实验性氟中毒的肾损害及其发生机理探讨

给大鼠投予过量氟引起的肾损害包括:近端肾小管上皮细胞的变性坏死和伴随发生的再生修复;肾单位较低部位的阻塞和皮髓交界处的肾小管扩张。代表脂质过氧化物水平的丙二醛(MDA)在加氟组大鼠的肾匀浆明显上升,而谷胱甘肽过氧化物酶活性则明显下降。氟对培养大鼠肾上皮细胞的损害主要为细胞收缩和膜系统改变,培养肾上皮细胞的 MDA 亦显著增高。上述结果表明,因脂质过氧化而导致肾小管上皮细胞膜系统的损伤,可能是氟中毒引起肾脏病变的重要机制之一。     

氟对大鼠成骨细胞Runx2表达的影响

目的 研究氟对体外培养大鼠乳鼠成骨细胞中Runx2表达的影响.方法 体外培养Wistar大鼠乳鼠成骨细胞,按染氟剂量分为0(对照组)、1、2.4 mg/L 4个水平,分别在48、72 h后,提取RNA,采用反转录聚合酶链反应(RT-PcR)方法检测Runx2 mRNA表达;采用酶联免疫吸附试验(EUSA)方法检测培养液上清中的Runx2蛋白质.结果 Wistar大鼠乳鼠成骨细胞在体外染氟培养48 h后,1、2、4mg/L染氟水平下Runx2的mRNA表达(0.613±0.055、0.773±0.070、0.775±0.070)与对照组(0.482±0.043)比较.差异均有统计学意义(P<0.05);在染氟培养72 h后,1、2,4 mg/L染氟水平和对照组的Runx2 mRNA表达量分别为0.969±0.048、1.229±0.061、1.255±0.063、0.724±0.036,任意两组问比较,差异均有统计学意义(P<0.05).各染氟组Runx2mRNA表达,72 h组均高于铝hm(P<0.05);染氟剂量和染氟时间有交互作用(F=189.20,P<0.05).在染氟培养48 h后,1、2、4 mg/L染氟水平下的Runx2蛋白质表达(0.141±0.007、0.143±0.008、0.143±0.011)与对照组(0.129±0.012)比较,差异有统计学意义(P<0.05);在染氟培养72 h后,1、2、4 mg/L染氟水平下的Runx2蛋白质表达(0.156±0.014、0.168±0.018、0.162±0.010)与对照组(0.137±0.016)比较.差异有统计学意义(P<0.05);各染氟剂量Rung2蛋白质表达.72 h组均高于48 h组(P<0.05),染氟剂量和染氟时间之间无交互作用(F=2.22,P0.05).结论 氟可促进成骨细胞Runx2的mRNA和蛋白质表达,与染氟的剂量以及作用时间有关.     

主诊医师负责制对医疗效率的影响研究

目的:评价中日友好医院主诊医师负责制实施前后对医疗效率的变化情况.方法:从医院HIS系统中提取平均住院日、入院患者数、床位使用率的相关数据,运用间断时间序列分析,剔除自然成长因素的影响后,比较各效率指标在主诊医师负责制实施前后的差异及变化趋势.结果:间断时间序列模型分析结果显示,实施主诊医师负责制后,医院平均住院日显著...     

肉毒碱对酒精性心肌病心肌代谢和重构的影响及机制研究

目的 观察肉毒碱对酒精性心肌病(ACM)发病过程中代谢紊乱及心脏重构的防治机制及作用.方法 将实验动物分为3组:酒精(A)组、酒精/药物(B)组和对照(C)组.检测血清游离脂肪酸(FFA)、肉毒碱含量,测定心肌组织过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)α和PPARγ、类维甲酸受体(RXR)a、肉毒碱棕榈酰转移酶Ⅰ(CPT-Ⅰ)、中链脂酰辅酶A脱氢酶(MCAD)的mRNA和蛋白表达.结果 (1)与C组比较,A组和B组FFA含量升高,肉毒碱含量下降,PPARα、RXRα、CPT-Ⅰ和MCAD的mRNA和蛋白表达量随ACM进展逐渐减少,A组比B组更为显著(P<0.05).(2)在2和4个月时,A、B和c组PPA脚mRNA和蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05).6个月后B组PPARγ表达量增加,A组表达降低,和C组比较,差异均具有统计学意义(A比C,P<0.01;B比C,P<0.05).结论 ACM进展中发生心肌能量代谢紊乱和心脏重构,肉毒碱可能通过上调PPARα、RXRα、CPT-Ⅰ和MCAD改善心肌代谢障碍,通过上调PPARγ预防心脏重构.     

骨髓基质干细胞移植对正常和心肌梗死大鼠心电图及心功能的影响

目的:骨髓基质干细胞移植到心肌梗死的瘢痕心肌组织中可以改善心功能,但以心电图为观察指标的研究不多。实验观察骨髓基质干细胞移植对正常和心肌梗死大鼠心电图及心功能的影响。方法:实验于2004-01/2005-03在哈尔滨医科大学完成。①实验动物:选取4周龄雄性Wistar大鼠80只,随机数字表法分为梗死移植组、正常移植组、梗死非移植组、正常非移植组,20只/组。另选取7d龄Wistar雄鼠30只作为骨髓基质干细胞的来源。②实验方法:采用密度梯度离心法获取鼠骨髓基质干细胞,配成1×109L-1的细胞悬液,使用5-氮胞苷体外诱导培养3～4周,移植前24～48h行Brdu标记。取载有细胞的盖玻片,测定钙释放时将20mmol/L的caffeine快速加在细胞表面。梗死移植组、梗死非移植组大鼠建立心肌梗死模型。造模4周后,梗死移植组将0.25mL诱导的骨髓基质干细胞悬液注射至大鼠心肌梗死后的瘢痕组织,正常移植组同法将骨髓基质干细胞悬液注射至正常心肌组织,梗死非移植组、正常非移植组注射等量不含骨髓基质干细胞的培养液基质。③实验评估:观察骨髓基质干细胞的诱导分化情况及其植入后在瘢痕心肌组织中的生存状态。测定细胞内钙离子浓度。记录术前、冠脉结扎后即刻/细胞移植即刻、术后4周的心电图变化。检测术后4周的超声和血流动力学指标变化。结果:80只大鼠均进入结果分析。①骨髓基质干细胞的诱导分化及其植入后的生存状态:5-氮胞苷诱导3周后,骨髓基质干细胞表达肌钙蛋白Ⅰ和肌凝蛋白重链,细胞内有丰富的肌丝和Z线,细胞器较多。植入4周后在心肌瘢痕组织中分化为心肌细胞。②细胞内钙离子浓度:两组细胞在caffeine刺激下钙离子的释放均呈波峰状,但诱导组应用caffeine后钙离子浓度降低且低于基础状态,钙释放受到抑制,未诱导组不受影响。③心电图观察:与术前比较,梗死移植组QRS波变窄,R波降支出现正常顿挫波,未见显著心律失常。④超声检测及血流动力学分析:术后4周,与梗死非移植组比较,梗死移植组左室收缩末压、左室射血分数和压力变化速率最大值均显著升高(P<0.05或0.01)。结论:骨髓基质干细胞体外诱导后能分化为心肌样细胞,植入到瘢痕心肌组织中生存、增殖良好,可改善心电图及心肌弹性,从而改善心肌梗死大鼠的心功能。     

造血干细胞移植对急性心肌梗死大鼠心功能影响的研究

目的探讨同种异体CD34^＋干细胞移植对急性心肌梗死（AMI）大鼠心功能的影响，同时评价干细胞移植的有效性和安全性。方法Wistar雄性大鼠29只，随机分成3组：干细胞移植组（10只），急性心肌梗死对照组（10只），假手术组（9只）。移植组和对照组鲒扎左冠状动脉前降支造成急性心肌梗死模型。另选同种异体大鼠10只，将粒细胞集落刺激因子（GCSF）动员的外周血CD34^＋干细胞经免疫磁珠法分离纯化后，在冠脉结扎后7d，经心外膜注入到移植组大鼠体内，对照组和假手术组注入等量磷酸盐缓冲液（PBS）。心梗术前，干细胞移植术后1、2和4周分别行心脏超声检查，术后4周行血液动力学测定。结果心肌梗死后4周，与对照组比较，移植组左室射血分数（LVEF）、左室短轴缩短率（FS）、左室收缩未压（PES）和左室压力最大上升速率（dp／dtmax）明显提高（P〈0.01），左室收缩未直径（LVESD）、左室舒张未压（PED）、左室压力最大下降速率（dp／dtmin）和左室等容舒张时间常数（R）均明显减小（P〈0．01）。结论经心外膜途径移植外周血干细胞是安全可行的，它能有效地改善心功能，为AMI的治疗提供一条行之有效的新途径。     

不同CD34+干细胞移植途径对缺血性心肌病大鼠心功能影响的研究

目的 探讨同种异体CD34+干细胞不同移植途径对心肌梗死后心力衰竭大鼠心功能的影响,同时评价干细胞移植的有效途径和安全性.方法 Wistar雄性大鼠64只被随机分成3组:干细胞移植组(30只);急性心肌梗死模型组(20只);假手术组(14只).移植组和模型组结扎左冠状动脉(冠脉)前降支造成缺血性心肌病模型;假手术组只开胸,不结扎冠脉.另选同种异体大鼠30只,将粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员的外周血CD34+干细胞经免疫磁珠法分离纯化后制成干细胞悬液,在冠脉结扎后7 d分别经股静脉和心外膜注入到移植组大鼠体内,模型组和假手术组注入等量磷酸盐缓冲液(PBS).于制模前、干细胞移植术后1、2和4周分别行心脏超声检查,术后4周进行血流动力学测定.结果 与模型组比较,心肌梗死后4周移植组左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(ΔFS)、左室收缩期末压(LVESP)和左室内压最大上升速率(+dp/dt max)明显提高(P均＜0.01),左室收缩期末直径(LVESD)、左室舒张期末压(LVEDP)、左室内压最大下降速率(-dp/dt max)和左室等容舒张时间常数(Tc)均明显减小(P均＜0.01);股静脉移植和心外膜移植两种途径对心功能的影响差异无统计学意义(P均＞0.05).结论 经股静脉和心外膜两种途径移植外周血干细胞是安全可行的,二者均能有效地改善心功能,有助于梗死心肌的修复.     

体外诱导骨髓干细胞转化成心肌细胞的实验研究

目的　探讨 5 -氮胞苷 (5 -aza)浓度对骨髓基质干细胞 (MSCs)向心肌细胞转化的影响。方法　利用梯度离心法分离大鼠MSCs ;用 5 -aza对MSCs进行体外诱导转化 ,并使用心肌特异性抗体 (肌钙蛋白I和肌凝蛋白重链 )对诱导后的MSCs进行免疫组化染色 ,进行光镜和电镜观察。结果　分离培养后的MSCs生长密集 ,形态呈纺锤状 ,在 5 μmol/L和 10 μmol/L 5 -aza的诱导下分化成类心肌细胞 ,HE染色结果 :胞浆嗜酸性 ,免疫组化染色心肌特异性抗体阳性。电镜发现 :胞核居细胞中央 ,肌丝和幼稚肌结形成。结论　 5 -aza是促进干细胞向心肌细胞转化的有效诱导剂 ,以 5 μmol/L的 5 -aza对MSCs向心肌细胞转化的影响最大。     

由医疗投诉谈我国医师职业精神建设

目的 通过399例医疗投诉记录,分析我国医师职业精神现状及存在的问题,为我国医师职业精神建设提供意见及建议.方法 采用回顾性研究和鱼骨图法,以《医师宣言》中10条医师职责为基本框架,分析医疗投诉的主要原因.结果 医师告知不充分、与患者缺乏有效沟通、未遵守诊疗常规等是医疗投诉的主要原因,揭示了我国医师职业精神建设中的薄弱环节.结论 在我国医师职业精神的建设中,应强调医师尊重患者权利、充分履行告知义务的重要性.     

骨髓干细胞不同移植途径对急性心肌梗死大鼠心功能的影响

目的：观察同种异体骨髓间充质干细胞经不同移植途径对急性心肌梗死大鼠心功能的影响，同时评价干细胞移植的有效性和安全性。 方法：实验于2004-05／2005-12在哈尔滨医科大学中心实验室完成。①Wistar雄性大鼠50只，采用随机数字表法分成千细胞移植组（n=30）和心肌梗死对照组（n=20）。移植组和对照组结扎左冠状动脉前降支造成急性心肌梗死模型。②冠脉结扎后7d，移植组经股静脉和心外膜分别注入骨髓间充质干细胞（含15&;#215;10^8细胞），对照组注入等量DMEM培养液。③分别于干细胞移植前、移植后1，2和4周行心脏超声检查，术后4周行血液动力学测定，观察心功能的变化。 结果：存活43只模型制作成功的大鼠，分为干细胞移植组25只，其中股静脉注射12只，心外膜注射13只；心肌梗死对照组18只。①心肌梗死后4周，移植组左心室射血分数、左心室短轴缩短率、左心室收缩末压和左心室压力最大上升速率比对照组明显提高（左心室射血分数，股静脉：（54．3&;#177;1．8）％比（42．4&;#177;1．9）％，心外膜：（55.2&;#177;1．7）％比（43．5&;#177;2．0）％；左心室短轴缩短率，股静脉：（45．0&;#177;1．1）％比（33．5&;#177;0．9）％，心外膜：（46．5&;#177;0．9）％对（32.8&;#177;0．7）％；左心室收缩末压，股静脉：（104．2&;#177;3．8）比（98．2&;#177;4．6）mmHg，心外膜：（105．4&;#177;2．3）比（102．3&;#177;3．6）mmHg；左心室压力最大上升速率，股静脉：（8290&;#177;811）比（6987&;#177;612）mmHg／s，心外膜：（8158&;#177;745）比（7015&;#177;740）mmHg／s：P〈0．01）。②左心室收缩末直径、左心室舒张末压、左室压力最大下降速率和左心室等容舒张时间常数均明显减小（P〈0．01）。③股静脉移植组和心外膜移植组对心功能的影响差异无显著意义（P〉0．05）。 结论：经静脉和心外膜两种途径移植骨髓间充质干细胞是安全可行的．二者均能有效地改善心功能，为急性心肌梗死的治疗提供一条行之有效的新途径。