线粒体DNA大片段缺失与老年性聋的关系

目的 :探讨内耳组织线粒体DNA(mtDNA)大片段缺失与老年性聋发病的关系。方法 :取Wistar大鼠按年龄分为A组 (青年鼠 ,4月龄 )和B组 (老年鼠 ,>2 4月龄 ) ,每组 15只。测试听性脑干反应 (ABR) ,应用聚合酶链反应 (PCR)技术对大鼠内耳膜迷路组织mtDNA 4 834bp缺失片段进行检测。结果 :A、B组大鼠ABR反应阈均值分别为 :(4 0 .0 0± 4 .6 6 )dBpeSPL、(6 4 .79± 10 .88)dBpeSPL ,二者之间差异有显著性意义 (P <0 .0 1)。大鼠内耳组织mtDNA检测发现 :A组大鼠未检测到 4 834bp缺失 ;B组大鼠有 9只存在 4 834bp缺失。 结论 :老年大鼠内耳膜迷路组织存在mtDNA片段缺失 ,这种缺失与老年性聋有关 ,可能是引起老年性聋的原因之一     

甲状腺疾病1350例外科治疗分析

目的　研究接受外科治疗的甲状腺疾病的构成,总结治疗效果。方法　回顾性分析 10 年间收治的 1350 例甲状腺手术病人的临床资料。结果　外科治疗以结节性甲状腺肿(59.95%)、甲状腺腺瘤(16.59%)为主,甲亢手术减少(P<0.01) ,桥本病有所增加(P<0.05);局限于一侧的良性疾病近来以单侧腺叶切除术(21.32 %) 为主,甲状腺癌主要行患侧腺叶、峡部联合对侧次全切除术;麻醉方式以全身麻醉为主;总体手术并发症发生率3.95% ,重视术后规范、系统的替代治疗;总体术后复发率 2.01% 。结论　手术方式应根据病变性质、部位、大小及淋巴结转移情况而采取个体化方案;专业化培训、细致操作以及全身麻醉等措施可有效减少并发症的发生,降低术后复发率。     

老龄大鼠氨基苷类抗生素耳毒易感与线粒体DNA片段缺失

目的 :分析大鼠内耳组织线粒体DNA(mtDNA)片段缺失与氨基苷类抗生素 (AmAn)致聋的对应关系 ,探讨线粒体DNA片段缺失在老年大鼠AmAn耳毒易感中的可能作用。方法 :将Wistar大鼠 30只按月龄分为A组 (老龄鼠 ,>2 4个月龄 )和B组 (4个月龄鼠 ) ,每组 15只 ;均连续腹腔注射卡那霉素 (KM ) ,每日 5 0 0mg/kg ,共 10d。用药前、后测试听性脑干反应 (ABR)阈值 ,并用聚合酶链反应 (PCR)对大鼠内耳组织mtDNA483 4 缺失片段进行检测。结果 :①A ,B组大鼠用KM前、后 ,ABR反应阈提高 ,阈移均值分别为 :(42 .0 8± 8.5 9)dBpeSPL ,(12 .71± 4 .4 2 )dBpeSPL ,二者间差异有统计学意义 (P <0 .0 1) ;②A组大鼠有 10只存在mtDNA483 4 缺失 ,其中检测到mtDNA483 4 缺失的 10只大鼠和未检测到此缺失的 5只大鼠 ,阈移均值分别为 (45 .0 0± 7.6 7)dBpeSPL ,(33.33± 4 .0 8)dBpeSPL ,两者间差异亦有统计学意义 (P <0 .0 1) ;而B组大鼠未发现此片段缺失。结论 :老龄大鼠内耳组织存在mtDNA片段缺失 ,且此片段缺失可能增加其对AmAn耳毒作用的敏感性     

大鼠耳蜗感觉上皮细胞的原代培养及其意义

目的：建立大鼠耳蜗感觉上皮细胞（CSEC）的原代培养体系，为研究毛细胞再生的分子机制提供大量来源一致的细胞。方法：取出生1d（P1）的大鼠耳蜗感觉上皮（Corti器）作组织块培养，选择性消化抑制成纤维样细胞（FLC）生长；应用有限稀释法纯化CSEC，倒置显微镜下观察CSEC的形态、生长特征；应用细胞角蛋白18、波形蛋白、Brn3．a和Calretinin的免疫细胞化学及透射电镜等进行鉴定。Brdu标记CSEC核DNA观察CSEC有丝分裂活动。结果：培养第2天CSEC从组织块迁移出来，呈扁平、多角形、核大而圆的上皮细胞形态，细胞之间连接紧密，形成单层时呈“铺路石样”外观；FLC呈梭形“鱼群样”包绕CSEC生长，增殖速度快于CSEC。由纯化的CSEC构成的上皮单层可见由成百个CSEC包绕液体形成的dome。CSEC表达毛细胞的特征性标志物，证实培养的CSEC具有毛细胞前体细胞的特征；并通过有丝分裂活动产生新的细胞即毛细胞样细胞。结论：体外培养的CSEC表达毛细胞特征性标志物，具有毛细胞前体细胞的特征。CSEC原代培养体系的建立，为进一步探讨毛细胞再生的分子机制提供了实验条件。