祖先信息标记在关联研究中的应用

关联分析方法被越来越多的用于疾病相关基因的定位，它的关键是选择合适的正常对照群体，因为存在病例组与对照组两群体间的差异会导致假阳性结果。近来，人们通过分析一些与疾病不相关的遗传标记在两组人群间的分布是否存在显著差异来判定样本间的层化程度，以鉴定疾病关联结果的真实性。祖先信息标记（ancestry informative markers，AIMs），     

PCR标记系统——一种高效快速的DNA标记方法

利用探针片段一般都插入到半乳糖操纵子基因（LacZα）中间的特点，选取合适的引物建立的PCR标记系统，可以以微量的质粒为模板，直接进行DNA探针的放射与非放射标记。具有模板用量少（10－100pg）、快速（2-3小时）、高效和标记后探针完整的特点，其产物的放射比活性可高达5×109／μ，远高于缺口平移（nicktranslation）和随机引物延长（randompriming）等方法所能达到的效果。     

核因子-κB在哮喘患儿支气管上皮细胞的活化

目的　探讨核因子 κB(Nuclearfactor κB ,NF κB)在哮喘患儿气道炎症中的作用。方法　获得 9例哮喘患儿及 6例非哮喘对照的支气管粘膜 ,进行免疫组化及凝胶电泳迁移率检查 ,分别观察NF κB在支气管上皮细胞的表达及NF κB与DNA的结合活性。结果　NF κB在 9例哮喘患儿的支气管上皮细胞核均有表达 ;在 4例哮喘患儿中 (对 6例哮喘患儿进行了凝胶电泳迁移率检查 ) ,观察到NF κB与DNA结合。在 6例非哮喘对照患儿的支气管上皮细胞核均未见NF κB表达 ,也未见NF κB与DNA结合。结论　NF κB在哮喘患儿支气管上皮细胞活化 ,可能通过调控多种炎性蛋白的表达 ,导致气道炎症发生。     

国人无综合征性耳聋患者的线粒体基因组7445A→G突变263例调查

目的 :探讨国人无综合征性耳聋 ( NSD)患者的线粒体 DNA 744 5 A→ G( m t DNA744 5 A→ G)突变的发生情况。方法 :对 32个 NSD家系 12 8例和 135例散发的 NSD患者 ,10 0例正常人 ,以 PCR法检测 mt DNA 744 5 A→ G突变情况。结果 :全部受检者无 mt DNA744 5 A→ G突变发生。结论 :国人 NSD患者的 m t DNA744 5 A→ G突变的发生率较低 ,且明显低于 mt DNA15 5 5 A→ G的突变发生率     

妊高征患者脂蛋白酯酶基因变异(Ser447-Thr)的研究

目的　研究妊高征患者体内脂蛋白酯酶 (LPL)的一个基因变异 (Ser4 4 7-Thr)的发生率 ,探讨该基因改变与妊高征发病的关系。方法　测定 5 4例重度妊高征患者与 4 8例健康孕妇对照组的血脂水平 ,并提取其外周血白细胞中的DNA ,通过PCR扩增LPL第 9外显子 ,利用限制性内切酶片段长度多态法及DNA测序分析结果。结果　重度妊高征组的TG、VLDL和Apo -Ⅱ水平明显高于对照组 ,重度妊高征组和对照组的Ser4 4 7-Thr等位基因变异频率 (分别为 9 2 6 %和 5 2 1 % )无显著差异 (χ2 =1 2 2 ,P >0 0 5 )。结论　LPL第 9外显子的Ser4 4 7-Thr等位基因变异可能只是一种基因多态性 ,而与妊高征的发生无关联     

线粒体脑肌病伴乳酸血症和卒中样发作综合征的临床特征及遗传学研究

目的探讨线粒体脑肌病伴乳酸血症和卒中样发作（MELAS）综合征临床与分子遗传学特征,寻找MELAS线粒体DNA（mtDNA）A3243G点突变比例与临床特征的关联性。方法对2001年1月至2008年1月在首都医科大学附属北京儿童医院神经内科住院和门诊临床疑似线粒体脑肌病的患儿,行外周血白细胞mtDNA A3243G点突变筛查、血乳酸检测和神经影像学等检查。A3243G点突变阳性病例中选取符合MELAS临床疑似诊断标准的患儿（突变阳性组）,对其家系进行调查,采集家族成员血进行mtDNA A3243G点突变筛查;A3243G点突变阴性病例中选取符合MELAS临床疑似诊断标准的患儿行肌肉病理活检和肌肉A3243G点突变筛查（突变阴性组）。分析比较两组的临床资料及MELAS遗传学特征。结果研究期间共有272例疑似线粒体脑肌病的患儿进行了外周血白细胞A3243G点突变的筛查。A3243G点突变的20例阳性标本中,突变均为异胞质性（heteroplasmy）,18例符合MELAS的临床疑似诊断标准。血细胞中突变型mtDNA的比例为9.0%-50.0%,其中4例同时在肌肉组织检测到相同突变,突变比例为42.4%-64.8%。临床症状以惊厥、乏力、智力进行性倒退、发热、呕吐、视力障碍和失语为主,身材矮小和体毛增多为主要体征,13例合并癫,血乳酸均升高,头颅CT/MRI显示双侧对称性苍白球钙化和脑梗死信号。A3243G点突变筛查阴性标本中有4例临床符合MELAS临床疑似诊断标准,肌肉病理可见破碎红边纤维,肌肉A3243G点突变筛查阴性。14个家庭中的37名家庭成员采集了外周血进行mtDNA A3243G点突变筛查,突变阳性组中患儿母亲5名检测到A3243G点突变,突变比例分别为3.0%,5.0%,11.8%,21.3%和26.9%,同胞兄弟4名检测到A3243G突变,突变比例分别为19.3%、33.3%,37.5%和41.5%,均无临床症状,其他成员未检测到突变。本研究A3243G点突变比例与发病年龄和就诊年龄呈负相关趋势,与病程未?     

KHSRP基因多态性与家族性热性惊厥关联研究

目的 研究KH型剪切调控蛋白（KH-type splicing regulatory protein,KHSRP)基因的单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphisms,SNPs)与家族性热性惊厥（febrile convulsions,FC)的关系。方法 通过NCBI的dbSNP数据库搜索KHSRP基因的单核苷酸多态性位点，运用位点特异性PCR（site-specificPCR amplification,SSP)和变性高效液相色谱（Dena-turing High Performance Liquid Chromatography,DHPLC)技术对来自中国北方的健康人群和家族性惊厥病人进行SNPs基因分型。结果 KHSRP基因三个多态性住点的基因型在健康人群均符合 Hardy-Weinberg平衡，各等位基因频率和基因型频率在病人和健康人无显著差异。结论 KHSRP基因的3个多态性位点的SNPs均与FC不相关，提示KHSRP基因可能不是FC的易感基因。     

线粒体脑肌病伴高乳酸血症和卒中样发作综合征的线粒体DNA突变特点

目的 探讨线粒体脑肌病伴高乳酸血症和卒中样发作（MELAS综合征）的分子遗传学特点。方法 用聚合酶链反应-限制片段长度多态性（PCR-RFLP）方法检测来自7个家庭的9例MELAS患者及其部分母系亲属的肌肉和（或）外周血细胞的mtDNA的A3243G和T3271C点突变,并进行突变型mtDNA的定量。结果 在9例患者和1例亲属的肌肉和（或）外周血细胞中检测到A3243G点突变,未检测到T3271C突变。在这10例A3243G阳性标本中,外周血细胞（9例）的突变型mtDNA的比例为26.8%-50.3%;肌肉组织（4例）的突变型mtDNA的比例为46.8%-61.0%;对3例患者同时进行了肌肉和血细胞标本的检测,突变型mtDNA的比例肌肉组织均高于血细胞。对6个家庭的部分母系亲属的血细胞研究表明：只有1例先证者的同胞有此突变;另外3例先证者的母亲及2例先证者的同胞均未检测到此突变。另外有2例先证者的儿子临床表现符合MELAS,血中也检测到此突变。结论 mtDNA A3243G突变在本组MELAS综合征中的发生率较高,并且可在不同组织中检测到此突变,与国外文献报道一致;但国外报道多为母系遗传,而我们的病例以散发的居多,推测是由于新生突变所致。     

癫发病机制的相关研究进展

对于癫综合征 ,迄今已发现了一系列候选基因 ,其中大部分编码离子通道蛋白及相关调节因子、膜蛋白或参与信号传导的酶和细胞因子。虽然它们不是全部的病因所在 ,国际癫学界仍倾向于部分癫综合征是一类“离子通道病”(channelopathy) [1] 。一、离子通道1.电压依赖的钠离子通道 (voltage gatedsodiumchannel,SCN) :钠通道是产生动作电位的基本离子通道 ,由多个亚基组成 ,其中一部分在中枢神经系统有高表达 ,表明它们与大脑电活动密切相关。迄今已经在多种癫综合征患者中检出了SCN基因的突变 ,如在 33个全身性癫伴高热惊厥(gener…     

FWPW PRKAG2基因筛查

目的:预激综合征(WPW)是一种常染色体显性遗传性疾病,本文筛查了5个家族性预激综合征(FWPW)的先证者,以求发现中国WPW患者PRKAG2的突变.方法:提取周围血白细胞基因组DNA,聚合酶链反应(PCR)扩增PRK-AG2目的基因片段.应用直接测序分析筛查基因突变.结果:5个FWPW先证者PRKAG2 2-12外显子测序结果与NCBI(美国国家生物技术信息中心)GDB BLAST软件进行比对,未发现突变.结论:FWPW存在着遗传异质性,除PRK-AG2外可能还存在着其它相关基因.