含碘中药对甲亢大鼠细胞凋亡基因bcl-2及bax表达的影响

目的:观察不同浓度含碘中药对甲亢大鼠模型甲状腺组织bcl-2、baxmRNA表达的影响.方法:制作大鼠甲状腺机能亢进模型,灌服不同浓度含碘中药复方及其他对照药物进行治疗,然后RT-PCR法检测各组大鼠甲状腺组织bcl-2、bax mRNA水平.结果:含碘较低的中药复方较之含碘高的中药复方在增加bcl-2mRNA表达及减少bax mRNA表达上具有显著性的差异.结论:小剂量含碘中药复方对实验性甲亢大鼠甲状腺细胞具有保护作用.     

鲜壁虎冻干粉诱导C6胶质瘤细胞凋亡的血清药理学研究

目的探讨鲜壁虎冻干粉对C6胶质瘤细胞凋亡的影响。方法将30只小鼠随机分为3组,分别给予顺铂腹腔注射,口服鲜壁虎冻干粉及口服等量蒸馏水。20天后,取小鼠血清体外处理C6胶质瘤细胞。通过形态学分析、流式细胞仪及TUNEL法,观察细胞凋亡情况;S—P免疫组化法检测细胞凋亡相关基因bcl-2、bax的表达水平。结果形态学变化、流式细胞仪分析和TUNEL法结果均证实含鲜壁虎血清在体外可诱导C6胶质瘤细胞凋亡;鲜壁虎组与空白对照组比较,细胞内的bcl-2基因表达无明显变化,bax基因表达升高。结论含鲜壁虎血清能够诱导细胞凋亡,其机制可能与上调bax基因有关。     

中药何首乌饮对大鼠卵巢颗粒细胞凋亡相关蛋白bcl-2,bax表达的影响

目的通过测定不同剂量的中药何首乌饮含药血清作用后的大鼠卵巢颗粒细胞的凋亡相关基因bcl-2、bax的蛋白表达及caspase-3活性,探讨何首乌饮对卵巢自身功能的影响。方法制备排卵前卵巢模型,收集颗粒细胞分别与雌性SD幼鼠空白血清及含不同剂量何首乌饮的药物血清在体外共同培养,Western blotting检测GC内凋亡相关基因bcl-2、bax的蛋白表达情况;分光光度法检测颗粒细胞内caspase-3活性。结果何首乌饮含药血清可上调颗粒细胞bcl-2蛋白表达,下调bax蛋白表达,中、高剂量组何首乌饮含药血清与对照组比较,可明显上调bcl-2蛋白表达(P均<0.01),中、高剂量组何首乌饮含药血清与对照组比较,明显下调bax蛋白表达(P均<0.01)。何首乌饮含药血清可下调颗粒细胞caspase-3活性,中、高剂量何首乌饮含药血清组与对照组比较有显著性差异(P均<0.01)。结论何首乌饮增加GC内凋亡抑制蛋白bcl-2表达及减少凋亡促进蛋白bax表达的作用,可能是其抑制GC凋亡,防止卵泡闭锁的作用途径之一;同时何首乌饮可能是在凋亡的较早阶段,通过阻断caspase-3的级联裂解即可开始起效,而发挥凋亡抑制作用。     

益气活血法对多发脑梗死性痴呆模型大鼠脑神经细胞凋亡调控基因的影响

目的观察益气活血法对多发脑梗死性痴呆模型大鼠脑神经细胞凋亡调控基因的影响。方法采用颈内动脉注射血栓的方法,复制多发脑梗死性痴呆大鼠模型,观察益气复智颗粒24.84、12.4、6.21g/kg灌胃对实验动物脑组织bax和bcl-2基因蛋白表达及bax/bcl-2的影响。结果益气复智颗粒能抑制脑缺血后脑组织中bax基因蛋白的过度表达,并明显降低bax/bcl-2的比值。结论益气活血法及益气复智颗粒具有较好的调控脑缺血后基因蛋白表达的能力,可能是其抑制脑神经元凋亡的主要机理之一。     

Low concentration of formononetin stimulates the proliferation of nasopharyngeal carcinoma cell line CNE2 by upregulating bcl-2 and p-ERK1/2 expression

Context Formononetin is a typical phytoestrogen, which is a bioactive component found in red clover plants. Previous studies have shown that formononetin inhibits the proliferation of several types of cancer cells, including prostate cancer and osteosarcoma. However, how formononetin affects the proliferation of CNE2 is not clear.

Objective The objective of this study is to investigate the effects of formononetin on nasopharyngeal carcinoma cells in vitro, along with the underlying mechanism.

Materials and methods CNE2 cells were incubated with various concentrations of formononetin (0, 0.1, 0.2, 0.3 and 1?μM) for 48?h. Cell proliferation was measured by [3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)]-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay, while the rate of apoptosis was measured by flow cytometry. Bcl-2 and bax mRNA expression levels were determined by real time polymerase chain reaction (RT-PCR), while p-ERK1/2 and bcl-2 protein expression levels were quantified by Western blotting.

Results Formononetin promoted the proliferation of CNE2 cells at low concentrations (0, 0.05, 0.1, 0.2, 0.5, 1, 2 and 5?μM), OD values increased from 0.27?±?0.01 to 0.30?±?0.01, 0.30?±?0.01,0.36?±?0.01, 0.35?±?0.01, 0.34?±?0.01, 0.34?±?0.01 and 0.32?±?0.01, respectively. The percentage of late apoptosis declined from 6.77%?±?0.73% (0?μM group) to 6.2%?±?0.4% (0.1?μM group), 3.83%?±?0.71% (0.3?μM group) and 5.1%?±?0.52% (1M group). The mRNA levels of bax and bcl-2 were down- and upregulated, respectively, by formononetin. Bcl-2 and p-ERK1/2 protein levels were also upregulated.

Conclusions Formononetin stimulates CNE2 cell proliferation and has an inhibitory effect on CNE2 cells apoptosis, which is mediated by the activation of the ERK1/2 signaling pathways.     

补阳还五汤联合依达拉奉对脑缺血再灌注后神经细胞凋亡及Bcl-2和Bax表达的影响

目的 研究补阳还五汤联合依达拉奉对小鼠脑缺血再灌注损伤后神经细胞凋亡及凋亡相关蛋白表达的影响。方法 60 只小鼠随机分假手术组（sham）,模型组（I/R）,补阳还五汤组（BYHWD）,依达拉奉组（ED）,补阳还五汤+依达拉奉组（BYHWD+ED）,每组再分2个亚组：1 d组和7 d 组。采用改良线栓法制作小鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,分别给药。TUNEL法观察神经细胞凋亡率;进一步Western bolt检测大脑皮质缺血区bcl-2 和 bax的蛋白的定量表达。结果 补阳还五汤+依达拉奉组较其他组能更明显地降低神经细胞凋亡指数(P<0.01),且较其他组可更明显地升高凋亡相关蛋白bcl-2的表达和下调bax的表达 (P<0．05)。结论 补阳还五汤与依达拉奉联用能降低脑缺血再灌注损伤后小鼠脑组织细胞中促凋亡蛋白bax的表达,增加具有神经元保护作用的抑凋亡蛋白bcl-2的表达,从而抑制神经细胞凋亡,加速神经功能的恢复,协同发挥脑保护作用。     

HIF-1α反义寡核苷酸对肝癌细胞增殖凋亡的影响及机制

目的：本研究通过应用 HIF-1α反义寡核苷酸（antisense oligodeoxynucleotide,ASODN）处理 SMMC-7721肝癌细胞,观察其对 SMMC-7721肝癌细胞增殖的作用和对细胞周期及凋亡率的影响及其机制。方法肝癌细胞系SMMC-7721分对照组和试验组。对照组细胞常规培养,试验组细胞施加 HIF-1α的 ASODN 干预,设浓度梯度和时间梯度。检测不同药物浓度、不同时间对 SMMC-7721细胞的增殖的作用及对细胞周期和凋亡率的影响。对 bcl-2、bax、surviving mRNA 表达产物相对定量,并对 SMMC-7721细胞胞浆 bcl-2、bax、survivin 蛋白进行相对定量分析。结果与对照组相比,各处理组 OD 值均有显著下降,细胞数量降低,且各实验组相比呈明显的时间-剂量依赖效应,差异有统计学意义（ P <0.05）。不同浓度 HIF-1α的 ASODN 处理细胞后,均可使各处理组 G0/ G1期细胞增多,S 期细胞减少,且呈时间-剂量依赖效应,差异有统计学意义（ P <0.05）。不同浓度 HIF-1α的 ASODN 处理细胞不同时间后,与对照组相比,各实验组 bcl-2 mRNA 和 survivin mRNA 表达均有显著下降,差异有统计学意义（ P <0.05）。而 bax 的 mRNA无明显变化趋势（ P >0.05）。不同浓度 HIF-1α的 ASODN 处理细胞不同时间后,与对照组相比,各实验组 bcl-2和survivin 的蛋白表达显著下降,bax 的蛋白表达显著增加,差异有统计学意义（ P <0.05）。结论 HIF-1α的 ASODN可以将 SMMC-7721肝癌细胞株阻滞于 G0/ G1期,影响细胞周期进程,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。HIF-1α促进增殖抑制凋亡的可能机制是上调肝癌细胞 Survivin 和 bcl-2的表达,下调 bax 的表达。针对 HIF-1α抑制剂的应用为肝癌的治疗提供了新思路。     

清金得生片对人肺腺癌细胞端粒酶及凋亡相关基因蛋白表达的影响

目的探讨清金得生片抑制肺癌细胞生长的相关分子机制。方法采用免疫组织化学染色(SABC)方法检测清金得生片含药血清处理后人肺腺癌细胞株端粒酶活性和凋亡相关基因bcl-2、bax的表达水平。结果清金得生片含药血清作用72h,人肺腺癌细胞端粒酶活性明显抑制,同时可下调bcl-2蛋白阳性细胞染色率、上调bax蛋白阳性细胞染色率。结论清金得生片通过抑制人肺腺癌细胞端粒酶活性,调节bcl-2和bax蛋白的表达,发挥抗肿瘤作用。     

Oridonin induces apoptosis of HeLa cells via altering expression of Bcl-2 ／ Bax and activating caspase-3 ／ ICAD pathway

INTRODUCTIONHerbal medicine, Donglingcao (rabdosiarubescens), has been traditionally used in China for thetreatment of various diseases such as leukemia.Oridonin (Fig 1) is a diterpenoid compound isolated fromRabdosia rubescens (hemsl). It has various pharmaco-logical and physiological effects such as anti-inflammation, anti-bacteria, anti-tumor[1-3] and has beenused for the treatment of human cancers, especiallyFig 1. Chemical structure of oridonin.esophageal carcinoma[4]. This comp…     

尖吻蝮蛇毒抑瘤组分I对人肺癌 A549细胞增殖抑制作用

目的：研究尖吻蝮蛇毒抑瘤组分I（ AAVC-I） 对人肺癌A549细胞增殖抑制及凋亡的作用。方法： 采用MTT法检测不同浓度的AAVC-I对A549细胞的24 h 与48 h 抑制率;应用HE染色、Hoechst33258荧光染色,从形态学观察细胞凋亡;采用免疫组化的方法,检测bax蛋白表达的变化。结果： MTT显示,AAVC-I能抑制A549细胞增殖,呈时间和剂量依赖性;AAVC-I处理24 h 后,镜下可见细胞核固缩,核深染及凋亡小体;免疫组化显示,随药物浓度增加,平均光密度值呈递增趋势,表明bax蛋白表达相应上调。结论：尖吻蝮蛇毒抑瘤组分I对人肺癌A549细胞具有抑制作用,并诱导其凋亡,可能与bax表达上调有关。