探针扩增阻滞突变法与数字PCR法检测甲状腺乳头状癌BRAF基因突变

甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)是甲状腺癌中最常见的类型,约占甲状腺癌的90%[1]。虽然目前绝大多数PTC预后较好,但仍有30%的PTC患者术后出现反复复发及远处转移[2]。Kimura等[3]研究发现70%的PTC可能存在分子改变,包括编码受体酪氨酸激酶RET、神经营养受体酪氨酸激酶-1(NTRK1)基因,以及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路的两个细胞内效应基因RAS和BRAF。     

肿瘤热疗研究进展

肿瘤疾病的热疗安全有效、不良反应低,且与其他治疗方法如放疗、化疗等有协同作用,近年来已成为继手术、放化疗和生物治疗后的一种抗肿瘤治疗的重要辅助手段。热疗主要通过直接对肿瘤细胞产生抑制作用和热诱导的放射增敏效应来发挥提高放化疗效果的作用,故现在热疗正逐渐应用于肿瘤的综合治疗中。本文主要对肿瘤热疗在联合传统化疗、放疗、免疫治疗以及新材料中的应用和研究进展等内容进行综述。     

BRAFV600E突变比值在预测甲状腺乳头状癌颈部淋巴结转移中的临床价值[论著]

目的　探索BRAFV600E突变比值（The Ratio of BRAFV600E expression）,在预测甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinoma,PTC）颈部淋巴结转移（lymph node metastasis,LNM）中的临床价值。方法　收集于浙江大学医学院附属杭州市第一人民医院2018年1月至2019年1月间手术治疗的234例PTC患者,采用微滴数字PCR（droplet digital PCR,ddPCR）定量法检测病理石蜡标本BRAFV600E突变比值,分析突变比值与PTC患者LNM的相关性,构建受试者工作特征曲线（ROC）。结果　PTC患者伴有LNM者的BRAFV600E突变比值显著高于无LNM者（P <0.01）,ROC曲线显示BRAFV600E突变比值预测LNM的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和曲线下面积（AUC）分别为27.7%、91.0%、73.3%、58.5%、0.581。结论　利用PTC病理石蜡标本中BRAFV600E突变比值预测LNM有较高的特异性,可为PTC颈淋巴结清扫提供临床决策。     

BRAFV600E突变比值在合并桥本甲状腺炎甲状腺乳头状癌中的初步研究

目的 探索桥本甲状腺炎(HT)对甲状腺乳头状癌(PTC)中BRAF^V600E突变比值(the ratio of BRAF^V600E alleles)的影响。 方法 收集242例PTC患者临床资料,其中PTC合并HT 63例,PTC不合并HT 179例,采用微滴数字PCR(ddPCR)法检测PTC中BRAF^V600E状况。利用倾向性评分匹配法(PSM),以性别、年龄、多灶性、腺外侵犯、肿瘤直径为控制变量按1∶1比例构成63对配对,比较匹配后两组BRAF^V600E阳性率和突变比值。 结果 倾向性评分匹配前,PTC合并HT组和PTC不合并HT组BRAF^V600E阳性率分别为87.3%和92.7%,两组间差异无统计学意义(P>0.05),而PTC合并HT组BRAF^V600E突变比值(3.20%)显著低于PTC不合并HT组(8.80%)(P<0.001)。经过倾向性评分匹配,两组基线水平保持一致,PTC合并HT组BRAF^V600E突变比值(3.20%)仍显著低于PTC不合并HT组(9.00%),两组间差异有统计学意义(P=0.001)。 结论 在合并HT的PTC中,BRAF^V600E突变的发生未受影响,但是BRAF^V600E突变比值明显降低,说明HT对PTC发展过程中BRAF^V600E突变存在一定影响,从而影响PTC发展及其预后。     

miR-362促进非小细胞肺癌放疗加速再增殖的研究

目的通过建立非小细胞肺癌放疗加速再增殖模型,在此基础上探讨miR-362介导加速再增殖效应的相关机制。方法通过荧光素酶标记的H1975.luc细胞建立非小细胞肺癌放疗加速再增殖模型,采用PCR法检测miR-362在照射后H1975-miR362KD细胞（miR-362基因敲除）、H1975细胞中的表达情况,并进行比较。结果H1975.luc细胞数量与荧光强度成线性正相关（r=0.995,P＜0.05）,照射后细胞能够促进周边未照射细胞的增殖。miR-362在放射处理后的H1975细胞中表达明显上调。6Gy放射处理后的H1975细胞、经miR-362稳定敲除H1975-miR362KD细胞分别与H1975.luc细胞共培养,相较于H1975细胞组,H1975-miR362KD组细胞荧光强度明显减弱,同时PCR检测也发现与H1975-miR362KD细胞共培养的H1975细胞miR-362表达明显下调。结论本研究成功建立了非小细胞肺癌加速再增殖模型,发现miR-362的高表达可能介导了加速再增殖效应。     

基于血液基因检测为指导的肺腺癌多学科精准治疗1例

本文介绍1例肺腺癌患者多学科诊治过程。该病例因右侧肺部占位首诊,经多学科讨论后行手术治疗,术后病理证实为腺癌。6月后患者出现肝转移,基因检测提示表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因突变,经多学科讨论,给予酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor,TKI)一线靶向治疗,此后疾病反复多次进展,在血液循环肿瘤DNA基因检测引导下,疾病得到控制并有较好的生活质量。此病例的诊疗过程说明,肺癌患者需要多学科诊治,基于血液基因检测,最终实现规范化的精准治疗。     

RECQL基因沉默对HCC细胞株体外增殖的抑制作用

目的观察RECQL基因沉默表达对人肝细胞癌(humanhepatocelullarcarcinoma,HCC)细胞株体外增殖的影响,探讨RECQL作为肝癌治疗潜在靶向基因的可能性。方法以BEL7404、SK-HEP-1、Hep3B、SNU-761HCC细胞为研究对象,采用Westernblot和免疫组化法观察解旋酶RECQL蛋白的表达情况,通过RNA干扰技术抑制RECQL表达,测定HCC细胞和正常肝细胞（THLE-2细胞）的存活率和死亡率,并采用Westernblot法分析凋亡相关蛋白的变化,FACS法检测细胞周期分布。结果RECQL蛋白在BEL7404、SK-HEP-1、Hep3B中为阳性表达,SNU-761中为阴性表达。RECQL-siRNA在阳性表达组中抑制HCC细胞的增殖,引起细胞存活率降低和死亡率增加（均P＜0.01）,但对阴性表达组和THLE-2细胞存活率和死亡率无影响（均P＞0.05）。RECQL-siRNA处理的SK-HEP-1细胞中,剪切型凋亡相关蛋白cleavedcaspase-3和cleavedPARP的表达变化不大,而G2/M期细胞的比例明显增加（P＜0.05或0.01）。结论RECQL基因沉默表达可以抑制HCC细胞的增殖,且这种抑制作用依赖于RECQL的高表达,并对正常肝细胞无影响,其可能机制是阻滞细胞G2/M期,可以作为治疗肝癌的潜在靶向基因。     

EGFR-TKI获得性耐药相关T790M突变研究进展

肺癌是严重危害人类健康的恶性肿瘤之一.据2013年中国肿瘤登记年报,我国肺癌的发病率为53.57/10万,是男性恶性肿瘤发病第1位,女性第2位.同期肺癌的病死率为45.57/10万,在男女恶性肿瘤中均占首位.非小细胞肺癌占80%左右,近一半的患者首诊时伴发远处转移.接受传统化疗药物治疗的患者中位生存期8~10个月[1].     

放疗联合EGFR-TKIs 治疗非小细胞肺癌新进展

在全球范围内,肺癌是造成癌症死亡的最主要原因。非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer ,NSCLC ）约占肺癌的80% ,由于缺乏早期诊断的有效手段,临床上首诊NSCLC 患者仅25% ～30% 可选择根治性手术。对于不能手术切除的局部晚期及晚期NSCLC ,单纯放射治疗或放化疗综合治疗是主要治疗手段,但总体疗效并不理想。近年来,靶向药物开创了 NSCLC 个体化治疗时代,越来越多的证据提示以表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂（epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitors ,EG?FR-TKIs）为代表的靶向药物联合放疗或放化疗治疗NSCLC 具有一定的前景。本文就EGFR-TKIs 联合放疗治疗不可手术的局部晚期及晚期NSCLC 的新进展做一综述。