组织学与胚胎学结合哲学思维培养医学生生命观的研究

长久以来,医学生生命观教育不容乐观。医学生生命观教育一直着重于开设各类生命观培养的理论课以及心理健康疏导,没有与医学生的专业设置紧密联系,效果还有待提高。充分利用现有的教学资源,结合医学专业设置的特点,由医学专业教师、人文专业教师、辅导员组成授课团队。在医学专业方面,组织学与胚胎学结合哲学思维培养训练学生逻辑思维能力、批判精神、创新思维以及解决问题的能力。在生命观塑造方面,培养医学生认识生命、尊重生命、欣赏生命、救护生命,以及对他人、自然、社会的关爱,增强生命责任意识,形成积极向上的生命观。     

组织学与胚胎学双语教学的探索与实践

医学专业课程的双语教学已在我校推行,由于涉及教与学两方面诸多问题,在推行的过程中会遇到不少的困难与问题,但实施双语教学是势在必行的趋势~([1-3]).为适应这一发展趋势,使教学质量得到不断提高,在广西壮族自治区教育厅和学校领导的支持下,作为国家教育部2008年度双语示范课程和自治区重点课程及精品课程的学科,本教研室在新形势下对组织学与胚胎学课程的双语教学进行了探索和实践,在对2005级～2007级5年制本科及7年制本硕的双语教学实践中,取得了一些初步的认识和经验.     

大鼠骨髓间充质干细胞在特定培养液条件下向软骨细胞表型定向分化的实验

背景组织工程化软骨的构建为软骨缺损的修复开辟了全新的途径,克服了传统治疗方法的不足.目的探讨分离骨髓间充质干细胞,在特定培养液条件下诱导其向软骨细胞表型转化的体外培养方法.设计完全随机实验.单位广西医科大学第一附属医院创伤骨科、手外科及广西医科大学组织学与胚胎学教研室.方法实验于2002-08/2003-04在广西医科大学完成.实验动物选择新生断奶SD大鼠20只.抽取大鼠四肢骨髓,Percoll梯度分离液离心分离结合贴壁筛选法得到间充质干细胞,在含体积分数0.15的胎牛血清的低糖DMEM培养液中,置于37℃,体积分数为0.05的CO2培养箱内培养10～14 d.传代后以体积分数0.15的胎牛血清的高糖DMEM培养液(含转化生长因子β110μg/L,地塞米松10-7mol/L,维生素C 50 mg/L)对其进行诱导培养.主要观察指标观测在体外特定培养条件下间充质干细胞的形态、生长特点和诱导培养后软骨特异性基质的表达情况.结果所有20只SD大鼠全部进行分析观察,无一例脱失.①分离获取了较高纯度的骨髓间充质干细胞,保持了细胞的活性.②骨髓间充质干细胞原代培养呈均匀分布的集落样生长,呈长梭形;传代培养中形态特性无明显变化,细胞增殖周期缩短,细胞均质性明显提高.③诱导后的细胞由梭形向多角形转变,Ⅱ型胶原免疫组化阳性.④诱导培养后软骨特异性基质Ⅱ型胶原免疫组化阳性.结论①采用Percoll梯度分离液离心分离结合贴壁筛选法可获得较高纯度和活性的骨髓间充质干细胞.②间充质干细胞在体外特定培养条件下能大量增殖,实现数量扩增.③间充质干细胞在特定培养液的诱导下能向软骨细胞表型转化,并能分泌软骨特异性基质,可成为软骨组织工程理想的种子细胞.     

血清培养基辅以碱性成纤维细胞生长因子培养扩增小鼠神经干细胞

背景：神经干细胞是一类具有自我更新和多向分化潜能的特殊细胞，是研究神经系统的发生、发育、发展规律及其内在的分子生物学、细胞学调控机制的理想载体，在神经系统疾病及损伤的治疗中具有广阔的应用前景。探讨一套较为简便、有效和实用的神经干细胞体外培养体系是其应用的前提和基础。 目的：观察血清培养基并辅以碱性成纤维细胞生长因子对小鼠神经干细胞体外培养的影响。设计：单一样本观察。 单位：右江民族医学院组织学与胚胎学教研室。 材料：2个月龄昆明种小白鼠5只，雌雄不拘。方法：实验于2003-06／2005-05在广西医科大学组织学与胚胎学试验室完成。①采用贴壁培养法，从成年小鼠大脑皮层分离并体外培养成年小鼠大脑皮层细胞，制成细胞悬液后将其置人DMEM／T12（1：1）液（包括体积分数为0．15的胎牛血清，碱性成纤维细胞生长因子20帆，青霉素100u／mL和链霉素100u／mL）培养，获得细胞克隆。②应用免疫组织化学技术检测克隆细胞巢蛋白的表达。 主要观察指标：①培养细胞形态学观察。②培养细胞苏木精-伊红染色观察结果。㈣神经干细胞鉴定。 结果：④培养细胞形态学观察：细胞接种后，绝大多数细胞在12h内附壁，细胞变扁平，接种后第3天，细胞开始生长，细胞数量增多，接种后第5天时生长成为数10个细胞到数百个细胞克隆，到第七八天，细胞占据瓶底80％～90％。经传代后仍成黏附生长，细胞形态规则，边界清楚。②培养细胞苏木精-伊红染色观察结果：可见细胞圆形或椭圆形，胞质少呈嗜酸性，细胞核大而圆，单个居中，着色深。③神经干细胞鉴定：免疫荧光检测显示，细胞巢蛋白抗原呈阳性。 结论：分离的小鼠大脑皮层细胞在血清培养基并辅以碱性成纤维细胞生长因子的培养条件下，具有很强的增殖能力，传代后表达巢蛋白，依然具有神经干细胞的特征。     

高糖抑制体外培养Müller细胞生长

Müller细胞作为视网膜的重要组成部分，除了对视网膜神经细胞有支持和营养作用外，还在视网膜神经递质、钾离子、pH值的调节以及神经细胞的信号传递等方面发挥重要的作用，其改变不似可以引起视网膜血管病变，还能导致神经元的功能障碍。为研究Müller细胞在糖尿病性视网膜病变形成机制中的作用，本实验探讨高糖对Müller细胞存活和形态学的影响。     

大鼠骨髓间充质干细胞在特定培养液条件下向软骨细胞表型定向分化的实验

背景：组织工程化软骨的构建为软骨缺损的修复开辟了全新的途径，克服了传统治疗方法的不足、目的：探讨分离骨髓间充质干细胞，在特定培养液条件下诱导其向软骨细胞表型转化的体外培养方法。设计：完全随机实验单位：广西医科大学第一附属医院创伤骨科、手外科及广西医科大学组织学与胚胎学教研率方法：实验于2002-08／2003-04在广西医科大学完成。实验动物选择新生断奶SD大鼠20只抽取大鼠四肢骨髓，Perrcoll梯度分离液离心分离结合贴擘筛选法得到间充质下细胞，在含体积分数0．15的胎牛血清的低糖DMEM培养液中，置于37℃，体积分数为0．05的CO2培养箱内培养10～14d。传代后以体积分数0.15的胎牛血清的高糖DMEM培养液（含转化生长因子β1 10μg/L．地塞米松10^-7mol/L维生素C50mg／L）对其进行诱导培养。主要观察指标：观测在体外特定培养条件下间充质干细胞的形态、生长特点和诱导培养后软骨特异性基质的表达情况结果：所有20只SD大鼠全部进行分析观察，无一例脱失：①分离获取了较高纯度的骨髓间充质干细胞，保持了细胞的活性。②骨髓间充质干细胞原代培养晕均匀分布的集落样生长，呈长梭形；传代培养中形态特性无明显变化，细胞增殖周期缩短，细胞均质性明显提高。③诱导后的细胞由梭形向多角形转变，Ⅱ型胶原免疫组化阳性。④诱导培养后软骨特异性基质Ⅱ型胶原免疫组化阳性结论：①采用Percoll梯度分离液离心分离结合贴壁筛选法可获得较高纯度和活性的骨髓间充质十细胞②间充质于细胞在体外特定培养条件下能大量增殖，实现数量扩增、③间充质干细胞在特定培养液的诱导下能向软骨细胞表型转化，并能分泌软骨特异性基质，可成为软骨组织工程理想的种子细胞。     

昆明种小鼠胚胎神经干细胞的分离及培养**

目的：在神经干细胞的分离培养过程中,国内外的报道多数是用胰蛋白酶对组织细胞进行消化,但是消化时间比较难把握。采用胰酶消化与机械分离法相结合的方式对昆明种小鼠胚胎脑神经干细胞进行分离、培养和初步的免疫组织化学检测,为相关研究建立实验条件。方法：实验于2006-10/2007-09在广西医科大学基础医学实验室完成。实验室为广西重点实验室、基础医学博士后工作站。 ①实验材料：孕14~16 d的昆明种小鼠由广西医科大学实验动物中心提供,实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准。②实验方法：分离昆明种小鼠胎鼠的脑组织,经胰酶消化加机械吹打后,在加入碱性成纤维细胞生长因子和表皮细胞生长因子的B27无血清培养基中培养。③实验评估：用免疫细胞化学方法鉴定分离的神经干细胞。结果：在无血清DMEM/F12培养液中,加入碱性成纤维细胞生长因子、表皮细胞生长因子及B27的条件下,培养24 h后可见细胞以悬浮方式生长,三五聚集成团块,48 h后形成由十数个至数十个细胞组成的,大小不等的细胞球,形态规则,细胞无突起,形成典型的神经球,可传代。免疫细胞化学法检测显示,细胞表达神经巢蛋白。结论：①来自昆明种小鼠胎脑的神经干细胞能在体外培养、增殖并具有增殖传代能力。②无血清B27培养基添加表皮细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子有利于神经干细胞的体外培养和促进其增殖。     

低渗结合自然沉降法分离兔骨髓间充质干细胞及其鉴定

背景：骨髓间充质干细胞数量极少,10万个骨髓有核细胞中才有1个骨髓间充质干细胞,如何成功分离并鉴定骨髓间充质干细胞是研究中的关键工作。目的：建立完善的骨髓间充质干细胞体外分离培养体系,从细胞的形态、表型和功能方面鉴定骨髓间充质干细胞。方法：低渗原理去除杂细胞,结合自然沉降分离骨髓间充质细胞,并对其形态学特征进行光镜观察。对骨髓间充质细胞的表型进行流式细胞仪检测。并将骨髓间充质细胞向成骨细胞和脂肪细胞进行诱导分化,行形态学观察和碱性磷酸酶、Von kossa、Ⅰ型胶原、油红O染色检测。结果与结论：实验分离获取的骨髓间充质细胞经表型鉴定为：CD29(+),CD45(-);向成骨细胞诱导后,碱性磷酸酶、矿化结节染色及Ⅰ型胶原检测均为阳性;向脂肪细胞诱导后,油红O染色阳性。结果表明实验分离的骨髓间充质细胞为类成纤维细胞样非造血类干细胞,此类细胞具有向成骨细胞和脂肪细胞分化的功能。     

心肌组织裂解液诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞的分化

背景：干细胞具有“环境依赖性分化”特性,以心肌组织裂解液模拟心肌微环境诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞方向分化的研究甚少。目的：观察心肌组织裂解液对大鼠骨髓间充质干细胞向心肌细胞方向分化的影响。方法：选用生长良好的第2代骨髓间充质干细胞,加入诱导液连续培养5周,连续观察细胞形态学特征的变化规律,采用α-Actin进行免疫细胞化学染色观察干细胞是否向肌细胞方向分化,收集诱导后的细胞行苏木精-伊红染色观察是否存在闰盘,并通过电镜观察其超微结构。结果与结论：加入诱导液后大部分细胞呈“竹节样”,α-Actin免疫细胞化学染色阳性,表明间充质干细胞向肌细胞方向分化;苏木精-伊红染色可见闰盘,透射电镜下见排列整齐明暗相间的肌丝,扫描电镜下可见胞浆内有纤维状结构,说明“竹节样”细胞具有心肌细胞的典型形态结构特点。连续诱导12 d多个区域出现成片的、具有自律性搏动的多核肌管结构。心肌组织裂解液可模拟心肌细胞的微环境,诱导骨髓间充质干细胞分化为具有典型形态结构特征和相应功能活动的心肌样细胞。     

医院中心供氧实时监控系统的CAN总线接口设计

本文阐述了一种医院中心供氧实时监控系统中CAN总线接口的设计及验证过程。针对医院中心供氧实时监控系统数据传输和控制的要求,采用微处理器MSP430F149搭载CAN协议控制器MCP2515及收发驱动器PCA82C250实现。验证结果表明,该CAN总线接口通过其SPI接口实现了微处理器MSP430F149的CAN接口扩展,可以满足中心供氧实时监控系统数据传输和控制的需求。