胸腺肽α1的功能研究进展

胸腺肽α1广泛分布于哺乳动物的各个组织中,能促进T细胞增殖,增强抗体反应,调节细胞因子的产生,在肿瘤性疾病病毒感染和免疫缺陷的临床治疗上有很广泛的应用。本文对胸腺肽α1的功能的研究进展作一综述,以便指导临床应用。     

艾叶挥发油对 HBV的抑制作用

艾叶是菊科多年生草本植物艾（ Artemisia argyi Lévl．et Vant．）的干燥叶,是历史悠久的传统中药,在我国大部分地区分布,具有温经止血、散寒止痛、祛湿止痒等功效［1］。实验［2-3］证明艾叶具有抗菌、平喘、镇咳祛痰、抗过敏、护肝利胆和止血与抗凝血等多种药理活性。艾叶对肝脏有保护作用,可以降低谷丙转氨酶,促进肝功能恢复［4］。研究［5］发现艾叶具有明显的抗肝纤维化作用。作者前期的研究［6］发现艾叶乙酸乙酯提取物具抗HBV活性;挥发油是艾叶的主要药效成分群之一,为研究艾叶挥发油的抗HBV活性,在对其化学成分进行系统研究的基础上［7］,作者观察了挥发油对HepG2．2．15细胞HB-sAg、HBeAg表达的抑制作用和对HBV DNA 拷贝数的影响。     

HPLC法测定妇月康胶囊中阿魏酸的含量

目的测定妇月康胶囊中阿魏酸的含量。方法采用BDSC18 Hypersil（250nm×4．6mm，5um）色谱柱，流动相为乙腈-水-磷酸（14．5：85、5：0．1），流速1．0ml／min，检测波长为320nm，HP1100色谱仪，Agilent Chemstation工作站，外标法定量，检测妇月康胶囊中阿魏酸的含量。结论此方法能准确快速的测定妇月康胶囊中阿魏酸的含量。     

甲状腺乳头状癌中PTEN基因启动子甲基化及其蛋白表达的相关性

目的 探讨甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)组织中PTEN基因启动子区域甲基化状态及其蛋白表达的相关性.方法 采用甲基化特异性聚合酶链反应及免疫组化SP技术,检测80例PTC及其相对应的癌旁组织中PTEN基因启动子甲基化状态及其蛋白表达.结果 在癌旁组织中,无一例出现PTEN基因启动子甲基化,而在PTC中,有25%(20/80)出现甲基化,且其甲基化状态与TNM分期、病理分级及淋巴转移有关(P值均<0.05);癌旁组织和PTC组织中,PTEN蛋白表达的阳性率分别为100.0%(80/80)和41.3%(33/80),P<0.01.在PTC组中,在病理分级Ⅰ级和Ⅱ级组,PTEN蛋白阳性率分别为54.0%(27/50)和20.0%(6/30),在淋巴转移阳性和阴性组分别为20.6%(7/34)和56.5%(26/46),以上两组比较差异有统计学意义(χ~2值分别为8.944和10.046,P值均<0.01);PTEN基因启动子甲基化与其蛋白表达有明显的相关性(χ~2=9.095,P<0.01).结论 PTEN基因启动子区域甲基化是该基因失活的重要机制之一,在PTC的发生、发展中起着重要的作用.     

HPLC法测定妇月康胶囊中阿魏酸的含量

目的 测定妇月康胶囊中阿魏酸的含量.方法 采用BDSC18Hypersil(250nm×4.6mm,5um)色谱柱,流动相为乙腈-水-磷酸(14.5∶85.5∶0.1),流速1.0ml/min,检测波长为320nm,HP1100色谱仪,Agilent Chemstation工作站,外标法定量,检测妇月康胶囊中阿魏酸的含量.结论 此方法能准确快速的测定妇月康胶囊中阿魏酸的含量.     

艾叶乙酸乙酯提取物对HBV的抑制作用

目的:通过体外实验观察艾叶乙酸乙酯提取物对乙型肝炎病毒(简称HBV)的抑制作用。方法:取HepG2.2.15细胞,以1.6、8.0、40.0、200.0和500.0 mg/L的艾叶乙酸乙酯提取物处理72 h后,采用MTT法测定细胞生长抑制率,计算半数毒性浓度。另取HepG2.2.15细胞,分别以0、10、20和40 mg/L艾叶乙酸乙酯提取物及100 mg/L拉米夫定(阳性对照)处理3、6、9 d,采用酶联免疫法检测细胞上清液中乙肝表面抗原、e抗原,用荧光定量PCR测定HBV DNA拷贝数,分别计算抑制率和半数抑制浓度,最后计算治疗指数。结果:艾叶乙酸乙酯提取物对HepG2.2.15细胞的半数毒性浓度为104.80 mg/L,对乙肝表面抗原、e抗原及HBV DNA的半数抑制浓度分别是1.26、8.06和38.97 mg/L,并呈剂量依赖性。治疗指数分别为HBsAg 83.2、e抗原13.0和HBV DNA 2.7。结论:艾叶乙酸乙酯提取物在体外对HBV有明显抑制作用。     

后天感染河南樱桃谷鸭乙型肝炎病毒模型的建立

目的:建立并验证后天感染河南樱桃谷鸭乙型肝炎病毒(DHBV)模型。方法:筛选3日龄DHBV阴性河南樱桃谷鸭,经胫静脉注射DHBV阳性血清建立DHBV模型鸭,连续观察42 d,采用荧光定量PCR方法检测鸭血清和肝脏中DHBV DNA变化情况。DHBV阴性鸭48只,分为正常组、模型组和3TC组,每组16只。模型组和3TC组于鸭3日龄时建模,模型组给予生理盐水2 mL/(kg·d),3TC组给予3TC 20 mg/(kg·d),连续给药10 d。PCR检测给药5、10 d后及停药3 d后血清和肝脏中DHBV DNA含量,并进行肝脏病理学观察。结果:感染2 d后,鸭血清和肝脏中均可检测到DHBV DNA。血清DHBV DNA水平第14天达到高峰,拷贝数为7.7×109mL-1,肝脏DHBV DNA第21天达到高峰,拷贝数达2.1×109mL-1,42 d内均维持较高的DHBV DNA水平。与模型组比较,3TC组鸭血清和肝脏DHBV DNA拷贝数明显降低(血清:F组间=17.625,F时间=68.141,F交互=134.517,P<0.001;肝脏:F组间=69.430,F时间=35.330,F交互=75.770,P<0.001)。3TC组鸭用药10 d后,血清和肝脏HBV DNA抑制率分别为86.5%和84.9%,但停药3 d后有轻度"反弹"现象。3TC组肝组织病变较模型组有明显改善。结论:河南樱桃谷鸭后天感染DHBV较敏感,病毒在体内增殖稳定,是DHBV感染的理想动物模型。     

HBV cccDNA SYBR GreenⅠ荧光定量检测方法的建立及初步应用

目的 建立一种稳定、特异、敏感的乙型肝炎病毒(HBV)共价闭合环状DNA (cccDNA) SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法.方法 根据乙肝病毒松弛环状DNA (HBVrcDNA)与cccDNA的结构差异,设计跨越双缺口的特殊引物,并利用一种ATP依赖不降解质粒的DNA酶(Plasmid-SafeTMATP dependent DNase,PSAD)提高反应的特异性;建立荧光定量PCR标准曲线,并进行特异性、敏感性和重复性检验.应用所建立的方法评价拉米夫定和阿德福韦酯对HBVcccDNA的抑制效果.结果 该方法能特异性检测到HBV cccDNA,在2.68×1082.68×103 copies/μl检测范围之间有良好的线性关系,相关系数为-1.00,扩增效率为102％;最低检测限为2.68×101 copies/μl.拉米夫定和阿德福韦酯对HBVcccDNA均有很好的抑制效果.结论 该实验所建立的方法稳定性强、特异性好、灵敏度高,可快速定量检测HBVcccDNA,用于抗HBV药物的评价.