重组人P53融合蛋白抗肝癌细胞的实验研究

研究蛋白传导域(PTD)与人野生型P53(WtP53)融合表达的P53融合蛋白PTD-P53对HepG2的增殖抑制和凋亡的影响.用PTD-P53处理HepG2后,采用MTT法分析处理后细胞的生长增殖情况,流式细胞术(FCM)分析处理后细胞周期变化及脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡情况.PTD-P53对:HepG2的生长有明显抑制作用.细胞周期也出现阻滞现象,细胞凋亡明显增加.PTD-P53有一定的抗肝癌细胞作用.     

中国11市93 720例胎龄24~42周单胎儿出生体重曲线及其地区差异特征

目的研制胎龄24~42周单胎新生儿出生体重曲线，并探讨其地区差异特征。方法在中国11市（海口、广州、深圳、柳州、桂林、泉州、重庆、成都、长沙、宁波、连云港）选择年分娩量7 000例以上的11家妇幼保健院，纳入其2017年1月1日至2020年12月31日分娩的全部活产单胎新生儿进行出生体重曲线研制。结果纳入了11市合计93 720例胎龄24~42周单胎新生儿进行研究。建立了中国11市合计及各市单胎儿出生体重3rd~97th百分位数参考值，并绘制了出生体重百分位曲线图。深圳市和泉州市单胎儿出生体重曲线水平与中国11市合计单胎儿水平基本相同；海口市、广州市、桂林市、柳州市单胎儿出生体重曲线水平略低于中国11市合计单胎儿水平；重庆市、成都市、长沙市单胎儿出生体重曲线水平略高于中国11市合计单胎儿水平；宁波市和连云港市单胎儿出生体重曲线高于中国11市合计单胎儿水平。中国11市合计单胎儿出生体重曲线与中国协作网2011~2014年单胎儿出生体重曲线非常接近。结论制定了中国11市合计及各市单胎新生儿出生体重3rd~97th百分位数参考值，可作为该区域新生儿宫内生长评价的参考标准。部分地区新生儿宫内生长水平与全国水平有差异。     

超早产儿/超低出生体重儿临床结局的性别差异：一项倾向性评分匹配研究

目的通过倾向性评分匹配方法，探讨性别对超早产儿/超低出生体重儿（extremely preterm infant/extremely low birth weight infant，EPI/ELBWI）临床结局的影响。方法回顾性分析2011年1月1日至2020年12月31日住院的731例EPI或ELBWI的临床资料，将731例EPI/ELBWI分成男婴组与女婴组。通过倾向性评分匹配方法1∶1匹配，匹配变量包括：胎龄、出生体重、放弃积极治疗比例、小于胎龄儿比例、使用肺表面活性物质比例、1 min Apgar评分≤3分比例、机械通气比例、机械通气时间、产前使用疗程不足糖皮质激素比例和妊娠期高血压疾病比例，比较两组患儿住院期间主要并发症的发生率和出院存活率。结果匹配前，男婴组新生儿呼吸窘迫综合征、支气管肺发育不良、重度脑室内出血、脑室周围白质软化、坏死性小肠结肠炎、动脉导管未闭的发生率均显著高于女婴组（P<0.05）；匹配后，男婴组仅支气管肺发育不良的发生率显著高于女婴组（P<0.05）。匹配前后，两组患儿的出院存活率差异均无统计学意义（P>0.05）。结论男婴EPI/ELBWI并发支气管肺发育不良的风险高于女婴，但男婴和女婴EPI/ELBWI的转归相似。     

Expression of cyclooxygenase-2 in association with clinicopathological prognostic factors and molecular markers in epithelial ovarian cancer

OBJECTIVES: This study examines whether expression of COX-2 is associated with clinicopathological features and other molecular markers of ovarian cancer. METHODS: Sixty-four paraffin-embedded tissue specimens were obtained from patients with ovarian cancer who received cytoreductive surgery and combination chemotherapy. Tissue specimens were subjected to immunohistochemical analysis using antibodies to COX-2, p53, and VEGF. RESULTS: Increased COX-2 expression significantly correlated with histologic type (mucinous 5.6% vs. non-mucinous 65.2%, P<0.001). COX-2 expression was also significantly associated with stage, tumor grade, residual disease status, and presence of ascites. COX-2 expression correlated positively with expression of p53 (P=0.006) and VEGF (P=0.025). Although survival was lower in patients with high COX-2 expression than in those without high COX-2 expression (P<0.001), only tumor grade and stage were independent prognostic indicators. In patients with non-mucinous cancer, COX-2 expression correlated with stage (P<0.001) and presence of ascites (P=0.033). CONCLUSIONS: Our results suggest that expression of COX-2 in ovarian cancers is specific to histologic type of tumor and is associated with poor clinicopathologic prognostic factors. Expression of COX-2 also correlates well with expression of p53 and VEGF.     

乾坤胶囊治疗肺癌的临床研究

目的:评价乾坤胶囊治疗肺癌的临床疗效并探讨该复方中药制剂抗肺癌的作用机理.方法:对100例经细胞病理学证实的肺癌患者,随机分为乾坤胶囊组(胶囊组)34例,化疗组33例,化疗 胶囊组(综合组)33例.从临床症状、免疫指标、血象、生活状态(Karnofsky评分标准)、体重及p53、PCNA的表达等方面进行了前瞻性对比治疗研究.结果:胶囊组、综合组、化疗组的总有效率分别为94.1%、90.9%、57.5%.经统计分析,胶囊组、综合组与化疗组比较均有显著性差异(P＜0.01及P＜0.05).显示乾坤胶囊对肺癌患者能明显改善症状、增加体重、有效地提高生存质量、显著地提高细胞免疫功能(NK细胞、LAK细胞、IL-2、CD3、CD4、CD4/CD8)、降低p53及PCNA阳性细胞数.结论:乾坤胶囊治疗肺癌疗效确切,无不良反应.其机理是全面提高患者的免疫功能,抑制p53及PCNA的表达.     

腺相关病毒衣壳保守区多价抗原肽的原核表达及多克隆抗体制备

目的原核表达和纯化腺相关病毒（AAV）衣壳保守区抗原肽，制备抗AAV衣壳保守区的兔多克隆抗体。方法设计并合成编码AAV衣壳蛋白保守区的DNA，将序列克隆到载体pET30a，获得质粒pET30a-AAV-CR，原核表达并纯化保守区多价抗原肽，考马斯蓝染色法及Western blot法对AAV保守区多价抗原肽进行鉴定。将日本大耳朵白兔分为实验组与对照组（1只/组），实验组注射AAV保守区蛋白制备多克隆抗体，对照组注射PBS，ELISA检测抗体效价，Western blot及细胞免疫荧光法检测抗体应用效果。结果成功构建了表达AAV衣壳保守区抗原肽的质粒pET30a-AAV-CR，表达纯化得到相对分子质量为17000的蛋白质；纯化后的蛋白可在兔体内诱导产生针对AAV衣壳保守区的抗体，且该抗体能广泛性识别AAV1-AAV10衣壳蛋白序列。结论诱导出AAV衣壳保守区蛋白并成功获得了抗AAV衣壳保守区的多克隆抗体，为后续载体开发以及生物学功能研究奠定了基础。     

灵芪胶囊对H22荷瘤小鼠p53和bcl-2蛋白表达的影响

目的：探讨灵芪胶囊对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用及其抑瘤作用机制。方法：采用体内实验法,于无菌条件下抽取传代7d、生长良好的H22荷瘤小鼠腹水,无菌0．9％氯化钠溶液1：3稀释（约含瘤细胞2×10^6／ml）,按0．2ml／7,接种于消毒后的小鼠右前肢腋部皮下,制成肿瘤模型,灌胃给药灵芪胶囊11d后,称取小鼠体重,脱椎处死小鼠,取脾脏及胸腺称重并计算胸腺指数和脾脏指数。用免疫组化法检测各组凋亡相关基因突变型p53和bcl-2基因的表达。结果：灵芪胶囊在明显抑制肿瘤生长的同时不降低体重,在一定剂量对荷瘤动物的免疫器官指数无明显影响;灵芪胶囊三个剂量组突变型p53基因和bcl-2基N的表达均低于模型组。结论：灵芪胶囊对H22荷瘤小鼠有明显抑瘤作用,其机制可能与抑制突变型p53基N和bcl-2基因表达有关。