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1.
目的 获取泛素偶联酶家族成员之一的UBE2C/UbcH10的基因,构建具有His标签的原核表达载体,在大肠杆菌中表达UBE2C/UbcH10蛋白.方法 利用RT-PCR的方法 从肝癌细胞HepG2中获得UbcH10的基因,克隆到pMD-19T载体中并测序鉴定,酶切回收后插入原核表达载体pET32a(+)中,构建重组表达载体pET32a-UbcH10,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达.结果 重组表达载体pET32a-UbcH10在大肠杆菌BL21中经IPTG诱导4h获得稳定高效的融合表达.重组蛋白以可溶形式存在,大小在29.0 kD左右.结论 UbcH10重组表达载体的成功构建以及重组蛋白的表达,为进一步其结构和功能的研究奠定了基础,有望揭示该蛋白在癌症发生发展过程中的作用. 相似文献
2.
肺内液主要指由气道黏液和肺泡内表面衬里液所形成的一连续液体薄层,对于维持肺的健康至关重要。介绍肺内液流变学特性在维持气道稳定性、保证肺正常的屏障与清除功能、避免呼吸机相关性肺损伤和新生儿呼吸窘迫综合征表面活性剂替代治疗等方面的临床意义,同时总结Langmuir-Wilhelmy天平法、捕获气泡法、毛细管黏度计和旋转黏度计等液体表面张力和黏度测量的经典方法,以及粒子追踪微流变仪、轴对称液滴边缘形状分析等新技术,比较这些方法的优缺点,为临床研究肺内液流变学特性辅助肺疾病的诊断和治疗提供重要参考。 相似文献
3.
4.
目的:构建pCDNA3.1-MT2A真核表达载体并观察其在293T和SMMC7721细胞株中的定位和表达情况。方法:使用基因合成法合成MT2A基因,在其N端添加Kozak序列及His标签序列,将扩增后的目的基因双酶切连接至pcDNA3.1(+)载体的BamHⅠ和NotⅠ之间。转化DH5α大肠杆菌后,挑取阳性克隆子进行质粒抽提电泳及测序鉴定。将鉴定正确的pCDNA3.1-MT2A质粒采用脂质体法转染293T和SMMC7721细胞株,激光共聚焦显微镜观察其在真核细胞中的表达和定位情况。结果:pCDNA3.1-MT2A重组质粒经酶切电泳及DNA测序证实,目的基因MT2A的序列完全正确,真核表达载体构建成功,激光共聚焦观察发现该重组质粒表达于293T和SMMC7721细胞的胞质中。结论:成功构建pCDNA3.1-MT2A融合基因并进行真核表达,发现MT2A主要定位于293T和SMMC7721细胞的细胞质中。本研究为探讨MT2A在肝癌细胞内的功能奠定了基础。 相似文献
5.
目的 探讨高表达和干扰HSPC238对Hela细胞增殖和侵袭能力的影响.方法 将pcDNA3.1-HSPC238高表达和pLL3.7-HSPC238干扰载体分别瞬时转染Hela细胞,然后采用EdU增殖和Transwell侵袭实验,检测HSPC238对Hela细胞增殖和侵袭能力的影响.结果 与对照组相比,转染了pcDNA3.1-HSPC238质粒的Hela细胞增殖和侵袭能力下降,转染了pLL3.7-HSPC238质粒的Hela细胞增殖和侵袭能力增强,以上结果均有统计学差异(P<0.05).结论 HSPC238高表达时能抑制Hela细胞的增殖和侵袭,干扰HSPC238时促进Hela细胞的增殖和侵袭. 相似文献
6.
系统性轻链(AL)型淀粉样变性是由异常单克隆免疫球蛋白轻链形成淀粉样蛋白,沉积于组织器官,进而造成组织结构损伤、器官功能障碍的系统性疾病[1].从异常单克隆免疫球蛋白轻链的来源看,大部分都是浆细胞所产生,来源于淋巴细胞的仅占2%[2],故针对异常克隆性浆细胞的治疗是AL型淀粉样变性治疗的主要方式之一.目前,自体外周血干... 相似文献
7.
目的 :探讨年轻人急性心肌梗死 (AMI)的发病机制。方法 :以 4 0岁以下男性患者为研究对象 ,分别检测血清性激素水平、血脂谱、T淋巴细胞亚群、丙二醛 (MDA)和超氧化物歧化酶 (SOD)等指标。结果 :①与正常对照组相比 ,年轻人AMI患者的 17β -雌二醇 (17β -E2 )血清水平明显增高 (P <0 .0 5 ) ,而总睾酮 (TT)、游离睾酮 (FT)显著下降及E2 /T比值明显增高 (P <0 .0 1) ;②甘油三脂 (TG)、低密度脂蛋白胆固醇 (LDL -C)较对照组显著增高 (P <0 .0 1) ,而高密度脂蛋白胆固醇 (HDL -C)和总胆固醇 (TC)无明显变化 ;③CD3+ 、CD4 + 、和CD8+ 与对照组相比 ,无显著差异 ;④MDA、SOD与对照组相比均具有显著差异(P <0 .0 1)。结论 :年轻人AMI存在血脂谱异常 ,末发现有免疫功能改变 ,E2 /T比值升高可能是其发病机理之一 ,自由基介导的脂质过氧化参与了年轻人AMI的发生。 相似文献
8.
黄湘华 《肾脏病与透析肾移植杂志》2010,19(3)
成人肾脏再生的机制一直是肾脏病领域研究的热点,人们试图通过阐明肾脏再生的机制,为肾脏病的治疗寻找新的突破口.目前有大量关于肾脏修复的细胞和分子机制的研究,以求证肾脏是否具有通过再生自我修复的能力.主要的研究内容集中在以下几个方面:成年哺乳动物肾脏的终末分化细胞是否具有再生的能力?肾脏是否存在多能前体细胞?肾外来源的细胞是否能迁移至肾脏参与损伤修复?最近有一系列的研究表明鲍曼囊的壁层上皮细胞可能是一组具有再生潜能的肾脏前体细胞,参与足细胞及小管上皮细胞的再生,并在肾小球疾病的发病过程中起作用.这些发现为理解肾脏修复的机制和不同肾小球病变的机制都提供了新的视角.本文将综述关于肾脏再生机制的最新进展,特别是壁层上皮细胞在肾脏再生中的作用. 相似文献
9.
肥厚性心肌病的QT离散度分析谭家余黄湘陈一伟BujaG等[1]发现肥厚型心肌病(HC)患者QT离散度(QTd)明显增大,并与恶性心律失常有密切关系。本文研究QTd与HC的类型、心律失常、心功能损害程度及预后的关系。资料36例HC患者(男29例,女7... 相似文献
10.
万莉莉 《实用中西医结合临床》2014,14(9):85-86
<正>1975年,世界卫生大会WHA28.66决议要求WHO开发政策工具用来帮助成员国制定国家药物政策。同时,也敦促WHO帮助各国实施国家药物政策规划战略,例如,基本药物的遴选和防治必需、质量可靠的药品的适当采购,以及对药物政策规划各要素提供教育和培训。在1986年,WHO国家药物政策专家委员会为成员国制定实践指南,出版了制定国家药物政策的指导原则(《国家药物政策指南》1988年版)。随着一些新问题的提出,修改1988年的指导原 相似文献