什么是减毒活疫苗

目前,我国正在沿着5条技术路线推进疫苗攻关工作,包括:灭活疫苗、基因工程重组亚单位疫苗、腺病毒载体疫苗、减毒流感病毒载体疫苗、核酸疫苗。下面,我们将了解疫苗中很重要的一类一减毒活疫苗。什么是减毒活疫苗?减毒活疫苗是指采用病原微生物的自然弱毒株或经培养传代等方法减毒处理后获得致病力减弱、免疫原性良好的病原微生物减毒株制成的疫苗。     

传染性非典型肺炎(SARS)疫苗研究进展

对付SARS最快、最有效的方法就是研制疫苗[1] 。当前 ,各国科学家在揭示SARS病原体的遗传信息的基础上 ,加速疫苗研制[2 ] 。现将SARS疫苗的相关基础研究、疫苗类型、国际研究概况、国内研究进展、疫苗研究中的风险与问题等综述如下。1　病原学研究1.1　病原的形态和培养　与以往发现的冠状病毒不同 ,利用Vero -E6或Vero(绿猴肾细胞 )细胞很容易对SARS -CoV进行分离培养 ,病毒在 37℃条件下生长良好 ,细胞感染 2 4h即可出现病变 ,可用空斑进行病毒滴定 ,早期分离株的培养滴度一般可达 1×10 6 pfu/ml左右。在人横纹肌肿瘤细胞 (RD…     

融合防龋DNA疫苗pGLUA-P的构建及其细胞表达研究

目的 将变形链球菌（Streptococcus mutans)表面蛋白PAc编码A区和P区（A－P）的序列克隆到真核载体pGLU中，构建出GTF－PAc融合防龋DNA疫苗，并检测其在原核细胞和真核细胞中的表达。方法 将pCIA-P质粒中A－P片段序列与pGLU质粒连接，构建出GTF－PAc融合防龋DNA疫苗pGLUA-P。将pGLUA-P转化大肠杆菌BL21（DE3），以SDS－PAGE电泳鉴定目的蛋白GLUA－P的表达。通过脂质体将pGLUA-P转染大鼠原代肌母细胞，以免疫组织化学检测GLUA－P的表达。结果 GTF－PAc融合防龋DNA疫苗pGLUA-P经酶切分析证实携带GLU和A－P片段。pGLUA-P转化的大肠杆菌BL21（DE3）经IPTG诱导能够表达完整的融合蛋白。pGLUA-P转染的大鼠原代肌母细胞中可检测到融合蛋白的表达。结论 成功地构建了融合防龋DNA疫苗pGLUA-P，所携带的基因序列正确，能够在原核和真核细胞中表达正确的融合蛋白。     

基因重组乳链球菌防龋疫苗口服免疫孕兔的实验研究

作者研究了重组链球菌ＨＬ１０７口服免疫孕兔的效果，使用酶联免疫吸附法测定口服免疫前后血清，唾液和乳汁中抗表面蛋白抗原ＩｇＧ，ＩｇＡ抗体水平，结果表明口服免疫孕兔血清和乳汁中特异性抗表面蛋白抗原的ＩｇＧ水平明显升高，唾液和乳汁中抗表面蛋白抗原ＩｇＧ水平明显升高，提示重组乳链球菌ＨＬ１０７具有变形链球菌表面蛋白抗原的免疫原性，能够激发针对表面蛋白质抗原的系统免疫和局部粘膜的免疫反应。     

壳聚糖-防龋DNA疫苗微粒的制备和体外表达研究

壳聚糖 (chitosan ,CS)是新开发的黏膜载体系统 ,具有良好的生物相容性和体内可降解性 ,并且安全无毒。我们将壳聚糖和防龋DNA疫苗制备成微粒 ,对微粒的大小、形态特征和体外转染进行了研究 ,探讨其作为防龋DNA疫苗黏膜递呈系统的可能。1.材料和方法 :①壳聚糖 DNA微粒的制备 :采用凝聚法制备 ,于恒温 5 5℃磁力搅拌器 (搅拌速度 5 0 0r/min)上将含质粒DNA( 10 0mg/L)、终浓度为 5 0mmol/L的硫酸钠溶液缓慢滴入 ( 1滴 /秒 )到等体积的 0 0 2 %壳聚糖溶液 ( 1%醋酸溶解 ,用NaOH调 pH值为 5 7)中 ,制备完后 ,于室温下静置 2h ,分装…     

骨性二类错患者上、下颌骨矢状结构病因机制分析

目的:研究我国骨性二类错患者的病因机制是以上颌前突为主,还是下颌后缩为主,根据其病因机制找出合理的治疗方法。方法:在头颅定位侧位X线片上,以ANB角大于5°作为判定标准,随机选取56例骨性二类错患者为研究样本,以SNA、SNB为分析指标,分析上、下颌在矢状方向上的突、凹程度代表的结构特征,以分析骨性二类错形成的病因机制。结果:所研究的骨性二类错患者中92.9%的患者不存在上颌前突病因机制,67.9%的患者存在下颌后缩病因机制,而且这种上、下颌骨病因机制方面的差异性是有显著的统计学意义的。结论:我国骨性二类错患者是以下颌后缩为主要机制的,提示要注重对于这种骨性二类错患者的早期下颌前移矫治,而在对于生长发育高峰期已过的患者,要注意使用能代偿这种下颌后缩骨性机制的矫治设计方案。     

携带sbr基因的农杆菌二元载体系统的构建及稳定性分析

利用转基因植物生产防龋疫苗 ,其中一个主要的步骤是如何将目的基因转入植物组织中。对于双子叶植物番茄来说 ,农杆菌为载体的基因转移法是最合适的 ,因此本实验构建含ｓｂｒ基因的农杆菌二元载体系统 ,并分析质粒在农杆菌中的稳定性 ,为下一步植物遗传转化奠定基础。1 .材料和方法 :将质粒ｐＴＰ[1 ]与植物表达载体ｐＲＯＫⅡ分别用ＢａｍＨⅠ、ＫｐｎⅠ消化 ,分离回收所需片段 ,用Ｔ4ＤＮＡ连接酶连接 ,4℃ 2 4ｈ。利用碱裂解法提取质粒并酶切电泳鉴定 ,获得重组植物表达质粒ｐＲＯＰ。用ＣａＣｌ2 法制备感受态的农杆菌ＬＢＡ440 4 ,冻融…     

变形链球菌表面蛋白和葡糖基转移酶基因疫苗防龋动物实验:Keyes龋齿计分研究

目的 :了解变形链球菌基因疫苗 pcDNA3 pac和 pcDNA3 gtfB的免疫防龋效果。 方法 :2 8d龄Wistar大鼠 3 6只 ,随机分为pcDNA3 pac组 (A组 )、pcDNA3 gtfB组 (B组 )、pcDNA3 pac联合 pcDNA3 gtfB组 (C组 )、变形链球菌灭活全菌组 (D组 )、pcDNA3空载体组 (E组 )和PBS液组 (F组 )进行 3次双侧颌下腺腺周注射免疫。建立定菌鼠模型 ,诱龋 3个月 ,根据Keyes经典评分方法从龋损范围及深度进行龋损综合评估和比较。结果 :龋损牙面计分在 pcDNA3与PBS组最高 ,其次为单基因疫苗免疫组 ,联合免疫和灭活全菌细胞最低 (P <0 .0 1或P <0 .0 5 ) ;窝沟龋各级计分 :E级龋在单基因疫苗组 ,联合疫苗组、灭活全菌细胞组无区别 (P >0 .0 5 ) ,而PBS组和 pcDNA3组则较低 (P <0 .0 1) ;Dm级、Ds级则是联合免疫组与灭活全菌细胞组最低 ,单基因疫苗免疫组较高而PBS和 pcDNA3组最高 (P <0 .0 1或P <0 .0 5 ) ;Dx级四个免疫组发生率很低或不发生 ,显著低于PBS组和pcDNA3组 (P <0 .0 1)。结论 :重组质粒pcDNA3 gtfB和pcDNA3 pac具显著有效的免疫防龋作用 ,以联合基因疫苗免疫最好 ,是理想的防龋决策之一。     

牙龈卟啉单胞菌基因疫苗pcDNA3.1(+)/kgpcd免疫原性研究

目的:研究重组质粒pcDNA3. 1( ) /kgpcd免疫原性,并观察目的基因编码的蛋白在小鼠肌肉及颌下腺组织中的原位表达情况。方法:重组质粒pcDNA3. 1 ( ) /kgpcd经肌肉注射和颌下腺区注射免疫BALB/c小鼠,采用间接ELISA方法检测免疫后BALB/c小鼠血清中IgG和唾液中sIgA抗体水平;用免疫组织化学染色观察目的基因编码的蛋白在小鼠组织中的表达。结果:重组质粒经肌肉注射免疫可产生高水平的特异性血清IgG抗体,颌下腺区注射可同时诱导高水平的唾液中sIgA和血清中IgG抗体;骨骼肌、颌下腺导管内、腺泡腔内可见阳性着色。结论:重组质粒pcDNA3. 1( ) /kgpcd经颌下腺注射可同时诱导黏膜免疫和全身免疫应答,可作为有效免疫原,这为免疫牙周炎模型定菌鼠实验提供了依据。