Anti-inflammatory activity of arctigenin from Forsythiae Fructus

Oleaceae Forsythiae Fructus has been used for anti-inflammatory, diuretics, antidote, and antibacterials in traditional herbal medicine. Our previous screening of medicinal plants showed that methanol (MeOH) extract of Forsythiae Fructus had significant anti-inflammatory activity, but the active ingredients remain unclear. For isolation of active ingredient of MeOH extract of Forsythiae Fructus, it was partitioned with n-hexane and ethylacetate (EtOAc), and arctigenin was isolated from EtOAc fraction by column chromatography with anti-inflammatory activity-guided separation. Its activity was evaluated in the animal models of inflammation including myeloperoxidase (MPO) and eosinophil peroxidase (EPO) activities in the edematous tissues homogenate, and silica-induced reactive oxygen species (ROS) production in the RAW 264.7 cell line. It was shown that arctigenin (100 mg/kg) had significantly decreased not only carrageenan-induced paw edema 3 and 4h after injection of carrageenan, arachidonic acid (AA)-induced ear edema at a painting dose of 0.1-1.0mg/ear, and acetic acid-induced writhing response and acetic acid-induced capillary permeability accentuation at an oral dose of 25-100, and 100 mg/kg, respectively, but also MPO and EPO activities at a painting dose of 0.1-1.0mg/ear in the AA-induced edematous tissues homogenate as indicators of neutrophils and eosinophils recruitment into the inflamed tissue. Further, arctigenin (0.1-10 microM) also significantly inhibited the intracellular ROS production by silica. These results indicate that arctigenin is a bioactive agent of Forsythiae Fructus having significant anti-inflammatory action by inhibition of the exudation, and leukocytes recruitment into the inflamed tissues. The pharmacologic mechanism of action of arctigenin may be due to the inhibition of release/production of inflammatory mediators such as AA metabolites and free radicals.     

牛蒡子苷元的制备工艺研究

目的通过对牛蒡子Arctii Fructus中提取分离牛蒡子苷元产业化过程中的技术难点进行攻关研究,为牛蒡子苷元的产业化提供一种切实可行的制备工艺,以促进牛蒡子苷元的产业化发展。方法采用酸解醇提法得到干膏,用醋酸乙酯提取,分得粗品,对粗品进行乙醇结晶,得高质量分数牛蒡子苷元。结果经简单提取分离可得到质量分数75.0%的牛蒡子苷元粗品,再经乙醇结晶,即可得到质量分数99.0%的牛蒡子苷元成品。结论本研究得到一种适合牛蒡子苷元工业化生产的制备工艺。     

代表性木脂素类化合物的结构修饰研究概况

木脂素是由2分子及以上苯丙素衍生物聚合而成的一类天然化合物,多存在于植物的木质部和树脂中,具有抗肿瘤、抗人类免疫缺陷病毒(HIV)、降血糖、抗氧化、保护心血管和肝脏等广泛的生物活性。但该类化合物溶解度差,导致其临床应用受限,因此,研究者多采用化学方法对其结构进行改造与修饰。对近年来几种代表性木脂素类成分牛蒡苷元、鬼臼毒素、五味子木脂素、厚朴酚、和厚朴酚等的化学结构修饰及衍生物的药理活性研究进行综述,以期为木脂素类化合物的深入研究和开发利用提供依据。     

星点设计-效应面法优化牛蒡子中牛蒡子苷和牛蒡子苷元提取工艺

目的：优化牛蒡子中双指标成分最佳提取工艺。方法：采用星点设计-效应面法,在3个主要因素作用下,以牛蒡子苷及牛蒡子苷元提取率为评估指标,经过多元线性回归和二项式拟合,利用岭嵴分析法优化牛蒡子苷及其苷元提取工艺。结果：确定牛蒡子苷及牛蒡子苷元最佳提取工艺为：70%乙醇,24倍量,超声提取15 min。结论：上述工艺能够大量提取牛蒡子苷及牛蒡子苷元,为制备牛蒡子苷及其苷元提供试验依据,也为充分开发利用牛蒡资源提供参考。     

中药牛蒡子主要活性成分微生物转化研究进展

牛蒡子为菊科草本植物牛蒡的干燥成熟果实,具有抗炎、抗病毒、抗糖尿病等多种药理功能。目前已知,牛蒡苷和牛蒡苷元是中药牛蒡子的主要活性成分,摄入体内的牛蒡苷或牛蒡苷元可进一步被肠道菌群转化为去甲基牛蒡苷元、肠二醇、肠内酯等多种代谢产物。现有研究表明,牛蒡苷或牛蒡苷元的微生物转化产物具有比牛蒡苷元更高、更广的生物学活性。综述不同产地牛蒡子主要活性成分含量、药代动力学及肠道菌群代谢差异,旨在为牛蒡子主要活性成分微生物转化产物的研究与开发提供参考。     

热流变特性对牛蒡苷元固体分散体制备工艺的作用

目的 考察制剂处方的热流变特性与热熔挤出(hot melt extrusion,HME)固体分散体工艺的相关性。方法 以牛蒡苷元为模型药,考察载体辅料、药辅混合物在一定的应力应变作用下黏弹性随温度的变化,及在一定的温度下,剪切频率扫描下的处方热流变特性。以体外溶出率为考察指标,辅以扫描电镜及X射线衍射法,考察HME的处方参数和工艺参数,评价热流变特性参数对HME工艺的指导作用。结果 制剂处方在高于热流变玻璃化转变温度(thermo-rheological glass transition temperature,Tgrheo)20 ℃(Tgrheo+20 ℃),复数黏度均<10⁴Pa·s,说明在该温度时物料可以顺利挤出。以体外溶出率为考察指标,扫描电镜和X射线衍射法对固体分散体进行物相鉴别,优化得到牛蒡苷元HME最优的处方和工艺：聚合物HPMCAS-MG为载体,药辅比为1∶6,螺杆设计为0对或1对捏合块,挤出温度为155 ℃,螺杆转速30~70 r·min^-1。该条件下获得的固体分散体,在pH 6.8的缓冲液中牛蒡苷元表观溶解度提高了近13倍,在60 min内溶出度可达到90%左右,且3 h内溶出稳定,未发生重结晶。结论 HME制剂处方的Tgrheo温度对HME具有重要的参考价值,Tgrheo+20 ℃是HME物料适宜的操作温度,本实验考察的所有处方均符合该规律,这一规律对提高HME的制剂处方优化研究效率具有重要意义。     

牛蒡子苷元基于机械敏感离子通道对软骨细胞转录因子和胶原蛋白表达的影响

目的:基于机械敏感离子通道探讨牛蒡子苷元(ARG)对软骨细胞SRY相关高迁移率族盒蛋白转录因子9(SOX9)、Runt相关转录因子2(RUNX2)和胶原蛋白表达的影响。方法:分离并培养原代小鼠软骨细胞。将细胞分为空白组(常规培养基)、ARG组(10μmol/L)、瞬时受体电位香草素亚家族4(TRPV4)抑制剂组(GSK2193874,10 nmol/L)、ARG+抑制剂组(10μmol/L ARG+10 nmol/L GSK2193874)和TRPV4激动剂组(GSK1016790A,10 nmol/L),各组给予相应干预。细胞培养24 h后,免疫荧光染色检测Ⅱ型胶原蛋白(ColⅡ)表达,PCR检测Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)和ColⅡ的mRNA表达水平,Western blot检测转录因子SOX9、RUNX2及ColⅠ、ColⅡ的蛋白表达水平。结果:①免疫荧光染色观察显示,与空白组相比,ARG组、抑制剂组和ARG+抑制剂组ColⅡ蛋白表达更显著,而激动剂组较弱。与ARG组或抑制剂组相比,ARG+抑制剂组ColⅡ蛋白表达更显著。②与空白组相比,ARG组、抑制剂组和ARG+抑制剂组ColⅡmRNA表达量显著增高(P0.05,P0.01),ColⅠmRNA表达量明显降低(P0.01),而激动剂组ColⅡmRNA表达量显著降低(P0.01)。与ARG组相比,抑制剂组和ARG+抑制剂组细胞的ColⅡ和ColⅠ的mRNA表达量均显著增高(P0.05,P0.01),而激动剂组ColⅠmRNA表达量增高(P0.01),ColⅡmRNA表达量降低(P0.01)。与抑制剂组相比,ARG+抑制剂组ColⅡ和ColⅠ的mRNA表达量均显著增高(P0.05)。③与空白组相比,ARG组ColⅡ蛋白表达量显著上调(P0.01),ColⅠ、SOX9和RUNX2蛋白表达量降低(P0.05,P0.01);抑制剂组ColⅡ蛋白表达量亦明显增多(P0.01),ColⅠ和RUNX2蛋白表达量明显降低(P0.01);ARG+抑制剂组细胞的ColⅡ蛋白表达量显著升高(P0.01),SOX9蛋白表达量显著降低(P0.05),ColⅠ和RUNX2蛋白表达无明显变化(P0.05);激动剂组ColⅡ和SOX9蛋白表达量明显降低(P0.01),RUNX2蛋白表达量明显增高(P0.01),ColⅠ蛋白表达量无明显变化(P0.05)。④与ARG组相比,抑制剂组ColⅡ和ColⅠ蛋白表达量均显著增高(P0.05,P0.01);ARG+抑制剂组细胞的ColⅡ、ColⅠ和RUNX2蛋白表达量均明显增高(P0.01);激动剂组ColⅡ蛋白表达量降低(P0.01),ColⅠ和RUNX2蛋白表达量升高(P0.01)。与抑制剂组相比,ARG+抑制剂组细胞的ColⅡ、ColⅠ和RUNX2蛋白表达量均显著增多(P0.05),SOX9蛋白表达量明显降低(P0.05)。结论:ARG可上调软骨细胞ColⅡ表达,抑制ColⅠ表达,调节转录因子SOX9和RUNX2,促进软骨细胞分化成熟。其作用与TRPV4抑制剂相似,两者合用对ColⅡ的调控作用更显著。     

牛蒡苷元曼尼希反应产物的合成

目的：合成牛蒡苷元曼尼希反应产物4-（3＂,4＂-二甲氧苄基）-3-（4＇-羟基-3＇-甲氧基-5＇-（哌啶-1-基甲基）苯甲基）二氢呋喃-2（3H）-酮。方法：本实验采用曼尼希的方法对牛蒡苷元酚羟基邻位进行结构修饰,牛蒡苷元与哌啶溶液反应合成曼尼希反应产物。结论：通过对合成工艺条件进行较为详细的考察,确定最佳工艺条件。     

牛蒡苷元氨解衍生物的合成

目的:合成牛蒡苷元的氨解衍生物N-苯甲基-2-(4’-羟基-3’-甲氧基苯甲基)-3-(3’’,4’’-二甲氧基苯甲基)丁酰胺。方法:本实验采用氨解的方法对牛蒡苷元的内酯环进行结构修饰,牛蒡苷元和苄胺溶液反应合成氨解衍生物。结论:通过对合成工艺条件进行较为详细的考察,确定最佳工艺条件。