MTDH促进头颈鳞癌细胞放疗抵抗的实验研究

目的探讨星形胶质细胞上调基因1（astrocyte elevated gene 1,AEG 1,又称MTDH）对头颈部鳞状细胞癌（简称头颈鳞癌）放疗抵抗的影响。方法Western blotting检测放射线照射后头颈鳞癌细胞MTDH蛋白表达的改变。通过脂质体转染的MTDH cDNA和慢病毒介导的MTDH shRNA,分别在不同头颈鳞癌细胞中过表达和抑制MTDH,平板集落形成实验检测头颈鳞癌细胞放疗抵抗能力的改变,细胞免疫荧光染色检测DNA双链损伤指标γH2AX的表达。结果MTDH在头颈鳞癌细胞中的表达随着放射性照射剂量的增加和时间的延长逐渐升高。在CNE 2细胞中过表达MTDH,其体外集落形成能力增强;相反,在Tu686细胞中抑制MTDH的表达,其体外集落形成能力减弱。同时,细胞免疫荧光显示Tu686细胞在MTDH抑制后,其DNA双链损伤指标γH2AX的表达增加,表明DNA双链损伤修复过程受阻。结论MTDH能促进头颈鳞癌细胞放疗抵抗的形成,与其对DNA双链损伤修复的调控作用相关。     

EphA2经P-糖蛋白调控鼻咽癌紫杉醇敏感性的实验研究

摘要：目的探讨EphA2经P 糖蛋白(P glycoprotein,P gp)调控鼻咽癌紫杉醇耐药性的分子机制。方法使用慢病毒载体在鼻咽癌细胞中沉默或过表达EphA2,Western blotting检测P gp蛋白的表达变化; siRNA干扰沉默P gp表达,CCK8法检测P gp蛋白在EphA2介导的鼻咽癌紫杉醇耐药中的作用;小分子化合物LY294002阻断PI3K/Akt信号通路,观察该通路在EphA2调控P gp表达中的作用。结果P gp在EphA2沉默组中表达下调,过表达组中上升;紫杉醇作用于空白对照组、阴性对照组和P gp沉默组的细胞存活率分别是(68.9±4.0)%、(72.4±6.2)%和(52.1±3.7)%,P gp沉默组对紫杉醇的耐药性较空白和阴性对照组降低(P<0.05);在过表达EphA2的鼻咽癌细胞中下调P gp表达,紫杉醇刺激后,P gp沉默组的存活率(36.1±5.1)%显著低于空白对照组(57.9±6.2)%和阴性对照组(58.2±5.8)%(P<0.05);在EphA2过表达鼻咽癌细胞中,给予抑制剂LY294002作用后,Akt总量无明显改变而磷酸化的Akt表达下降,且P gp表达下降。结论EphA2通过P gp依赖性途径促进鼻咽癌紫杉醇耐药,且P gp蛋白的表达增高与EphA2活化PI3K/Akt有关。     

MiR-98靶向MTDH调控鼻咽癌恶性进展的实验研究

目的探讨miR 98对鼻咽癌细胞体外增殖和侵袭能力的影响及其可能机制。方法利用脂质体介导的miR 98 mimic（及阴性对照）转染鼻咽癌CNE 1和CNE 2细胞,CCK 8检测其体外增殖能力的改变,划痕愈合及Transwell侵袭小室实验检测鼻咽癌细胞的体外迁移及侵袭潜能变化,生物信息学软件预测miR 98可能的靶基因,并经双荧光素酶及Western blotting验证靶基因。结果MiR 98过表达能抑制鼻咽癌CNE 1和CNE 2细胞的体外生长增殖、迁移及侵袭能力;miR 98对MTDH具有直接靶向调控作用。结论本研究表明miR 98能够靶向MTDH调控鼻咽癌细胞株的体外生长增殖及侵袭能力。     

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者相关免疫功能变化的研究进展北大核心CSCD

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)是目前最为常见的一种睡眠呼吸障碍疾病,可导致夜间打鼾、睡眠结构紊乱、睡眠低氧血症、高碳酸血症等病理生理的改变,引起多器官多系统的损害。OSAHS患者体内存在免疫功能改变,多数研究提示固有免疫、细胞免疫、体液免疫均存在下降情况,可能与缺氧再氧合机制有关。本文就OSAHS患者出现的具体免疫功能变化及可能的机制作一综述,为寻找新的诊断指标及治疗干预靶点提供方向。     

MiR-22经上皮-间质转化调控头颈鳞癌的侵袭转移

目的探讨miR 22对头颈部鳞状细胞癌（头颈鳞癌）上皮-间质转化（epithelial mesenchymal transition, EMT）和侵袭转移的影响。方法利用脂质体介导的miR 22 mimic及inhibitor（含阴性对照）分别转染头颈鳞癌Tu686细胞，划痕实验及Transwell侵袭实验检测其体外迁移及侵袭能力的改变，Western blotting检测EMT分子标志物的改变。结果hsa miR 22 mimic能抑制Tu686细胞的体外迁移及侵袭能力，相反hsa miR 22 inhibitor能促进Tu686细胞的体外迁移及侵袭能力。且miR 22过表达后能在Tu686细胞中抑制EMT的分子标志物改变，即E cadherin的表达上调和Vimentin的表达下调。结论本研究表明miR 22对头颈鳞癌细胞的体外迁移侵袭能力具有调控作用，该调控作用的发生与miR 22对EMT的抑制作用密切相关。