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为了探讨人白细胞介素 18(hIL 18)的表达对鼻咽癌细胞体内致瘤性的影响 ,我们构建了hIL 18的真核表达载体pcD NA3/hIL 18,转染人鼻咽癌细胞株SUNE细胞 ;然后以转染阳性的SUNE细胞和未转染的SUNE细胞接种到用健康人外周血白细胞免疫重建的SCID鼠 (hu PBL SCID鼠 ) ,观察成瘤情况。结果发现 ,所构建的真核表达载体在鼻咽癌细胞中能高效表达hIL 18;ELISA法测得转染阳性细胞培养上清液中hIL 18的含量为 (85± 10 )pg/ml,而未转染的SUNE细胞的培养上清液中hIL 18的含量低于 5pg/ml。将转染阳性的细胞克隆和未转染的SUNE细胞接种hu PBL SCID小鼠后连续观察 5 0d ,发现前者形成的肿瘤其生长速度明显慢于后者 ,其平均瘤重也有显著性差异 (P <0 0 0 1)。说明在体内hIL 18的表达能有效地抑制鼻咽癌细胞的成瘤作用。 相似文献
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目的: EB病毒 (Epstein-Barr virus,EBV)存在的变异影响到其生物学功能(如 LMP1基因)。 BamHI A区右向框 0( BamHI A rightward fram0, BARF0)是在鼻咽癌 (Nasopharyngeal Carcinoma,NPC)病人中检出率很高的一个 EB病毒基因,对其变异性的研究尚未见报道,本研究是为了明确广东鼻咽癌组织中 EBV-BARF0基因的序列及其变异。方法:应用 PCR技术从 20例鼻咽癌组织中,扩增 EBV基因 BARF0,并对它们的序列进行测定。结果:与标准株 B95-8相比,鼻咽癌组织中 EBV-BARF0均有 4个位点发生突变: 160473( G→ T)、 160545( C→ T)、 160701( C→ A)、 160707( G→ C),并导致相应的氨基酸的改变: 2( Ala→ Ser)、 26( Leu→ Phe)、 78( Arg→ Ser)、 80( Ala→ Pro)。结论:由于 EBV的 BARF0基因在鼻咽癌细胞株及活检组织中 100%表达,在淋巴瘤组织及淋巴瘤细胞株中表达较低或不表达,本研究首次报道鼻咽癌组织中 EBV-BARF0的序列分析,与 B95-8相比存在变异,并导致了蛋白质的一级结构的改变,推测该基因很可能在鼻咽癌变过程中起着重要的作用。 相似文献
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鼻咽癌中p53基因突变的研究 总被引:9,自引:2,他引:9
目的:探讨鼻咽癌中p53基因突变情况。方法:用非同位素不对称PCR-单链构象多态性技术(aPCR-SSCP),分析了鼻咽癌活检组织、细胞株和裸鼠移植瘤中p53基因第5、6、7和8外显子(exon)的基因突变,并对其中exon8突变的SUNE-1和SUNT-1进行DNA测序。结果:在20例鼻咽癌活检组织中没有发现突变;但在鼻咽癌细胞株CNE1、CNE2、SUNE-1和瘤株SUNT-1中存在第8外显子突变,而HK1为第5外显子突变。DNA测序发现SUNE-1和SUNT-1的突变点在exon8的密码子(codon)280上,由AGA(精氨酸)→ACA(苏氨酸)。结论:p53基因突变热点的exon5、6、7和8可能在鼻咽癌变过程中没有重要意义,而在裸鼠移植瘤和细胞株建立过程中起重要作用。EBV由于和鼻咽癌的关系密切,在鼻咽癌中可能存在EBV编码蛋白与p53结合或蛋白表达被EBV抑制等其他途径使p53失活。 相似文献
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近年来抗EB病毒壳抗原的免疫球蛋白A抗体(VcA-IgA)的检测已被广泛地采用为鼻咽癌的辅助诊断。血清学的动态检测还发现,VcA-IgA抗体滴度随病程的进展和肿瘤转移而升高;随放疗后患者存活期的延长而渐趋下降;一旦复发,抗体滴度又回复上升至疗前水平。因此,VcA-IgA抗体水平的动态变化在一定程度上可以反映鼻咽癌患者的病情变化与疗效。本文报告我们对56例经深部X线治疗的鼻咽癌患者血清中抗VcA-IgA抗体的近期观察结果。 材料与方法:血清标本采自中山县人民医院,随机采集56例经病理确诊的鼻咽癌患者的疗前,深部X线治疗期中(即第二段放疗开始)与疗后一个月的血 相似文献
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鼻咽癌细胞中表达的人白细胞介素18(hIL-18)对鼻咽癌患者外周血 CD8+T细胞细胞毒活性增强作用的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨人白细胞介素18在鼻咽癌细胞中的表达能否提高鼻咽癌病人外周血CD8+T细胞的杀伤活性以及作用途径.方法构建人白细胞介素18的真核表达载体[pcDNA3.1(-)/hIL-18,转染人鼻咽癌细胞株SUNE;以转染的SUNE细胞和未转染的SUNE细胞为靶细胞,以鼻咽癌患者外周血的CD8+T细胞为效应细胞,混合培养12 h,用LDH释放法测定CD8+T细胞的细胞毒活性;用免疫组化法测定混合培养物中CD8+T细胞上Perlorin、Fas-L、Granzyme B的表达.结果所构建的真核表达载体在鼻咽癌细胞中能高效表达hIL-18;ELISA法测得转染阳性细胞培养上清液中hIL-18的含量为(85±10)pg/ml,而未转染的SUNE细胞的培养上清液中hIL-18的含量低于5 pg/ml.将表达hIL-18的SUNE细胞与鼻咽癌患者外周血CD8+T细胞混合培养12 h后,CD8+T细胞的细胞毒活性显著增强(P<0.001),尤其是当效应细胞/靶细胞为101时,CD8+T细胞对转染的SUNE细胞的裂解率高达46.7%,而CD8+T细胞对未转染的SUNE细胞的裂解率仅为4.6%.免疫组化法表明,这种杀伤活性的增强与CD8+T细胞表达Perforin有关,而与Fas-L和Granzyme B途径无关.结论hIL-18能显著增强鼻咽癌患者外周血CD8+T细胞的体外杀伤活性,这种杀伤活性与CD8+T细胞表达Perlorin有关. 相似文献
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唾液中EB病毒抗体检出用于早诊鼻咽癌的研究 总被引:9,自引:1,他引:8
目的:建立在唾液标本中检出 EB病毒 IgA抗体的方法,以快速、特异诊断鼻咽癌。方法:人工合成 EBV-DNA酶及 EA-D多肽片段,分别作为捕捉抗原,采用 ELISA法检测鼻咽癌患者和健康人血清及唾液中 IgA/ EBV-DNA酶和 EA-D抗体。结果:通过检出 O.D值,经统计学处理,选出鼻咽癌诊断阈值为:血清 O.D值≥ 0.3,唾液 O.D值≥ 0.45( DNA酶与 EA-D两者阈值一致)。鼻咽癌与健康者两组间 DNA酶与 EA-D的 IgA滴度均为 P< 0.0001,有非常显著性差异,与病理确诊相比,阳性符合率为 72.6%~ 77.3%。结论:证实 EBV合成肽链作为捕捉抗原,唾液为标本,用 ELISA法是可行的,方法简便,重复性好,价廉,但诊断符合率需进一步提高。 相似文献
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不同p53功能状态鼻咽癌细胞株的放射生物学特性 总被引:3,自引:0,他引:3
目的探讨鼻咽癌细胞不同p53功能状态及其放射生物学特性之间的关系。方法采用脂质体介导的转染方法将携带野生型p53基因的真核表达质粒pC53-SN3,空载体质粒pCMV-NeoBarn分别转染到鼻咽癌细胞CNE1、DNE2中。p53功能检测技术明确细胞转染p53基因前后的p53功能状态。成克隆实验测定细胞存活分数。采用单击多靶模型和线性二次函数模型拟合细胞存活曲线,求出放射生物学参数Do、Dq、N和α、β、α/β、SF2值。结果转染野生型p53基因后鼻咽癌细胞获得正常p53功能。CNE1-pNeo和CNE1-wtp53细胞的%值分别为1.17、1.08Gv;Dq值分别为2.25、1.21Gy;Q值分别为0.13、0.29Gy^-1;SF2值分别为0.765、0.326。CNF2-pNeo和CNE2-wtp53细胞的Do值分别为0、92、0.84Gy;Dq值分别为1.45、1.04Gy;α值分别为0、13、0.76Gy^-1;SF2值分别为0.675、0.156。CNE1、CNE2细胞转染野生型p53基因后,Do、Dq、SF2值均减小,α值增大。结论野生型p53基因转染可以提高p53功能缺陷的鼻咽癌细胞的放射敏感性。 相似文献