip1免疫组化阳性细胞数低于模型组同期(P 0. 05)。结论 电针能加快面神经压榨性损伤的修复,其机制可能与促进面神经核团中Foxo3a、p27 kip1的表达量下降、缩短细胞周期有关。     

43例人工耳蜗植入患者基因检测及术后康复效果分析

目的总结川南地区43例人工耳蜗植入患者的基因突变类型,分析其人工耳蜗术后康复效果,了解两者的相关性。方法对43例耳聋患者行GJB2、SLC26A4、mtDNA 12S rRNA基因检测,有基因位点发生致病突变者为耳聋基因检测阳性,归为A组;其余为基因检测阴性,归为B组。两组患者均行单侧人工耳蜗植入术,于术前、术后3、6、12个月行听觉行为分级（categories of auditory performance,CAP）、言语可懂度分级（speech intelligibility rating,SIR）评估。结果43例患者中基因位点发生致病突变者14例（A组）;耳聋基因筛查阴性29例（B组）。A组中9例患者GJB2检测阳性,6例患者SLC26A4检测阳性,其中1例患者GJB2、SLC26A4检测结果均为阳性,两组患者术后1年内不同时间点 CAP 和SIR 评分均较术前明显提高,且评分随着术后时间的延长逐渐提高(P<0.05),但两组患者术前及术后不同时间点CAP和SIR评分比较均无差异(P>0.05)。结论43例患者中常见致病耳聋基因为GJB2、SLC26A4,人工耳蜗植入术能有效提高患者听力及言语能力,但耳聋基因突变与人工耳蜗植入术后康复效果无明显相关性。