人参根及茎叶皂苷对群养及隔离孤独饲育小鼠神经精神药理作用的研究

人参根及茎叶皂苷 ５０～２００ ｍｇ／ｋｇ能使群养小鼠的自发运动量明显增加,８周隔离饲育小鼠比群养小鼠自发运动量明显增加,人参根皂苷能使其剂量依赖性降低,而人参茎叶皂苷影响不明显;对戊巴比妥钠所致睡眠试验中,隔离孤独饲育小鼠比群养小鼠睡眠时间明显缩短（ｔ＝４．３５６,Ｐ＜０．００１）。人参根皂苷 ５０～２００ ｍｇ／ｋｇ使孤独饲育小鼠的睡眠时间随剂量增加而延长,２００ ｍｇ／ｋｇ组与对照组比较,ｔ＝３． ６６５,Ｐ＜０．０１。并能使 ８周隔离饲育的小鼠 ２０ ｍｉｎ内连续攻击时间有意义地下降（ｔ＝４．５４０,Ｐ＝０．００１）,但人参茎叶皂苷效果不明显。证明人参根及茎叶皂苷具有中枢兴奋作用,同时人参根皂苷还具有中枢镇静作用。     

趁鲜与传统切制人参饮片标准汤剂量值传递规律分析

目的 通过对人参趁鲜切制与传统切制饮片标准汤剂的量值传递规律进行分析,为人参趁鲜切制饮片的质量控制及应用开发研究提供参考。方法 经标准工艺分别制备10批具代表性的人参趁鲜与传统切制饮片及其标准汤剂,采用Agilent EC-C₁₈色谱柱（4.6 mm×150 mm,2.7 μm）,以乙腈（A）-0.1%磷酸水溶液（B）为流动相进行梯度洗脱（0~23 min,18%~21% A;23~35 min,21%~28% A;35~80 min,28%~32% A）,检测波长203 nm,建立标准汤剂的指纹图谱,并进行相似度评价、主成分分析（PCA）及偏最小二乘法-判别分析（PLS-DA）,以变量重要性投影（VIP）值>1筛选差异成分,对筛选出的已知差异成分进行定量分析,结合出膏率、转移率等指标,探讨人参趁鲜切制与传统切制饮片标准汤剂的量值传递规律差异。结果 人参趁鲜切制饮片与传统切制饮片标准汤剂指纹图谱相似度均>0.950,分别确定了18个共有峰,指认了其中9个共有峰;PCA及PLS-DA结果表明,2种饮片标准汤剂中指标成分的含量存在一定差异,人参趁鲜切制饮片中人参皂苷Rg₁、Re、Ro含量高于传统切制饮片,而人参皂苷Rb₁、Rc、Rb₂、Rd含量低于传统切制饮片,人参趁鲜切制饮片标准汤剂中人参皂苷Rg₁、Re、Rb₁、Ro含量高于传统切制饮片标准汤剂,而人参皂苷Rc、Rb₂、Rd在2种饮片标准汤剂中的含量相当。人参趁鲜切制饮片标准汤剂中人参皂苷Rg₁、Rb₁、Rc、Rb₂平均转移率均明显高于传统切制饮片标准汤剂（P<0.05）;人参皂苷Re、Rd平均转移率有所升高,但差异无统计学意义;人参皂苷Ro平均转移率差异无统计学意义,趁鲜切制饮片标准汤剂的出膏率明显高于传统切制饮片标准汤剂（P<0.05）。结论 趁鲜切制饮片标准汤剂的出膏率、指标成分含量及转移率均优于传统切制饮片标准汤剂,可为趁鲜切制饮片后续临床应用提供数据支持。     

Ginsenoside Rf relieves mechanical hypersensitivity,depression‐like behavior,and inflammatory reactions in chronic constriction injury rats

The aim of this study was to investigate whether ginsenoside Rf can effectively relieve pain hypersensitivity in a neuropathic pain rat model. Neuropathic pain was induced in rats by chronic constriction injury (CCI) to the right sciatic nerve. Ginsenoside Rf was administered intraperitoneally after CCI surgery. The von Frey filament test and forced swimming test were performed to examine pain hypersensitivity and depression‐like behavior in rats. Western blot was used to measure the levels of inflammatory cytokines in the dorsal root ganglion (DRG) and the spinal cord. Pretreatment of ginsenoside Rf for 7 days did not affect the onset of mechanical allodynia in CCI rats; however, a single dose of ginsenoside Rf 1 day after surgery attenuated established mechanical allodynia in CCI rats. Additionally, chronic treatment of ginsenoside Rf 1 week before and 2 weeks after CCI surgery diminished mechanical allodynia and depression‐like behavior without affecting spontaneous locomotor activity in CCI rats. Furthermore, in CCI rats, chronic ginsenoside Rf treatment partially reversed the upregulation of proinflammatory cytokines in the spinal cord and/or the DRG but elevated IL‐10, an anti‐inflammatory factor, in the DRG. Ginsenoside Rf alleviated neuropathic pain and its associated depression and restored the balance between proinflammatory and anti‐inflammatory cytokines. Our results suggest that ginsenoside Rf may be a potential therapy for nerve injury‐induced neuropathic pain.     

基于药效实验和层次分析法的参芪强心片提取工艺优选

目的优化参芪强心片的提取工艺。方法采用药效实验,以对异丙肾上腺素诱发的大鼠心力衰竭模型心脏病变改善程度为指标,初步筛选制备工艺;采用层次分析法结合单因素实验、正交试验,以固形物质量、人参皂苷Rg1和人参皂苷Re含量,优化乙醇回流提取工艺;以固形物质量和淫羊藿苷含量为指标,优化煎煮提取工艺,并对提取工艺进行验证试验。结果药效实验表明工艺4更优;该工艺的最佳提取条件为红参、黄芪等5味饮片加50%乙醇回流提取3次,第1次加11倍量,第2、3次加10倍量,每次2.5 h;淫羊藿等其余2味饮片煎煮提取3次,第1次加19倍量,第2、3次加16倍量,每次1.5 h。验证试验表明乙醇提取固形物得率平均值为19.78%、人参皂苷Rg1和人参皂苷Re提取率平均值为77.52%;水提取固形物得率平均值为16.58%、淫羊藿苷提取率平均值为90.98%(RSD2.0%,n=3)。结论该提取工艺稳定可行。     

人参皂苷Rg_1对D-半乳糖所致衰老小鼠海马的保护机制

目的探讨人参皂苷Rg_1对D-半乳糖(D-gal)所致衰老小鼠海马的保护机制。方法 6~8周龄雄性C57BL/6J巢蛋白(Nestin)-绿色荧光蛋白(GFP)转基因小鼠随机分为4组,每组10只,分别为对照组、人参皂苷Rg_1对照组、人参皂苷Rg_1治疗组、模型组。衰老模型建立与给药完成后第2天,水迷宫实验检测小鼠空间学习记忆能力;取小鼠海马制备冷冻组织切片,观察海马区神经干细胞Nestin荧光强度;衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色法检测海马细胞衰老;酶标比色法检测海马组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活性、总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)的量;ELISA检测海马组织匀浆中白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的量;蛋白印迹法检测海马组织中p53、p21蛋白表达。结果与模型组比较,人参皂苷Rg_1对照组和人参皂苷Rg_1治疗组小鼠空间学习记忆能力明显增强;海马齿状回(DG区)Nestin荧光强度增高;海马齿状回(CA3区)SA-β-gal染色阳性细胞百分比显著降低;海马组织匀浆中SOD活性与T-AOC显著增加、MDA量下降;IL-1β、IL-6和TNF-α量减少;p53、p21蛋白表达降低。结论人参皂苷Rg_1具有拮抗D-gal所致衰老小鼠海马损伤和延缓海马衰老的作用,其机制可能与抑制氧化应激及下调其下游p53-p21信号通路有关。     

黄芪甲苷对人参皂苷CK肿瘤细胞摄取及抗肿瘤作用的影响

目的考察黄芪甲苷(AS-IV)对人参皂苷CK(GCK)肿瘤细胞摄取和抗肿瘤药效的影响。方法采用人非小细胞肺癌细胞A549作为肿瘤细胞模型,通过MTT法比较两者配伍与单用GCK的细胞毒性;用荧光法和HPLC法考察了AS-IV与配伍GCK后细胞对GCK的摄取率变化,建立裸鼠荷瘤模型考察AS-IV对GCK的体内增效作用。结果配伍AS-IV后,GCK对A549细胞的生长抑制作用增强,肿瘤细胞对GCK的摄取增加,且随着AS-IV比例的升高,效果更加显著。荷瘤小鼠实验表明,AS-IV增加了GCK的体内抗肿瘤作用。结论 AS-IV配伍GCK具有增强GCK抗肿瘤药效的作用。     

三七药性菌质正丁醇部位化学成分研究(Ⅱ)

目的:通过生物转化技术发酵三七获得三七药性菌质,对正丁醇部位化学成分进行研究。方法:采用系统溶剂萃取、D101大孔吸附树脂、硅胶柱色谱、开放式ODS柱色谱、半制备液相色谱等方法进行分离纯化,结合化合物理化性质和波谱数据鉴定其化合物结构。结果:从三七药性菌质正丁醇部位分离得到6个化合物,分别为24(R)-假人参皂苷RT5(1),人参皂苷SG1(2),人参皂苷Rh12(3),人参皂苷Rb1(4),vina-ginsenoside R8(5),vina-ginsenoside R9(6)。结论:化合物1,2,5,6为首次从三七植物中分离得到,所有化合物均为首次从三七药性菌质中分离得到。     

HPLC同时测定人参药性菌质中8种皂苷含量

目的:建立一种可以同时测定人参药性菌质中8种人参皂苷(人参皂苷Rg1,人参皂苷Re,人参皂苷Rf,人参皂苷Rh1,人参皂苷Rb1,人参皂苷Ro,人参皂苷Rb2,人参皂苷Rd)含量的HPLC方法。方法:采用高效液相法,Inertsil ODS-SP色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.4%磷酸水梯度洗脱,流速1 m L·min-1,检测波长203 nm,柱温30℃,测定人参药性菌质8种皂苷的含量。结果:8种单体皂苷在100 min内可良好分离,线性关系良好(R20.999 7),平均加样回收率分别为100.15%,101.54%,101.87%,100.88%,102.10%,102.84%,101.38%,101.23%,RSD分别为1.6%,2.3%,1.9%,2.1%,1.5%,0.8%,2.7%,1.6%。结论:该研究提供了一种能方便、简单、准确、重复性好的HPLC分析人参药性菌质中8种人参皂苷含量的方法,可为人参药性菌质成分转化研究的质量标准制定提供科学依据。     

人参皂苷Rd镇痛作用与中枢PKCγ相关机制研究

目的:研究人参皂苷Rd(gi nsenosi de Rd,GRd)的镇痛作用及对小鼠中枢蛋白激酶γ(pr ot ei n ki nase Cγ,PKCγ)表达的影响。方法:采用扭体和福尔马林舔足法观察GRd的镇痛作用,侧脑室注射Ca Cl2和维拉帕米(Ver apami l,Ver)后,通过扭体法分析GRd的镇痛作用及其与Ca2+的关系;免疫组织化学方法检测GRd对小鼠脊髓背角、大脑皮层和丘脑PKCγ免疫阳性细胞表达的影响。结果:GRd对冰醋酸所致的扭体及福尔马林所致的舔足反应均有抑制作用(P0.05);给予Ca Cl2和Ver后,GRd的镇痛作用被Ca Cl2拮抗,被Ver加强(P0.01);GRd可明显减少小鼠脊髓背角、大脑皮层和丘脑PKCγ免疫阳性细胞(P0.01)。结论:GRd的镇痛作用涉及外周和中枢,Ca2+与PKCγ参与了GRd的镇痛作用。     

高效液相色谱法用于西洋参与白参的分析和鉴别

采用高效液相色谱法测定了１０个不同地区栽培的西洋参与白参中人参皂苷 Ｒｂ１的含量,并利用相对保留时间和相对含量对两者进行定性鉴别