小干扰RNA沉默 HIF-1α对缺氧状态下脉络膜黑色素瘤细胞中MMP-2 表达的影响

目的：以小干扰RNA沉默人眼脉络膜黑色素瘤细胞中的低氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)基因,在缺氧状态下观察其对人眼脉络膜黑色素瘤(human uveal melanoma cell,OCM-1)细胞中基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)基因表达的影响。

方法：将脉络膜黑色素瘤细胞分为正常组与缺氧组,其中将缺氧组再分成单纯缺氧组、干扰组、脂质体对照组、阳性对照组和阴性对照组; 对正常组细胞用含有浓度为10%的胎牛血清和1%的双抗(青-链霉素混合液)的DMEM高糖培养基进行培养。在缺氧组人眼OCM-1细胞的培养瓶中加入100μmol/L CoCl₂以构建肿瘤细胞内部的缺氧微环境。干扰组转染HIF-1α siRNA,阴性对照组转染无义siRNA,阳性对照组转染β-actin siRNA,脂质体对照组转染空脂质体。RT-PCR检测细胞中HIF-1α和MMP-2 mRNA的表达,行Western-blot检测HIF-1α和MMP-2蛋白的表达。

结果：与正常组相比,单纯缺氧组HIF-1α蛋白的表达增高(P<0.05),而其mRNA表达量无明显变化(P>0.05); MMP-2 mRNA及蛋白的表达升高(P<0.05)。缺氧培养的各组之间相比,阳性对照组β-actin mRNA表达下降(P<0.05),证实转染成功; 干扰组HIF-1αmRNA和MMP-2 mRNA和蛋白表达均下降(P<0.05),阴性对照组、脂质体对照组各检测因素均无明显差别(P>0.05)。

结论：缺氧条件下可以提高人眼脉络膜黑色素瘤细胞中HIF-1α蛋白的表达,而且HIF-1α蛋白的表达水平可以影响MMP-2的转录与翻译,从而可能进一步影响人眼脉络膜瘤细胞的外周浸润和远处转移能力。     

POP患者子宫骶韧带组织中胶原纤维、弹力纤维形态学变化及HOXA11、ER-α和ER-β的表达及其意义

目的:探讨子宫骶韧带局部组织中同源盒基因A11(HOXA11)、雌激素受体α(ER-α)、雌激素受体β(ER-β)的表达及胶原纤维、弹力纤维形态的改变与盆腔器官脱垂(POP)发生的关系。方法:采用免疫组织化学PV法检测24例(POP及非POP各12例,分别为研究组和对照组)子宫骶韧带组织中HOXA11、ER-α、ER-β的表达,应用间苯二酚品红法和丽春红酸性品红法分别对弹性纤维和胶原纤维进行染色。结果:①HE染色显示研究组子宫骶韧带组织有胞浆水肿、空泡变性及淀粉样变等不同程度的变性。②与对照组相比,研究组胶原纤维染色较浅,弹力纤维弯曲度和密度减低,纤维碎裂、崩解或聚集成团块状,排列相对不规则。③研究组HOXA11、ER-α和ER-β表达均减弱,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:POP患者子宫骶韧带组织发生变性,其弹力纤维的形态遭到破坏,胶原纤维的含量减少。HOXA11、ER-α和ER-β在POP患者子宫骶韧带组织中的表达均降低,提示均参与POP的发生。     

雌激素受体亚型在子宫内膜增生中的表达

目的探讨雌激素受体(ER)亚型α和βmRNA及蛋白的异常表达在子宫内膜增生的发生发展中的作用。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白一过氧化酶连接法(SP法)，检测18例正常子宫内膜组织、47例子宫内膜增生组织中ERα和ERβmRNA及蛋白的表达。结果①正常子宫内膜组ERβmRNA的平均表达水平低于子宫内膜增生组(P＜O．01)；②ERαmRNA和蛋白在不典型增生组织中的表达低于单纯型和复合型增生组织(P＜O．05)，ERβmRNA和蛋白在这三种类型的子宫内膜增生组织间没有差异。结论ERβmRNA的异常表达在子宫内膜增生发病中起重要作用，ERαmRNA和蛋白表达的下降与子宫内膜不典型增生的发生有关。     

Astrocytes in the damaged brain: Molecular and cellular insights into their reactive response and healing potential

Long considered merely a trophic and mechanical support to neurons, astrocytes have progressively taken the center stage as their ability to react to acute and chronic neurodegenerative situations became increasingly clear. Reactive astrogliosis starts when trigger molecules produced at the injury site drive astrocytes to leave their quiescent state and become activated. Distinctive morphological and biochemical features characterize this process (cell hypertrophy, upregulation of intermediate filaments, and increased cell proliferation). Moreover, reactive astrocytes migrate towards the injured area to constitute the glial scar, and release factors mediating the tissue inflammatory response and remodeling after lesion. A novel view of astrogliosis derives from the finding that subsets of reactive astrocytes can recapitulate stem cell/progenitor features after damage, fostering the concept of astroglia as a promising target for reparative therapies. But which biochemical/signaling pathways modulate astrogliosis with respect to both the time after injury and the type of damage? Are reactive astrocytes overall beneficial or detrimental for neuroprotection and tissue regeneration? This debate has been animating this research field for several years now, and an integrated view on the results obtained and the possible future perspectives is needed. With this Commentary article we have attempted to answer the above-mentioned questions by reviewing the current knowledge on the molecular mechanisms controlling and sustaining the reaction of astroglia to injury and its stem cell-like properties. Moreover, the cellular/molecular mechanisms supporting the detrimental or beneficial features of astrogliosis have been scrutinized to gain insights on possible pharmacological approaches to enhance astrocyte neuroprotective activities.     

子宫内膜异位症患者子宫内膜HIF-1α、CD34、CD54的表达及相互关系

目的观察缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、CD34、CD54与子宫内膜异位症(EMS)发生的关系,以期探讨EMS的发病机制。方法选取26例EMS手术患者,所有病例均经腹腔镜或开腹手术确诊,经病理证实为腹膜型EMS 8例,卵巢子宫内膜异位囊肿9例,子宫腺肌症9例,同期选取子宫肌瘤手术患者6例为对照组,应用免疫组织化学法(SP)测定2组子宫内膜组织中HIF-1α、CD34、CD54的表达。结果 HIF-1α、CD34、CD54在腹膜型EMS组、卵巢子宫内膜异位囊肿组、子宫腺肌症组的表达均高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。HIF-1α与CD34、CD54的表达呈正相关。结论 HIF-1α可能在EMS异位病灶形成中起重要作用,推测内异症的发生与局部病灶缺氧有关。且HIF-1α与CD34的表达呈正相关,提示HIF-1α可以促进内异症组织血管生成;HIF-1α与CD54的表达呈正相关,推测HIF-1α可加强异位内膜细胞的黏附作用,从而有利于形成异位灶。     

缺氧对食管癌细胞缺氧诱导因子-1α及己糖激酶表达的影响

目的探讨不同缺氧程度对食管癌细胞株TE1中缺氧诱导因子-1α（Hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α）及糖酵解关键酶表达的影响。方法 TE1细胞分别在正常氧分压和缺氧条件下培养,缺氧时间设定为6、12、24及48h,使用Western blot方法检测缺氧培养不同时间后细胞中HIF-1α及糖酵解关键酶己糖激酶II（Hexokinase-II,HK-II）的蛋白水平表达变化。结果常氧及缺氧条件下TE1细胞中HIF-1α及HK-II均有表达,缺氧后表达均较常氧培养时明显增强,且随缺氧时间不同而呈先增多后减少的动态变化。结论低氧能够增加食管癌细胞中HIF-1α及HK-II表达而促进糖酵解进程,联合抑制HIF-1α和糖酵解酶可能成为治疗食管癌的潜在的靶点。     

干扰素联合苦参素抗乙型肝炎病毒疗效观察

目的:探讨干扰素联合苦参素治疗慢性乙型肝炎的抗病毒效果。方法:98例慢性乙肝患者,随机分为治疗组51例,对照组47例。治疗组采用α干扰素5MU/d,肌注,连用15d后改tiw,疗程6个月。同时加用苦参素注射液-600mg/d,3个月后改口服苦参素胶囊,200mg,tid,疗程共6个月。对照组单用干扰素,剂量疗程相同。疗程结束时,观察两组患者乙肝病毒标志和HBV载量。结果:干扰素联合苦参素治疗组和对照组HBeAg阴转率分别为54.9%(28/51)与34.0%(16/47),P<0.05;HBsAg阴转率分别为9.8%(5/51)与6.4%(3/47),P>0.05;HBV-DNA阴转率分别为58.8%(30/51)与40.4%(19/47),P>0.05。结论:干扰素联合苦参素具有较好的抑制病毒复制功效并可减轻药物副反应故可作为慢,,性乙肝治疗方案的参考。     

口服不同剂量甲磺酸酚妥拉明分散片后健康男性自愿者的耐受性和安全性研究

目的　为了解口服甲磺酸酚妥拉明的人体耐受性以及可能发生的不良反应 ,本研究对 2 2名健康成年中国男性自愿者进行了随机、开放的临床试验。方法　自愿者共分 4组 ,分别按递增剂量口服 2 0、4 0、6 0、80mg单剂量 ,其中 6 0mg组为多剂量 ,每天 1次 ,连续口服 7d。结果　该药物的主要不良反应为鼻塞 (72 7% )、心悸(45 4 % )、面色潮红 (13 6 % )及头晕 (4 5 % )等 ,但程度均较轻 ,持续时间大多为 4 0min～ 2 5h之间。此外 ,在给药后 3h内 ,部分自愿者出现心率轻度加快、血压轻度改变、包括收缩压和舒张压的轻度减低 ,均以最大剂量 80mg组为明显 ,血生化、血尿常规各指标变化均在正常范围内。结论　在本试验剂量范围内的 2 2名男性健康自愿者口服甲磺酸酚妥拉明分散片是安全的 ,其对受试者所产生的副作用比较轻微 ,可以耐受     

谷芽不同炮制品中α-淀粉酶激活剂的含量比较

目的 建立谷芽α-淀粉酶激活剂(硝酸根离子和氯离子)的含量测定方法,并比较其不同炮制品中的含量.方法 采用紫外分光光度法测定硝酸根,硝酸根在紫外光谱区有强烈的吸收,其吸光度与硝酸根的浓度成正比,可在210 nm波长处测定其吸光度.采用滴定法,用硝酸银标准溶液滴定氯离子,测定氯离子浓度.结果 硝酸根质量浓度在0.1～5.0μg/mL范围内与吸光度线性关系良好(r=0.999 1),生谷芽、炒谷芽、焦谷芽中硝酸根离子含量分别为0.32％,0.15％,0.25％,氯离子的含量分别为0.016 9％,0.013 5％,0.008 0％.结论 谷芽经过加热炒制后,其α-淀粉酶激活剂含量均有所下降.     

131I治疗后Graves眼病血清TNF-α、sTNFRⅡ和sICAM-1的相关性研究

目的探讨G raves病眼病(GO)伴有甲状腺功能亢进症(甲亢)患者经131I治疗后,血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ(sTNFRⅡ)和可溶性细胞间粘附分子-1(sICAM-1)的相关性。方法 131I治疗6～12个月间,根据"NOSPECS眼部病变分级"分为无GO组14例、轻度GO组35例和中度GO组35例,按"CAS评分"分为GO静止组32例和GO活动组38例。设对照组29例。采用ELISA方法检测各组患者血清sI-CAM-1、TNF-α和sTNFRⅡ水平。结果 GO活动组血清sICAM-1(1211.9±258.6ng/m l)水平高于对照组(697.8±291.0 ng/m l)、无GO组和GO静止组(797.6±250.0 ng/m l、807.9±330.2ng/m l,P<0.01),GO静止组和GO活动组血清TNF-α(378.1±167.9ng/L、391.6±150.7ng/L)水平均高于无GO组和对照组(P<0.01);无GO组、GO静止组和GO活动组血清sTNFRⅡ(730.0±173.3ng/L、1055.1±422.9 ng/L、960.0±435.4 ng/L)水平均高于对照组(P<0.01)。轻度GO组、中度GO组血清sICAM-1(1032.4±232.3 ng/m l、407.0±158.1 ng/L)和TNF-α(1021.9±448.9 ng/m l、375.2±157.8 ng/L)水平均高于无GO组和对照组(P<0.05);而无GO组、轻度GO组和中度GO组血清sTNFRⅡ(730.0±173.3 ng/m l、1154.4±422.9 ng/L、922.1±440.6 ng/L)水平均高于对照组(P<0.05)。全部患者血清sICAM-1分别与TNF-α、sTNFRⅡ呈正相关,(r=0.377,P=0.001,r=0.434,P=0.001),TNF-α和sTNFRⅡ之间呈正相关(r=0.476,P<0.001)。结论 GO患者131I治疗的早期,通过血清sICAM-1、TNF-α和sTNFRⅡ的表达对活动性突眼、眼眶内免疫炎性反应,纤维组织变化和甲亢缓解进行综合评价,并可结合CAS评分了解GO患者预后、甲状腺及眼眶的免疫学及细胞凋亡的状态,指导有针对性治疗。