柱前衍生液相色谱法测定藻酸双酯钠的含量

目的建立测定海洋药物藻酸双酯钠(PSS)含量的柱前衍生化高效液相色谱方法。方法利用0.1mol/L稀硫酸将PSS降解为D-甘露糖醛酸(M)和L-古罗糖醛酸(G),并与1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)进行柱前衍生化反应,采用高效液相色谱法测定PSS降解液中M和G的峰面积,以葡萄糖醛酸(GlcUA)为内标,以PSS对照品绘制标准曲线计算含量。色谱柱:Zorbax KP-C18(150mm×4.6mm,5μm),流动相:磷酸盐缓冲液(0.1mol/L,pH 7.0)/CH3CN(83/17,体积分数);流速:0.8mL/min;柱温30℃,检测器:可变波长检测器(VWD),检测波长:245nm。结果PSS在0.3～15mg/mL浓度范围内与峰面积比值呈良好的线性关系(R2=0.9966);在低、中、高3个浓度的日内精密度平均RSD为0.78%(n=6),日间精密度平均RSD为3.08%(n=5),重复性RSD为3.24%(n=5),24h内稳定性良好,RSD为2.93%,3个浓度平均回收率为115.77%,方法的最低检测限为0.25μg/mL。结论该方法专属性好,灵敏度高,重复性好,适合PSS的质量控制。     

藻酸双酯钠铬配合物的制备及其理化性质的初步研究

目的 制备藻酸双酯钠(PSS)的铬配合物.并研究其溶解性、颜色、分子量等理化性质和光谱表征.方法 将PSS与三价铬离子在不同pH条件下进行络合.制备PSS铬配合物(PSS-Cr),采用正交实验优化制备条件.并采用UV、IR、HPGPC、原子吸收和电导滴定等分析方法 对PSS-Cr的结构和基本理化性质进行初步分析.结果 与结论 制备PSS-Cr的最适条件为:温度为50℃.pH值为7,PSS(以单糖计)与铬的摩尔比为2:1,在此条件下制备的PSS-Cr中的铬含量迭6.69%,重均相对分子质量为12188Da.     

平颏海蛇皮中新型硫酸皮肤素的分离纯化和结构表征

目的 从平颏海蛇皮中提取分离糖胺聚糖(GAGs),并对其结构进行初步表征。方法 对海蛇皮进行脱脂处理后,采用木瓜蛋白酶和胰蛋白酶联合酶解提取粗多糖,采用氯代十六烷基吡啶(CPC)沉淀和Q-Sepharose Fast Flow离子交换树脂对粗多糖进行分离纯化。运用醋酸纤维素薄膜电泳分析其GAGs种类,采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生高效液相色谱(HPLC)法分析其单糖组成,利用硫酸软骨素酶降解结合质谱和强阴离子交换色谱(SAX-HPLC)法分析其2糖组成。结果 获得了2种GAGs纯化组分,并对其中1种含量较高的纯化组分(HSAP-2)进行了初步结构表征。HSAP-2中含有4种2糖,主要为单硫酸化2糖(4S和6S)和少量2硫酸化2糖(46S)、非硫酸化2糖(0S);单糖组成中含有葡萄糖醛酸(GlcA)和乙酰氨基半乳糖(GalNAc);是1种高度杂合的新型硫酸皮肤素(DS)。结论 从平颏海蛇皮中分离纯化获得了1种结构新颖的DS,为平颏海蛇多糖结构与生物活性的深入研究提供了基础。     

海茸多糖的分离纯化与结构表征

目的从海茸(Durvillaea antarctica)中提取分离多糖并对其结构进行表征。方法采用冷水提取,然后用离子交换色谱柱分离纯化得到多糖HRC0和HRC1,用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)测定相对分子质量,用高效液相色谱法(HPLC)测定单糖组成,红外光谱(IR)和核磁共振波谱法(~1H-NMR,~(13)C-NMR)对其化学结构进行表征。结果 HRC0是一种相对分子质量为127.9 kD的线型β-1,3-葡聚糖;HRC1是一种相对分子质量为208.1 kD,且甘露糖醛酸含量高达83%的褐藻胶。结论海茸冷水提取物中主要是β-1,3-葡聚糖和高甘露糖醛酸含量的褐藻胶。     

褐藻酸硫酸酯凝胶剂的质量考察及安全性研究

目的 制备褐藻酸硫酸酯凝胶剂,并对其进行质量考察及安全性评价。方法 以褐藻酸硫酸酯为有效成分制备凝胶剂,从外观、装样量、酸碱度、粘度、有效成分含量及微生物限度方面对凝胶剂质量进行考察,并对其生物安全性进行评价,包括细胞毒性、刺激性及致敏性。结论 制备得到了性状良好、性质稳定的褐藻酸硫酸酯凝胶剂,并且具有较高的生物安全性,为后期褐藻酸硫酸酯药物或医用功能制品的开发奠定了基础。     

注射用灰树花倍他葡聚糖的高效液相色谱指纹图谱研究

目的采用高效液相色谱法建立注射用灰树花倍他葡聚糖的指纹图谱。方法采用Shodex OH pak SB-804HQ色谱柱,以0.2 mol/L磷酸二氢钠溶液为流动相,流速0.5 mL/min,柱温35℃,以示差折光检测器(RID)进行检测,建立反映药材、中间体和注射剂多糖活性成分的指纹图谱(1);采用Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱,以乙腈为流动相A,水(含0.05%磷酸)为流动相B,进行梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温30℃,以二极管阵列检测器(DAD)在波长254 nm处进行检测,建立反映药材其它成分指纹特性的指纹图谱(2)。结果10批灰树花发酵菌丝体药材、中间体和注射剂的相似度均在95%以上,多糖活性成分在药材、中间体和注射剂之间表现出良好的相关性,方法学考察结果也符合要求。结论建立的指纹图谱既体现了多糖活性成分的相关性,又体现了药材其它组分的指纹特征,可用于灰树花药材鉴定和注射剂的质量控制。     

南极海茸多糖果冻的润肠通便功能研究

目的 制备南极海茸多糖果冻,研究其对便秘小鼠的润肠通便作用.方法 以南极海茸多糖为原料,制备1款酸甜可口的果冻.采用1.苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生.高效液相色谱法(HPLC)测定果冻中南极海茸多糖的含量.探索了南极海茸多糖果冻对便秘小鼠润肠通便作用:将昆明小鼠随机分为空白组、模型组、阳性对照组、果冻...     

几种O-羧甲基壳聚糖硫酸酯的制备

以甲壳质为原料制备了O-羧甲基壳聚糖,再经不同的硫酸酯化工艺分别制备了O-羧甲基-N-硫酸酯基壳聚糖（Ⅰ）,O-羧甲基-O-硫酸酯基壳聚糖（Ⅱ）,O-羧甲基-N,O-硫酸酯基壳聚糖(Ⅲ）等3种不同硫酸酯基取代位置的羧甲基壳聚糖衍生物,对各化合物分别采用氧瓶燃烧法测定了硫含量（S%）,采用HPGPC法制定了重均相对分子质量和相对分子质量分布宽度。并对各化合物的红外光谱（IR）和^13C-NMR核磁共振图谱进行了分析。     

古糖酯脂质体的制备及其包封率测定方法的研究

目的 研究古糖酯脂质体的制备方法,并建立其包封率的测定方法.方法 采用反相蒸发法制备古糖酯脂质体,运用正交实验确定最适的制备条件;采用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)测定古糖酯脂质体的包封率.结果 采用反相蒸发法制备古糖酯脂质体的最适条件是:磷脂与胆固醇的摩尔比为4:1,古糖酯药物的加入量为1%,脂水相体积比为3:1,在此条件下制备的脂质体包封率可达39.13%.经负染色法观察古糖酯脂质体的形态为圆形或椭圆形,平均粒径为200 nm.采用HPG-PC法可有效地分离古糖酯脂质体与游离药物,方法测定的线性范围为0.2～10.0 g·L-1,平均回收率为95.12%,RSD为1.83%(n=5).结论 反相蒸发法制备的古糖酯脂质体包封率高,粒径小,形态稳定.HPGPC方法简便、快捷,重现性好,适合于古糖酯脂质体包封率的测定.     

不同标准品对HPGPC法测定多糖相对分子质量的影响

目的；考察不同标准品对高效凝胶渗透色谱法（HPGPC）测定多糖相对分子质量的影响。方法：分别采用葡聚糖和肝素为标准品测定低分子海洋硫酸多糖药物CCS的相对分子质量及其分布。结果；以葡聚糖和肝素为标准品测定的CCS的理构相对分子质量分别为20278和7990，分布宽度分别为1．35和1．44。结论：不同标准品对HPGPC法测定多糖相对分子质量结果影响较大。