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Prev-DAF试剂盒分析线粒体基因1555A-G突变 总被引:10,自引:14,他引:10
目的建立应用标准试剂盒方法检测线粒体基因1555A-G(mtDNA1555A-G)突变的程序,进行母系遗传耳聋家系的基因型分析.方法采用Prev-DAF试剂盒分析14个母系遗传耳聋家系,共检测耳聋患者34个,正常个体11个,并以Alw26酶切和测序方法验证试剂盒检测的准确性.结果Prey-DAF试剂盒检测结果证实13个家系中33个耳聋患者携带有mtDNA1555A-G突变,另1个耳聋家系中的一名耳聋患者不携带此突变,11个正常个体中无此突变,试剂盒检测方法与Alw26I酶切法和测序结果完全吻合.结论在中国,mtDNA1555A-G氨基糖甙类抗生素致聋的家系多,分布广,Prev-DAF试剂盒在分析线粒体基因1555A-G突变方面具有简单、低耗、结果直观的特点,适合在中国用于进行此突变的大规模筛查或预防性检查. 相似文献
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目的 通过腺病毒(adenovirus,Ad)载体介导bcl-2基因转染体外培养的新生大鼠耳蜗螺旋神经节细胞(spiral ganglion cells,SGC),探讨bel-2蛋白过度表达对顺铂所致SGC损伤的拮抗作用.方法 体外培养新生大鼠SGC,携带绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因的腺病毒载体Ad-GFP转染SGC,并行神经丝蛋白(NF200)免疫细胞化学染色鉴定,激光共聚焦扫描荧光显微镜下观察.携带bel-2基因的腺病毒载体Ad-bel-2转染SGC,蛋白质印迹法(Western Blot)检测bcl-2蛋白表达.设立Ad-bcl-2转染加顺铂组(A组),Ad-GFP转染加顺铂组(B组),顺铂组(C组)和正常对照组(D组),顺铂作用浓度为2μg,/ml;顺铂作用48 h后,行各组SGC计数,并通过lmageJ软件测量各组SGC轴突长度.结果 成功分离并培养新生大鼠SGC.激光共聚焦扫描荧光显微镜下观察到腺病毒载体可安全高效转染体外培养的SGC.Ad-bcl-2转染3 d后,Western Blot检测有外源性人bcl-2基因的高效表达,而Ad-GFP转染组和顺铂组未检测到表达.顺铂作用后,A、B、C组部分SGC细胞突起变短、萎缩,胞体缩小、变圆,甚至浮起.A组SGC数目明显多于B组和C组(P值均<0.01),但少于D组(P<0.05);A组SGC轴突长度明显长于B组和C组,但短于D组(P值均<0.01).结论 腺病毒能够安全高效地转染体外培养的新生大鼠SGC.bel-2蛋白过表达对顺铂所致SGC损伤有一定的拮抗作用. 相似文献
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自 1 997年以来 ,笔者运用手法加小针刀治疗冻结肩 2 7例 ,获效满意 ,现报告如下。1 一般资料2 7例中 ,男性 1 0例 ,女性 1 7例 ;年龄 41岁~5 9岁 ;病程最短 2周 ,最长 1 .5年 ;病在左肩 1 4例 ,右肩 1 1例 ,双肩 2例 ;因外伤引起者 3例 ,风寒引起者 1 1例 ,原因不明者 1 3例。2 治疗方法2 .1 手法治疗 点穴 :取秉风、肩贞、肩 、肩骨禺、抬肩穴 (肩峰下 1 .5寸 )、举臂穴 (抬肩穴下 2寸 )、肩胛暗脉 (天定穴上 5分 )、讠意讠喜。点穴时将意念集中于手指 ,点按震颤 3min~ 5 min,使患者产生酸胀困感并有热流传导感。拨筋 :用单拇指在… 相似文献
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眩晕是一种临床常见症状,研究表明前庭系统病变是导致眩晕的重要原因。前庭毛细胞及其神经支配损伤是很多患者罹患眩晕的基础原因,充分的科学研究是解决临床问题的关键所在。虽然哺乳动物的前庭毛细胞在损伤后具有自我再生能力,但是这种能力非常有限,目前尚无有效方法使损伤后的前庭毛细胞充分再生以恢复功能。有关于神经保护和前庭基因治疗的相关研究为促进前庭系统的功能重建提供了科学依据。 相似文献
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线粒体基因A1555G突变检测试剂盒在药物性耳聋分子诊断中的应用 总被引:6,自引:0,他引:6
目的 探讨应用试剂盒方法在大规模耳聋患者群中检测线粒体基因A15556突变的可行性。方法 采用线粒体基因A15556突变检测试剂盒分析324例个体,其中属于25个母系遗传耳聋家系的有56个耳聋患者。散发性耳聋患者257个,正常个体11个,母系遗传耳聋家系中的耳聋患者多有氨基糖甙类抗生素接触史,部分检测结果以Alw26酶切和测序方法验证试剂盒检测的准确性。结果 线粒体基因A15556突变检测试剂盒检测结果证实24个家系中55个耳聋患者携带有A15556突变。另1个耳聋家系中的一名耳聋患者不携带此突变,11个正常个体及257个散发性耳聋患者中无此突变,试剂盒检测方法与Alw261酶切法和测序结果完全吻合。讨论 线粒体基因A15556突变是氨基糖甙类抗生素致聋的主要原因,其患者多分布于母系遗传特点的家系,线粒体基因A15556突变检测试剂盒在分析线粒体基因A15556突变方面具有简单.低耗.结果直观的特点,最短检测周期为3小时30分钟,适合A15556突变的大规模筛查或用药前预防性检查。 相似文献
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蔡沁明 柴人杰 陈钢钢 陈阳 冯宁宇 冷杨名 刘宇鹏 陆玲 任冬冬 汪照炎 王国鹏 王巍 吴学文 夏明 熊浩 徐磊 张宏征 张杰 张天虹 赵宇 孙宇 《中国耳鼻咽喉颅底外科杂志》2024,30(1):1-11
鼓室给药是一种常见的耳科局部给药方式,指通过将药物递送入中耳,经圆窗膜或卵圆窗扩散分布到内耳从而达到治疗或诊断效果。近年来,鼓室给药技术在耳科疾病的临床应用越来越广泛,主要包括突发性聋、梅尼埃病、分泌性中耳炎和自身免疫性内耳病等疾病的诊治。目前,国内外对鼓室给药的操作规范、适应证,尤其是给药时机及治疗方案尚未有统一标准。为了促进鼓室给药技术规范化,我们特组织了国内在鼓室给药领域经验丰富,有卓越建树中青年专家,基于临床经验和循证医学证据制定了鼓室给药临床实践指南。本指南从鼓室给药操作规范出发,系统总结了糖皮质激素鼓室给药、庆大霉素鼓室给药、鼓室内注射造影剂膜迷路MRI成像及其他药物鼓室给药四个方面,旨在指导并规范临床鼓室给药技术的应用。 相似文献
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目的 对比分析单侧与双侧中耳畸形的病例特点,为临床诊断和手术决策提供经验和依据。方法 回顾性分析2015年2月—2021年6月就诊于北京友谊医院的81例(125耳)中耳畸形病例,对单侧和双侧中耳畸形在起病年龄、伴随畸形、临床分型、听力下降程度等方面的特点进行对比分析。结果 双侧中耳畸形患者发现耳聋的年龄更早,合并面神经畸形和内耳畸形比例更高。临床分型单侧中耳畸形更倾向为Ⅰ型,而双侧中耳畸形更倾向为Ⅱ、Ⅲ型。各临床分型病例在各频率听阈的差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 单侧和双侧中耳畸形各有不同特点,术前仔细分析病史和临床表现有助于做出正确的临床诊断和手术决策。 相似文献
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目的探讨利用重组腺病毒介导的Math1基因转移治疗感音神经性耳聋的可行性。方法利用腺病毒细菌内同源重组方法,构建携带Math1基因的复制缺陷型重组腺病毒Ad-Math1,通过向豚鼠耳蜗底回注射重组腺病毒Ad-Math1后,利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测内耳Math1的mRNA的表达,Western Blot方法检测Math1蛋白表达。结果构建的重组腺病毒Ad-Math1酶切电泳鉴定正确,重组腺病毒Math1通过底回导入豚鼠耳蜗24小时后检测到Math1的mRNA表达;Western Blot方法检测到Math1蛋白的表达。结论本实验成功构建了携带Math1基因的重组腺病毒,由腺病毒介导的Math1基因转移可在豚鼠耳蜗内有效表达。 相似文献