丹参酮ⅡA抑制血管外膜肥大细胞活化减轻颈动脉粥样硬化斑块形成

目的 观察丹参酮ⅡA灌胃对高脂饲养Apo E ^-/-小鼠颈动脉粥样硬化斑块形成及血管外膜肥大细胞活化的影响。 方法 采用16只8周龄雄性Apo E ^-/-小鼠和8只相匹配的C57BL/6小鼠,按随机区组设计法分为3组：对照组（C57BL/6小鼠予羧甲基纤维素灌胃）、模型组（Apo E ^-/-小鼠予羧甲基纤维素灌胃）、模型+丹参酮ⅡA组（Apo E ^-/-小鼠予30 mg/kg丹参酮ⅡA灌胃）。各组均给予高脂饲料喂养26周。取材前6周开始灌胃给予丹参酮ⅡA/羧甲基纤维素。取材收集血清及颈动脉组织,ELISA测定血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）水平;取同一侧颈总动脉进行石蜡包埋切片,HE染色评估颈动脉狭窄程度,Movat染色评估斑块进展,甲苯胺蓝染色显示血管外膜肥大细胞浸润情况,免疫组织化学染色检测5-羟色胺（5-HT）、TNF-α、IL-6表达情况;取另一侧颈动脉剥取血管外膜组织后,实时定量PCR检测肥大细胞标志分子Fcer1a表达情况。 结果 高脂喂养26周后,模型组小鼠颈动脉出现严重的动脉粥样硬化斑块,模型+丹参酮ⅡA组动脉粥样硬化斑块形成所导致的颈动脉狭窄百分比低于模型组[（58.48±8.07）%比（80.31±4.08）%, P<0.05]。与模型组比较,模型+丹参酮ⅡA组血清TNF-α[（12.39±1.62）pg/ml比（17.44±1.42）pg/ml]和IL-6[（116.24±12.16）pg/ml比（166.05±19.09）pg/ml]水平较低,血管外膜TNF-α蛋白表达[（20 145±1 556）比（25 288±1 671）]和IL-6[（25 688±1 604）比（35 286±4 198）]较低（ P均<0.05）;模型+丹参酮ⅡA组血管外膜肥大细胞数量、活化百分比、5-HT表达和Fcer1a mRNA水平均较低（ P均<0.05）。 结论 丹参酮ⅡA可减轻高脂饲养Apo E ^-/-小鼠颈动脉粥样硬化斑块的形成。血管外膜肥大细胞数量及活化比例降低,炎症细胞因子释放减少,血管局部炎症反应减轻可能是丹参酮ⅡA抗颈动脉粥样硬化的作用机制之一。     

基于NLRP3/ Caspase-1/ IL-1β通路探讨生慧益智汤改善SAMP8小鼠学习记忆能力的作用机制

目的 观察生慧益智汤对AD模型快速老化小鼠（SAMP8）学习记忆能力的影响,并探讨其作用机制。 方法 将24只SAMP8小鼠按随机数字表法分为模型组、安理申组（1 mg/kg）、生慧益智汤组（15.6 g/kg）,每组8只,8只同龄、同品系的对抗快速老化小鼠（SAMR1）设为对照组,分别给予相应药物或等体积蒸馏水连续灌胃90 d。给药结束后,采用Morris水迷宫检测小鼠学习记忆和空间探索能力,免疫组化染色检测小鼠海马β淀粉样蛋白1-42（Aβ _1-42）表达,ELISA法检测海马IL-1β、IL-6、TNF-α水平,采用实时荧光定量PCR、Western blot法检测海马组织核苷酸结合寡聚化结构域样受体3（NLRP3）、Caspase-1、IL-1β mRNA和蛋白表达。 结果 与模型组比较,生慧益智汤组和安理申组小鼠空间探索能力和记忆能力改善（ P<0.05或 P<0.01）,海马区Aβ _1-42表达减少（ P<0.01）,TNF-α、IL-6、IL-1β水平降低（ P<0.01或 P<0.05）,NLRP3、Caspase-1及IL-1β mRNA及蛋白表达降低（ P<0.01或 P<0.05）。 结论 生慧益智汤可有效改善SAMP8小鼠的学习记忆能力,其机制可能与调控NLRP3/Caspase-1/IL-1β通路抑制炎症小体活化、抑制神经炎症反应有关。     

康复运动通过调节大鼠肺脏NADPH氧化酶延缓慢性阻塞性肺疾病进程的研究

目的：探讨NADPH氧化酶（NADPH oxidase,Nox）分子亚型在康复运动改善慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease,COPD）中的表达及机制。方法：将大鼠随机分为对照组、COPD组、COPD中等强度运动组和COPD较大强度运动组,每组10只。免疫组化检测缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF1α)、NADPH氧化酶分子、炎症因子——肿瘤坏死因子α(factors tumor necrosis factor alpha,TNFα)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)和基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP-9)的表达。结果：与对照组相比,COPD组NADPH氧化酶亚型Nox1、Nox2、Nox5、HIF1α、TNFα、IL-6、MMP-2和MMP-9表达明显增加,中等强度运动可以减少COPD动物模型Nox2、Nox5、MMP-9、HIF1α表达,较大强度运动可以减少Nox1、Nox2、Nox5、TNFα、IL-6、MMP-9、HIF1α表达。结论：康复运动下调肺脏NADPH氧化酶不同亚型分子表达,进而减少下游炎症因子、TNFα、IL-6、MMP-2和MMP-9的表达,康复运动的保护功能可能通过抑制HIF1α的表达而实现。     

前列地尔注射液对β-氨基丙腈诱导的小鼠主动脉夹层的作用及其机制探讨

目的探讨前列地尔注射液对β-氨基丙腈(BAPN)诱导的主动脉夹层的作用及其机制。方法选取3周龄雄性C57BL/6小鼠26只随机分成对照组(普通饮水,n=13)和模型组(1 g·kg-1·d-1 BAPN饮水,n=13),14 d时提取主动脉组织RNA和总蛋白,采用实时定量聚合酶链式反应和蛋白质免疫印迹检测对照组和模型组主动脉炎症相关基因、EP基因mRNA(每组各6只)和前列地尔受体4 (EP4)蛋白(每组各7只)表达。选取3周龄雄性C57BL/6小鼠88只,按随机区组设计法分为3组:对照组(普通饮水+生理盐水80 μg·kg-1·d-1,n=22)、模型组(1 g·kg-1·d-1BAPN饮水+生理盐水80 μg·kg-1·d-1,n=33)和治疗组(1 g·kg-1·d-1 BAPN饮水+80 μg·kg-1·d-1 前列地尔注射液,n=33)。BAPN饮水前1 d开始每日腹腔注射给药,连续给药28 d。记录每组小鼠体重、血压变化及因主动脉夹层破裂死亡情况。28 d时,大体解剖观察主动脉夹层发生情况;取主动脉组织进行固定、包埋和切片,苏木素-伊红和维多利亚蓝-核固红染色观察主动脉的形...     

前列地尔注射液对β-氨基丙腈诱导的小鼠主动脉夹层的作用及其机制探讨

目的 探讨前列地尔注射液对β-氨基丙腈（BAPN）诱导的主动脉夹层的作用及其机制。 方法 选取3周龄雄性C57BL/6小鼠26只随机分成对照组（普通饮水, n=13）和模型组（1 g·kg ^-1·d ^-1 BAPN饮水, n=13）,14 d时提取主动脉组织RNA和总蛋白,采用实时定量聚合酶链式反应和蛋白质免疫印迹检测对照组和模型组主动脉炎症相关基因、EP基因mRNA（每组各6只）和前列地尔受体4 （EP4）蛋白（每组各7只）表达。选取3周龄雄性C57BL/6小鼠88只,按随机区组设计法分为3组：对照组（普通饮水+生理盐水80 μg·kg ^-1·d ^-1, n=22）、模型组（1 g·kg ^-1·d ^-1BAPN饮水+生理盐水80 μg·kg ^-1·d ^-1, n=33）和治疗组（1 g·kg ^-1·d ^-1 BAPN饮水+80 μg·kg ^-1·d ^-1 前列地尔注射液, n=33）。BAPN饮水前1 d开始每日腹腔注射给药,连续给药28 d。记录每组小鼠体重、血压变化及因主动脉夹层破裂死亡情况。28 d时,大体解剖观察主动脉夹层发生情况;取主动脉组织进行固定、包埋和切片,苏木素-伊红和维多利亚蓝-核固红染色观察主动脉的形态结构变化,同时,免疫组化染色观察对照组（6只）和模型组（6只）EP4蛋白的表达分布情况。并对模型组（3只）和治疗组（4只）血浆PGE1进行ELISA检测。选取3周龄雄性C57BL/6小鼠13只,随机分为模型组（1 g·kg ^-1·d ^-1BAPN饮水+生理盐水, n=7）和治疗组（1 g·kg ^-1·d ^-1 BAPN饮水+80 μg·kg ^-1·d ^-1 前列地尔注射液, n=6）,14 d时对主动脉EP4蛋白表达进行定量分析。 结果 模型组小鼠BAPN诱导14 d时主动脉单核细胞趋化因子1 ［（2.74±1.55）比（1.00±0.49）］和基质金属蛋白酶2［（1.38±0.42）比（1.00±0.27）］的mRNA表达及EP4蛋白（1.48±0.51比1.00±0.19）表达高于对照组（ P均<0.05）。免疫组化结果显示EP4可在模型组的内皮细胞、炎症细胞中表达。小鼠主动脉解剖观察可见模型组和治疗组均有明显的夹层,苏木素-伊红和维多利亚蓝-核固红染色显示模型组和治疗组主动脉夹层血管可见弹力板断裂、充满红细胞的假腔形成和炎症细胞浸润。对照组无主动脉夹层和死亡发生,与对照组相比,模型组主动脉夹层发生率（60.6%,20/33）、破裂死亡率（30.3%,10/33）,以及治疗组的主动脉夹层发生率（72.7%,24/33）、死亡率（24.2%,8/33）均明显升高,体重明显降低（ P均<0.05）,但模型组与治疗组间比较差异无统计学意义（ P>0.05）。3组间血压无明显差异（ P>0.05）。相较于模型组,治疗组在给药后血药浓度高［（0.540±0.041）μmol/L比（0.436±0.012）μmol/L, t=4.10, P<0.05］,EP4蛋白表达低［（0.60±0.30）比（1.00±0.20）, P<0.05］。 结论 在BAPN诱导的小鼠主动脉夹层模型中EP4表达增高,但使用前列地尔注射液腹腔给药对该模型中主动脉夹层的破裂无保护作用,其可能原因是前列地尔反馈抑制了EP4的表达。     

丹参酮ⅡA对小鼠主动脉粥样硬化斑块形成的影响及机制研究

目的 观察丹参酮ⅡA对高脂饲养Apo E-/-小鼠主动脉粥样硬化斑块形成的影响及其机制.方法 将36只8周龄雄性Apo E-/-小鼠和C57BL/6小鼠分为3组:对照组(C57BL/6小鼠予羧甲基纤维素钠灌胃)、模型组(Apo E-/-小鼠予羧甲基纤维素钠灌胃)、模型+丹参酮ⅡA组(Apo E-/-小鼠予30 mg/k...     

β-氨基丙腈饮水联合血管紧张素II埋泵建立小鼠主动脉夹层模型

目的 应用β-氨基丙腈（β-aminopropionitrile,BAPN）饮水联合血管紧张素Ⅱ （angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ）皮下埋泵建立小鼠主动脉夹层模型。方法 40只3周龄雄性C57Bl/6J小鼠随机分为两组,均每日给予0.1 g/（kg·bw） BAPN饮水,BAPN饮水后第28天给予皮下埋泵,BAPN饮水+生理盐水埋泵组持续泵入生理盐水,BAPN饮水+Ang Ⅱ埋泵组持续泵入Ang Ⅱ,每分钟1000 ng/（kg·bw）。采用小鼠无创血压测量计尾套法检测小鼠血压和心率。实验中死亡小鼠立即解剖,分离主动脉。埋泵72 h后,未死亡小鼠注射过量戊巴比妥钠处死,留取主动脉。苏木素-伊红染色显微镜下观察主动脉壁假腔形成情况。结果 BAPN饮水+Ang Ⅱ埋泵组小鼠总的夹层发生率为95%,死亡率为24%（夹层动脉瘤破裂死亡）,BAPN饮水+生理盐水埋泵组夹层发生率为5%,死亡率为0;镜下主动脉病理切片显示夹层主动脉有假腔形成。结论 成功建立高主动脉夹层发生率的小鼠模型。