应用实时荧光RT—PCR方法检测流感病毒（甲和乙型）

多数眼部病毒性疾病是由疱疹病毒组引起的,尤其是非典型的疱疹性角膜炎、虹膜睫状体炎和眼内炎症,这些感染常表现出重叠的临床症状从而引起误诊。传统的诊断方法费时并且敏感性低,分子生物学技术可以为此类病例提供准确而快速的诊断。该研究运用多重聚合酶链反应(PCR)检测眼部标本中的单纯疱疹病毒(HSV),水痘一带状疱疹病毒(VZV)和巨细胞病毒(CMV)。 该研究共检测了146份标本,通过系列稀释HSV、VZV和CMV标准株的方法来决定该检测方法的敏感性。结果发现该方法的敏感性     

表没食子儿茶素没食子酸酯对噪声性耳蜗损伤的影响

目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对噪声性耳蜗损伤的影响.方法 45只豚鼠随机分为EGCG+噪声组、生理盐水+噪声组、正常对照组,每组15只.EGCG+噪声组和生理盐水+噪声组豚鼠在接受噪声暴露(120 dB SPL, 4 h)前一日及每次暴露前1 h分别腹腔注射EGCG(25 mg/1 000 g)和等量生理盐水,正常对照组不予任何处理.噪声暴露后即刻和第1、3、7、14天检测三组豚鼠听性脑干反应(ABR),第14天分离各组豚鼠耳蜗,行耳蜗基底膜、血管纹铺片及免疫组化染色,观察各组豚鼠耳蜗基底膜、血管纹细胞形态及外毛细胞运动蛋白(Prestin)、3-硝基酪氨酸(3-NT)分布的变化.结果 噪声暴露后,EGCG+噪声组各时间点的ABR反应阈均高于对照组,但低于生理盐水+噪声组,从第3天开始,与两组间ABR反应阈差异缩小,但差异仍有统计学意义(均为P<0.05).免疫组织化学染色显示,正常对照组Prestin蛋白显绿染的耳蜗三排外毛细胞排列整齐,无细胞缺失,3-NT主要分布于毛细胞胞质及表皮板;与生理盐水+噪声组相比,噪声暴露后,EGCG+噪声组豚鼠外毛细胞形态较好,Prestin染色清晰;基底膜、血管纹处损伤轻,细胞排列规则,3-NT分布减少.结论 预防性腹腔注射EGCG可减轻噪声引起的耳蜗损伤,对噪声性听力损伤有一定的防护作用.     

噪声损伤引起小鼠耳蜗炎症复合体NLRP3激活及氢气的抑制作用

目的探讨噪声损伤引起小鼠耳蜗炎症复合体NLRP3及半胱氨酸蛋白酶-1的激活,以及氢气吸入的抑制作用。方法选取30只8周龄C57小鼠随机分为对照组、噪声组和噪声+氢气组。免疫荧光和蛋白质免疫印迹法比较各组小鼠耳蜗NLRP3及半胱氨酸蛋白酶-1的分布和含量变化。ELISA法检测各组耳蜗淋巴液IL-1β、IL-6和IL-10浓度。检测各组听性脑干反应阈值以评估听功能。应用SPSS21.0软件进行统计学分析。结果 NLRP3、半胱氨酸蛋白酶-1在内耳毛细胞中表达,噪声后二者表达均显著增加(P<0.05),氢气干预7天后相比噪声组显著降低(P<0.05)。与对照组相比,噪声组耳蜗淋巴液IL-1β(P<0.05)、IL-6升高(P<0.01),IL-10降低(P<0.05)。氢气干预后与噪声组相比IL-1β显著降低(P<0.05)、IL-6显著降低(P<0.01),IL-10显著增加(P<0.01)。噪声暴露后小鼠听性脑干反应阈值较对照组显著升高(P<0.05);噪声组和噪声+氢气组听性脑干反应阈值在噪声暴露后1天无显著差异(P>0.05...     

颈静脉孔区软骨肉瘤的诊断与手术治疗

目的总结分析颈静脉孔区软骨肉瘤的诊断要点、手术方法及治疗效果。方法回顾分析2002年12月至2020年2月在解放军总医院耳鼻咽喉头颈外科接受手术治疗的15例颈静脉孔区软骨肉瘤患者的临床资料, 其中男性2例、女性13例, 年龄22～61岁。总结分析患者的临床表现、影像学特点、诊断要点、手术入路、面神经及后组颅神经功能、疗效及复发等。结果颈静脉孔区软骨肉瘤患者主要症状和体征包括面神经麻痹、听力下降、声音嘶哑、呛咳、耳鸣、局部包块等。影像学检查是术前诊断和鉴别诊断的重要依据:CT表现为颈静脉孔区骨质边缘不规则破坏;颅脑MRI表现为颈静脉孔区T1WI等或低信号、T2WI高信号、增强后不均匀强化的病变。根据病变范围选择手术入路, 15例患者中颞下窝A入路12例, 颞下窝B入路2例, 乳突及颈部联合入路1例。5例面神经严重受侵患者在手术切除肿瘤的同时行耳大神经移植桥接术重建面神经功能, 术前面神经功能House-Brackmann(H-B)分级Ⅴ级4例、Ⅵ级1例, 术后面神经功能恢复至Ⅲ级2例、Ⅳ级3例。术前Ⅸ、Ⅹ脑神经功能障碍者5例, 术后有2例恢复功能, 3例无改善。所有病例均经术后病理及免疫...     

应用实时荧光RT-PCR方法检测流感病毒(甲和乙型)

背景:流感病毒常年在儿童和老年人中发病并引起死亡。诊断流感不仅靠临床表现,还有靠实验室的快速诊断。目的:此研究应用RT-PCR方法从临床标本中快速检测出流感病毒(甲、乙型)。为决定灵敏度和特异度,在方法中特设实时荧光。研究设计:为了鉴定和识别甲型和乙型流感病毒,在荧光共振能量传输(FRET)技术的基础上,利用双向探针系统。根据佛罗里达州流感网络监测点人员的建议,本次试验供选择了58件标本,用组织培养和实时     

面神经血管瘤20例诊治特点分析

目的总结面神经血管瘤的临床特点、手术策略、面神经修复方法及效果。方法回顾性分析2010年1月至2021年12月解放军总医院耳鼻咽喉头颈外科手术治疗的面神经血管瘤患者的临床资料。根据患者临床表现、面神经功能、影像特征, 选择合适的手术策略。术后进行面神经功能随访并评估治疗效果。结果共纳入20例面神经血管瘤患者, 男10例, 女10例, 年龄18～56(36.4±10.7)岁。主要临床症状依次为面神经麻痹(18例, 90.0%)、听力下降(11例, 55.0%)、耳鸣(8例, 40.0%)、面肌痉挛(4例, 20.0%)等。根据术前影像学检查结果及听力情况选择合适的手术入路, 其中经乳突-上鼓室入路5例, 经迷路入路5例, 经中颅窝入路10例。术中探查见65.0%(13/20)的患者为多节段受累, 面神经膝状神经节(16例, 80.0%)、水平段(11例, 55.0%)及迷路段(7例, 35.0%)最常受累。对19例患者同期行面神经修复或减压术, 其中面神经改道吻合2例, 耳大神经桥接移植8例, 面神经-舌下神经吻合2例, 面神经减压7例。术后随访时间17～159(81.9±39.3)个月...     

噪声引起的豚鼠血-迷路屏障损伤及基质金属蛋白酶抑制剂的保护作用

目的通过研究基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)在噪声暴露前、后豚鼠耳蜗血管纹上表达和分布的差异,探索MMP在噪声破坏血-迷路屏障完整性中的作用以及广谱MMP抑制剂多西环素对血-迷路屏障噪声性损伤的保护作用,为进一步研究和防治噪声性聋提供参考。方法45只健康成年豚鼠采用随机数表法随机分为对照组(15只,腹腔注射生理盐水,连续4 d)、单纯噪声暴露组(15只,120 dB SPL白噪声每天暴露4 h,连续2 d;腹腔注射生理盐水,连续4 d)及噪声暴露+多西环素组(15只,120 dB SPL白噪声每天暴露4 h,连续2 d;腹腔注射多西环素50 mg/kg/d,连续4 d)。应用免疫荧光染色、蛋白质印迹(western blot)、荧光实时定量PCR等方法分析对比对照组、单纯噪声暴露组及噪声暴露+多西环素组豚鼠耳蜗血管纹上MMP-2和MMP-9的分布和表达差异。观察三组豚鼠血管纹上紧密连接蛋白ZO-1的变化,探索噪声损伤对血管纹的影响。应用听性脑干反应(ABR)测试分析三组豚鼠听力学差异。静脉注射伊文思蓝,观察血管纹毛细血管渗漏情况在三组间的差异,了解噪声导致血-迷路屏障通透性改变的情况。应用SPSS 22.0软件进行统计学分析。结果单纯噪声暴露组与噪声暴露+多西环素组在噪声暴露后2 h听力改变无明显差异;噪声暴露后7 d、14 d和28 d,噪声暴露+多西环素组听力恢复明显好于单纯噪声暴露组(P值均<0.05)。免疫荧光染色发现对照组MMP-2和MMP-9在血管纹上仅有少量表达,ZO-1呈致密线性表达;单纯噪声暴露组可见血管纹上MMP-2和MMP-9表达显著增加,ZO-1结构松散、不连续;噪声暴露+多西环素组血管纹上MMP-2和MMP-9的表达与对照组无明显差异(P值均>0.05),比单纯噪声暴露组明显减少(P值均<0.05),ZO-1仅出现少量破口,但整体仍保持致密的线性结构。血管纹毛细血管中伊文思蓝染料在单纯噪声暴露组的渗漏显著增加,噪声暴露+多西环素组与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论MMP-2、MMP-9引起的紧密连接蛋白结构的损伤可能是噪声暴露后豚鼠血-迷路屏障破坏的重要机制,多西环素可抑制MMP的分泌,在一定程度上保护血-迷路屏障的完整性,减轻噪声暴露导致的听力损伤。     

耳大神经移植桥接修复面神经缺损84例疗效分析

目的评价耳大神经移植桥接修复面神经缺损的疗效, 分析预后相关因素。方法回顾性收集并分析2010年1月至2021年12月在解放军总医院耳鼻咽喉头颈外科接受耳大神经移植桥接修复各种病因导致面神经缺损患者的临床资料, 评价手术疗效。采用单因素及多因素有序logistic回归分析术后面神经功能的相关因素。结果共纳入84例患者, 男39例(46.4%), 女45例(53.6%), 年龄(38.6±12.6)岁。引起面神经缺损的原发疾病包括面神经肿瘤54例(64.3%), 其他肿瘤5例(6.0%), 中耳手术医源性损伤19例(22.6%), 胆脂瘤6例(7.1%)。术前面瘫时间[M(Q1, Q3)]6(1, 12)个月。术前面神经功能按House-Brackmann(HB)分级Ⅰ级7例(8.3%), Ⅱ级6例(7.1%), Ⅲ级11例(13.1%), Ⅳ级14例(16.7%), Ⅴ级19例(22.6%), Ⅵ级27例(32.1%)。术后HB Ⅲ级46例(54.8%), Ⅳ级26例(31.0%), Ⅴ级12例(14.3%), 术后面神经功能分级整体较术前下降(Z=-4.264, P<0.001...