河南省九株狂犬病毒的糖蛋白基因序列分析

目的 了解河南省狂犬病毒与人用、兽用狂犬病疫苗株在糖蛋白基因核苷酸和氨基酸序列水平上的差异,为有效控制狂犬病疫情提供初步的科学依据.方法 以反转录-半套式聚合酶链反应(RT-heminested-PCR)扩增2006年12月分离自河南省信阳市的9株狂犬病毒街毒株,经纯化、克隆、测序后获得9条糖蛋白基因全长序列,采用生物信息学软件构建基因系统发育树,对糖蛋白基因序列和氨基酸序列进行分析.结果 9株狂犬病毒糖蛋白在核苷酸及氨基酸序列水平上彼此的同源性分别为97.6%～98.9%和99.2%～99.8%;9株病毒与CTN疫苗的同源性最高,其核苷酸及氨基酸同源性分别为85.6%～93.0%和91.9%～92.9%;9株病毒与其他疫苗株相比,其核苷酸及氨基酸同源性分别为80.4%～83.3%和87.7%～92.5%;与已知的基因1型狂犬病毒比较,9株病毒糖蛋白氨基酸序列发生了若干位点的氨基酸取代.结论 9株河南省狂犬病毒街毒株均属基因1型,CTN疫苗株可能为目前我国河南省所流行的狂犬病提供较好的保护效果.     

手足口病病原在自来水中的存活能力

目的 了解手足口病病毒在生活用自来水中存活情况.方法 2008年上海市及浙江省手足口病监测病例分离到的手足口病病毒中,选择5株肠道病毒(EV)71型、1株柯萨奇(Cox)病毒,分别混合含氯量1.0 mg/L的自来水;采用Vero细胞培养,细胞病变效应(CPE)观察,每日监测水中病毒存活情况.运用散点图分析水中病毒存活量下降趋势.结果 该6株手足口病病毒在初始含氯量1.0 ppm模拟出厂自来水中可以存活1个月以上,并持续有感染细胞能力,病毒株间活病毒存活能力有差别.结论 EV71型及Cox病毒在水中具有较强存活能力,手足口病流行期间,城市、农村及城乡结合部需要注意手足口病病原经水传播的途径.

Abstract：

Objective To evaluate the survivability of hand foot mouth disease(HFMD)virus,in tap water for daily use.Methods HFMD viruses were isolated from cases of HFMD in Shanghai and Zhejiang from in 2008.Six isolated strains (five subtype of enterovirus 71 and one coxackie virus)were selected in this study.These viruses were mixed with chloride 1.0 mg/L tap-water and then inoculated into Vero cells.The cytopathic effect (CPE)was checked everyday in order to survey the survivability of each virus strain.The decline of virus survivability was analyzed by scatter diagram.Results These six strains of HMFD virus could survive longer than one month in tap water with initial chloride concentration of 1.0 mg/L and still had celluar infectivity.The survivabilities were varied between viruses isolated from different HFMD cases.Conclusions The survivabilities of enterovirus 71 and coxackie virus stains are quite strong in water.Therefore,the transmission route of water-borne pathogens should be monitored in regions using tap water during HFMD epidemic period.     

混合细胞瓶对临床标本中流行性感冒病毒和肠道病毒的分离检测

目的 比较犬肾细胞系(MDCK)、人喉表皮癌细胞(Hep-2)和非洲绿猴肾细胞(Vero)制备的MHV混合细胞与相应单一敏感细胞株对流行性感冒(流感)病毒、肠道病毒的分离结果.方法 流感样患者咽拭子标本接种MHV混合细胞和MDCK细胞,手足口病患儿咽拭子或粪标本接种MHV混合细胞和Vero细胞,观察病毒致细胞病变效应(CPE),采用多重反转录-聚合酶链反应(mRT-PCR)检测甲、乙型流感病毒和肠道病毒.结果 MDCK和Vero细胞的CPE较MHV混合细胞明显.138份流感病毒接种MHV混合细胞,分离出34株流感病毒,分离率为24.6％;MDCK细胞分离出流感病毒39株,分离率为28.3％.MHV混合细胞与MDCK细胞流感病毒分离率比较,差异无统计学意义(x2=1.92,P＞0.05).32株肠道病毒接种MHV混合细胞,分离出肠道病毒9株,分离率为28.1％;Vero细胞分离出12株肠道病毒,分离率为37.5％.MHV混合细胞与Vero细胞肠道病毒分离率比较,差异无统计学意义(x2 =3.00,P＞0.05).结论 MHV混合细胞CPE不如单一细胞易于观察;MHV混合细胞适用于生物性突发公共卫生事件中,可分离培养临床标本中甲型、乙型流感病毒和表现为呼吸道症状的肠道病毒.     

腺病毒3型急性呼吸道感染暴发流行的病原学调查

目的以血清学方法证实2004年江苏省苏北地区中小学生腺病毒3型急性呼吸道感染的暴发流行.方法应用酶联免疫吸附法（ELISA）检测患者急性期IgM抗体、恢复期IgG抗体;应用中和试验方法检测患者急性期、恢复期血清和未患病学生对照血清的中和抗体,并应用SPSS11.0软件对试验数据进行统计分析.结果患者急性期IgM抗体阳性率为3.7%,恢复期IgG抗体阳性率为44.4%,恢复期中和抗体阳性率为59.5%;未患病学生分别为0%、8.3%和33.3%,卡方检验P值分别为0.510、0.018、0.226;9例患者配对双份血清中有6例患者恢复期血清中和抗体保护作用均较急性期血清明显增长;ELISA方法检测IgG与中和试验检测中和抗体的一致率为61.4%,Kappa检验P=0.070.结论血清学方法进一步证实苏北地区急性呼吸道感染暴发流行的病原体为腺病毒3型.     

无锡地区流感病毒病原学监测及H3亚型血凝素基因变异研究

目的 监测无锡地区2005年至2008年季节性流感型与亚型分布并了解2008年部分A/H3N2分离株血凝素(8A)基因变异状况.方法 无锡地区医院门诊流感样患者及集体单位聚集性流感样暴发患者采集鼻咽拭标本,接种MDCK细胞,采用标准抗血清鉴定阳性分离株型与亚型,并对2008年部分H3亚型流感病毒进行HA全基因测序,分析HA基因变异状况.结果 2005年至2008年9月,在无锡地区流感样患者中共分离到435株流感病毒,其中164株为A/H1N1亚型,80株为MH3N2亚型,B型191株.型与亚型有明显季节性分布强弱特征.H3亚型HA序列分析,无锡地区9株分离株与上海地区同期分离株接近,有很多序列相互穿插归属于进化树的同一分支,与WHO 2008-2009年疫苗推荐株相近.结论 近年无锡地区散发和局部暴发流感病毒感染仍主要为A/H1N1、A/H3N2和B型,A/H3N2 HA基因与上海地区同期分离株接近,与WHO 2008-2009年疫苗推荐株相近.     

泡脚水加点盐不易凉

下班回家用热水泡个脚,不但能缓解一天的疲劳,还能有效促进睡眠。如果再给热水加点“料”,效果会更好。泡脚时,不妨在水里撒点盐。加了盐的水能杀菌消毒,防冶脚气,使双脚皮肤变得光滑。     

二氧化氯对流感病毒的灭活作用

流感病毒是引起呼吸道感染的重要病毒,传播范围广,甚至可以造成大流行,而有关消毒剂对流感病毒杀灭作用的研究很少.如果二氧化氯能低浓度快速灭活流感病毒,则其在空气消毒中的应用前景将是十分广阔的.目前限于病毒喷雾和回收的困难,本实验采用试管法,即二氧化氯溶液直接和流感病毒作用后,观察其对病毒血凝素抗原的破坏作用,以及通过二氧化氯作用后的流感病毒经中和剂中和后,接种9～10天龄鸡胚尿囊腔培养,观察二氧化氯对流感病毒的灭活作用,然后测定增殖培养后尿囊液中流感病毒的血凝效价.     

H1N1流感病毒的遗传进化研究

2009年3月底,墨西哥流感样疾病（ILI）病例异常增加,2009年4月17～28日期间,共报道1551例严重肺炎流感疑似病例（其中7例确诊死亡病例）,随后与之毗邻的美国也相继出现类似病例。2009年4月25日,世界卫生组织（WHO）宣布本次疫情为国际关注的突发公共卫生事件（PHEIC）,并于4月30日将流感大流行警戒级别从4级提高到5级,     

微流芯片检测流感病毒多重逆转录聚合酶链反应产物的实验研究

[目的 ]　建立应用微流芯片检测甲 1型、甲 3型、乙型流感病毒多重逆转录聚合酶链反应 (mRT -PCR)产物的方法 ,在mRT -PCR扩增核酸的基础上自动化灵敏的定量检测扩增产物 ,快速检测甲亚型、乙型流感病毒 ,帮助临床快速诊断和鉴别诊断其他呼吸道病毒感染 ,以及明确流感病毒在人群中感染、流行情况。　 [方法 ]　采用经MDCK细胞分离培养的甲 1型、甲 3型、乙型流感病毒毒株病毒液 ,使用 3组特异引物经mRT -PCR扩增核酸 ,扩增产物分别采用毛细管电泳技术经Caliper10 0 0微流芯片分析仪自动化检测和经 2 %琼脂糖凝胶电泳法检测。　[结果 ]　设计三组引物对相应甲 1型、甲 3型、乙型流感病毒靶基因的mRT -PCR扩增产物片段分别为 43 0bp、2 10bp、3 91bp ,本实验mRT -PCR扩增产物经 2 %琼脂糖凝胶电泳 ,与Marker比照 ,DNA条带基本在此位点附近 ;产物采用毛细管电泳法经Caliper10 0 0微流芯片分析仪后 ,分别于 413bp、2 0 3bp、3 79bp处出现陡峭的峰 ,如图所示。　[结论 ]　应用微流芯片采用毛细管电泳法可对流感病毒mRT -PCR产物进行定位及相对定量 ,有助于快速诊断流感病毒感染 ,有助于对流感的监测。