E.coli产Ampli Taq DNA聚合酶的分离纯化

将含有Ｔａｑ ＤＮＡ聚合酶基因的Ｅ．ｃｏｌｉ经发酵,细胞培养液经破壁裂解,粗蛋白抽提Ｓｅｐｈａｅｒｙｌ－ｓ－１００,ＣＭ－Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｃ５０柱层析等纯化步骤,可获得电泳纯的重组Ｔａｑ ＤＮＡ聚合酶,用于科研和检测工作。     

基于ODS构建医院即时联机分析处理系统的研究

面向医院管理者在日常管理全过程中对信息服务的需求,基于HIS数据资源,研究了应用ODS技术进行数据集成整合的技术方法,提出了在医院HIS数据库基础上建立ODS的策略。     

折光法快速判断中药柱层析过程中的始终点及其在树脂精制丹参有效部位中的应用

目的:介绍运用折光原理快速判断中药柱层析过程中始终点的方法及其在大孔树脂精制丹参有效部位的应用。方法:通过丹参提取物经AB-8型大孔吸附树脂精制有效部位,水-30%乙醇-80%乙醇梯度洗脱,间隔取样,在线监测洗脱液折光率并分析变化规律,同时以高效液相色谱法和紫外可见分光光度法分别检测丹酚酸B、丹参萜类成分含量作参比,判断洗脱过程的始点和终点。结果:丹参有效部位精制过程中洗脱的始终点为:水洗终点第4BV(折光率0),即30%乙醇洗脱始点,30%乙醇洗脱终点第8BV(折光率10.5),即80%乙醇洗脱始点,80%乙醇洗脱终点第10.75BV(折光率19.5)。结论:折光法准确可靠,便捷快速,在中药柱层析处理过程有很强的实践意义。     

柱层析结合低温乙醇法制备静注丙种球蛋白

根据目前柱层析血浆蛋白分离工艺(我所1995年获卫生部新药证书及试生产文号),低温乙醇结合法起始原料采用DEAE-Sepharose FF柱的DB1(pH5.2, 0.02mol/L NaAC) 洗脱组分 [1,2] .此组分丙种球蛋白含量为80%～90%,但所含杂蛋白种类及性质与传统低温乙醇法 [3]中组分Ⅱ+Ⅲ沉淀很不相同.     

柱层析吸附法去除人血白蛋白的热原

人血白蛋的热原污染一再困挠着生产厂家[1],热原泛指起临床发热反应的生物活性物质,主要是细菌内毒素,其去除方法较多[2,3],对于蛋白制品的热原,较为成功的方法为吸附法.对于不同来源内毒素,不同吸附方法所能起到的作用亦不相同,笔者采用离子交换吸附凝胶去除人血白蛋白中的内毒素[4,5],报告如下.     

两面针中生物碱的分离

目的：研究两面针的化学成分。方法：采用硅胶柱层析及重结晶的方法分离和纯化化合物，根据理化性质和波谱方法鉴定结构。结果：从两面针的酸水提取氯仿萃取部分分离得到8个化合物，其中7个生物碱，分别为oxyavicine(1)，氧化两面针碱(oxynitidine，2)，二氢白屈菜红碱(dihydrochelerythrine，3)，去-Ⅳ-甲基白屈菜红碱(N-norchelerythrine，4)和茵芋碱(skimmianine，5)，haplopine(6)，liriodenine(7)，1个木脂素L-芝麻素(L-sesamin，8)。结论：化合物1、3和6为首次从该植物中分得。     

银杏酸及银杏酚的提取分离工艺探讨

银杏外种皮含有醇、酚、酸等多种化学物质 ,不但有恶臭味 ,而且对较多人的皮肤会发生强烈的刺激作用 ,引起瘙痒 ,出现皮炎水疱 ,严重者出现痉挛和皮肤灼伤 ,这说明银杏外种皮中含有较多的活性成分[1] 。有研究者曾用银杏外种皮作过杀虫剂及有关农药的研究探讨 [2 ] 。多年来 ,银杏外种皮一直作为废物被丢弃 ,这既浪费了资源又污染了环境 ,为更好地综合开发利用银杏资源 ,我们采用甲醇提取、乙醚萃取法 ,从银杏外种皮中提取出了银杏酸、银杏酚 ,为银杏外种皮的进一步开发利用奠定了基础。1　提取工艺银杏外种皮用 70 %甲醇浸提 ,浓缩液用乙醚…     

桑叶多糖SDS-1和SDT-1的系统分离纯化

对桑叶水提取的粗多糖在离子交换纤维素上的吸附量进行了考察,然后利用离子交换纤维素柱色谱将粗多糖分为4个电荷性质不同的亚组分SD0、SD0.1、SD0.2、SD0.3。通过桑叶粗多糖在离子交换纤维素的吸附解吸行为可知,桑叶多糖主要以酸性多糖的形式存在。其中主要组分SD0.2进一步采用Sephacryl S-200凝胶介质进行纯化,采用苯酚-硫酸法和高效凝胶过滤色谱法同时进行检测,得到均一多糖SDS-1和SDT-1。SDS-1的Mw=8.9×104,Mn=7.5×104,分散度D=1.18;SDT-1的Mw=1.54×104,Mn=1.42×104,D=1.08。     

海洋岩虫抗菌肽筛选及抗癌活性的初步研究

将岩虫匀浆液经反相浓缩、凝胶过滤和亲和柱层析获得活性组分,在体外用MTS／PMS(氮兰四唑盐／吩嗪硫酸甲酯)方法筛选抗菌肽,再分别用MTS／PMS方法和ELISA—AFP(甲胎蛋白)方法检测其对人肝癌细胞株HepG2增殖、AFP分泌及对正常大鼠成骨细胞株MC3T3-E1增殖的影响。结果表明,纯化的岩虫抗菌肽为组成型碱性蛋白(MW8．1kDa,pI8．6),不同浓度抗菌肽对肝癌细胞增殖和AFP的分泌均有抑制作用,抑制作用大小与抗菌肽浓度呈正相关性;对正常成骨细胞未见明显的抑制和杀伤作用。