二次固定法在内耳耳蜗切片标本制作中的应用

内耳耳蜗的结构非常特殊,由两套管道套叠而成：外层骨蜗管（bony cochlear duct）和内层膜蜗管（membranous cochlear duct）[1-2]。特殊的结构导致了标本制作时膜蜗管内组织极易自溶、取材耗时久、不易及时固定等难题。许多研究者采用了各自不同方法制作内耳切片标本,比较经典的有耳蜗开窗固定法[3]、颈动脉灌注法[4]、石蜡包埋切片法[5-8]、OCT包埋冷冻／恒冷切片法[9-10]、非脱钙冷冻切片法[11-12]、石蜡火棉胶双重包埋切片法[3,13]、火棉胶包埋切片法等[14],但这些方法不是未能取得满意的效果,就是制作过程复杂、周期长,难以批量制作切片标本。本研究采用心脏灌注在第一时间对豚鼠内耳组织进行初步迅速固定,再在耳蜗顶尖部及底部钻孔后二次充分固定,保留内耳膜蜗管的完整结构,以期找出一种理想的内耳切片标本制作方法。