附子与山茱萸配伍对慢性心力衰竭大鼠的影响

目的探讨附子与山茱萸配伍对慢性心力衰竭大鼠增效减毒作用。方法 ip盐酸阿霉素构建大鼠慢性心力衰竭模型,分别给予附子提取物、山茱萸提取物和附子-山茱萸提取物3周后,检测动物血清脑钠素(BNP)含量,心肌细胞Ca2+-ATP酶和Na~+,K~+-ATP酶活性,镜下观察左心室组织病理学形态变化。结果造模3周后,模型组大鼠普遍出现腹水、消瘦、稀便、弓背等症状体征;左心室射血分数(EF)和左心室短轴缩短率(FS)明显下降;血清BNP水平显著升高;左心室组织出现心肌纤维断裂及心肌细胞变性、坏死等病理改变。连续ig给予附子-山茱萸提取物3周后,大鼠症状及体征明显改善,血清BNP水平下降,心肌细胞Na~+,K~+-ATP酶活性升高,左心室组织病理学形态有明显改善。附子提取物和山茱萸提取物分别连续给药3周,上述指标未见明显改善。结论附子与山茱萸配伍可能通过提高心肌细胞Na~+,K~+-ATP酶活性,改善慢性心力衰竭的心肌能量代谢障碍,提高心力衰竭的心肌活性,起到增效减毒作用。     

Codelivery of Adriamycin and P-gp Inhibitor Quercetin Using PEGylated Liposomes to Overcome Cancer Drug Resistance

Transmembrane protein P-gp's overexpression at the drug-resistant cell membrane is the most important characteristic of multidrug resistance (MDR). Quercetin (QUE) can effectively suppress the function of P-gp to reverse MDR. This study uses QUE as the P-gp inhibitor andfilm-ultrasound technique with ammonium sulfate transmembrane gradient method to prepare long-circulating liposomes simultaneously encapsulating QUE and Adriamycin (doxorubicin) (AMD/DOX). The optimal conditions for the preparation of AMD_QUE_long-circulating liposomes (SLs) are as follows: hydrogenated soybean phospholipids (HSPC):cholesterol:DSPE-PEG 2000 = 73.07:24.36:2.57 mol/mol, QUE:HSPC = 1:20 mol/mol, AMD:HSPC = 1:7.9 w/w (NH₄₎₂SO₄ 0.15 mol/L, drug loaded (AMD) at 55°C for 25 min). The average encapsulation efficiency of AMD and QUE was 97.49% and 95.50%, respectively. The average particle size is 85 nm (n = 3), and the average zeta potential is ?14.9 mV. First, the pharmacokinetic study proved that codelivery liposomes enveloping QUE and AMD (AMD_QUE_SL) can obviously increase the blood concentration of AMD (C_max: 140.50 ± 32.37 μg/mL) and extend the half-life period of AMD in plasma (t_1/2:14.02 ± 1.54 h). Second, AMD_QUE_SL can obviously enhance the cell toxicity to AMD-resistant cell strains (HL-6/ADR and MCF-7/ADR), and the reverse effects on the resistance of HL-6/ADR and MCF-7/ADR is increased to 4.81-fold and 3.21-fold, respectively. Third, according to the in vivo pharmacodynamic study, the relative tumor volume and relative tumor growth of the AMD_QUE_SL group were the lowest. The inhibition rate of tumor growth of this group was the highest. It can be concluded that AMD_QUE_SL can effectively reverse MDR, lower cardiac toxicity of AMD in clinical treatment, and improve the clinical treatment effect of AMD.     

大鼠眶下孔注射高渗盐水阿霉素后三叉神经节的病理变化

目的：本实验旨在研究大鼠眶下孔注射高渗盐水阿霉素后,三叉神经功能和三叉神经节细胞病理形态的变化。方法：48只SD大鼠,随机分为A、B两组,每组24只,每组又分四个时间点：1周组,2周组,1月组,3月组取材,每时间点6只大鼠。将A、B组分别给予10%NaCl和1%阿霉素的混合溶液10μl眶下孔注射,生理盐水10μl眶下孔注射（B组）每组给药后于1周、2周、1月及3月时测试各组剩余大鼠的触须垫感觉功能,后处死取三叉神经节标本,制作H E染色切片,分别观察神经节细胞的形态学变化,用等距随机抽样法记录节细胞总数及异常节细胞率。结果：各组动物感觉功能测试,A、B组同时间点有统计学差异（P〈0.01）,眶下孔内神经周围注射高渗盐水阿霉素溶液后A 1-A 4组节细胞总数呈递减趋势（同组各时间点分别比较,P〈0.01）,显著低于B组同时间点（P〈0.01）,而与B组各时间点相比,无统计学差异（P〉0.05）;异常节细胞率A 1-A 4组呈递增趋势（A组各时间点相比（P〈0.01）,显著高于B组同时间点（P〈0.01）。结论：大鼠眶下孔内神经周围注射高渗盐水阿霉素后,阿霉素可在高渗盐水的作用下被神经纤维大量吸收并进一步逆行运输到三叉神经节,随着时间的延续引起三叉神经节细胞的渐进性退变。     

p63不同异构体表达模式对细胞周期特异性毒物诱导的肝癌细胞生长的影响

目的研究肝癌细胞中p63不同异构体表达模式对该细胞阿霉素敏感性的影响。方法用0（溶剂对照）、0.08、0.16、0.32、0.64和1.28μmol/L阿霉素处理对数生长期的p53基因缺失Hep3B细胞,采用MTT比色法检测Hep3B细胞的存活率变化,采用流式细胞术分析Hep3B细胞凋亡率变化,通过彗星实验评价Hep3B细胞DNA损伤水平,采用Western blott方法检测Hep3B细胞中TAp63、DNp63和Cytochrome c的蛋白水平。结果阿霉素处理后的Hep3B细胞存活率依次为89%、71%、54%、38%和22%;凋亡率依次为16%、28%、42%、56%和78%;Hep3B细胞DNA损伤程度依次为2.9、5.1、7.2、9.4和12.1;上调了TAp63和Cytochrome c蛋白表达水平,而DNp63蛋白表达水平则无显著变化,使得TAp63/DNp63比值随之显著升高。结论 TAp63/DNp63比值的增加可显著提高Hep3B细胞对于化疗药物阿霉素的敏感性,p63异构体的不同表达模式将有可能作为肝癌基因治疗的新靶点。     

Synthesis and biological properties of antitumor-active conjugates of ADR with dextran

Three kinds of polymeric adriamycin (ADR) conjugates of dextran were synthesized, namely a dextran–Gly-Leu-Gly-ADR (DGLGA) conjugate with a lysosomally degradable tripeptide spacer group, a dextran–Gly-Leu-Gly-ADR-galactosamine (DGLGA-Ga) conjugate with a targeting moiety of galactosamine on DGLGA, and a dextran–C₆H₁₀-ADR (DC₆A) conjugate with a hexamethylen spacer group. The content of the ADR moiety in the polymeric-drug conjugate was about 3 mol%. Enzyme hydrolysis of DGLGA and DC₆A was carried out by incubation with papain. The total amount of ADR released after 48 h was 43 mol% for DGLGA and less than 1 mol% for DC₆A. In an in vitro cytotoxicity experiment, the DGLGA-Ga conjugate has higher cytotoxic efficacy than the other conjugates for incubation with Hep-3B cells and consequently, the capability of targeting hepatoma cells of the galactosamine residue was determined. In contrast, for the incubation with SiHa cells of these conjugates, there was no significant cytotoxicity effect. The in vivo cytotoxic efficacy of each conjugate (20 mg ADR equiv./kg) against CT-26 mice colon cells implanted subcutaneously in Balb-C mice was studied. The DGLGA conjugate generated the best therapeutic effect with the presence of long-term survival (LTS) at day 50 (2/6).     

聚维酮联合阿霉素体外抑制膀胱癌细胞T24生长并预防膀胱癌患者术后复发

目的探讨聚维酮(PVP)联合阿霉素(ADM)对人膀胱癌细胞株T24的作用及预防膀胱癌术后复发的疗效。方法MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞仪检测细胞周期和黏附作用。对231例浅表膀胱癌患者术后膀胱灌注PVP ADM(实验组)或生理盐水 ADM(对照组),观察预防复发效果。结果2·5%PVP作用24h和72h细胞生长抑制率为15·11%和49·57%;7·5%浓度时,抑制率升为35·42%和79·66%。单用0·25mg/LADM作用48h抑制率为39·05%;合用2·5%和7·5%PVP抑制率升为68·51%和88·39%。5%PVP能使T24细胞的G0/G1期比率下降和G2/M期比率上升。PVP能提高抗鼠IgG1对T24细胞的黏附作用。194例患者获随访,实验组复发率明显降低,复发时间明显延长(均P<0·01)。结论PVP通过阻滞细胞周期G2/M期和增强黏附作用来抑制T24细胞生长,与ADM联合具有协同作用。PVP联合ADM膀胱灌注预防浅表膀胱癌术后复发疗效确切,副作用少。     

苯那普利和缬沙坦联合应用对大鼠阿霉素肾病的影响

目的:探讨苯那普利和缬沙坦对大鼠阿霉素肾病的干预作用。方法:实验Wistar大鼠实行右肾切除手术,以阿霉素尾静脉注射造模,分别用苯那普利、缬沙坦及两者联合灌胃。用药后2～8周检测血、尿标本;透射电镜下观察肾形态学变化;用TUNEL法检测肾组织细胞凋亡。结果:与肾病组相比,3个干预组中的肌酐、尿素氮、尿蛋白、血压均降低,且差异显著;电镜下肾小球超微结构改善;凋亡细胞减少,差异显著。联合应用组与单用组差异显著。结论:苯那普利、缬沙坦及两者联合应用均可延缓阿霉素肾病肾小球硬化的进展,其机制可能与减少细胞的凋亡及肾超微结构的改善有关,两药联合应用效果更显著。     

新藤黄酸对人乳腺癌耐药细胞体外作用的研究

目的 观察新藤黄酸（gambogenic acid,GNA）对人乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADR的作用.方法 采用MTT法观察GNA、阿霉素（adriamycin,ADR）及两者联用对MCF-7/ADR细胞增殖的抑制作用,采用流式细胞仪观察MCF-7/ADR细胞内ADR浓度.结果 GNA能剂量依赖地抑制MCF-7/ADR细胞的生长,作用48 h时,GNA对MCF-7/ADR细胞的IC50为12.88 μmol/L;4 μmol/L GNA可增加MCF-7/ADR细胞对ADR的敏感性,使ADR对MCF-7/ADR细胞的IC50由80.22 μmol/L降至12.54 μmol/L;GNA显著增强MCF-7/ADR细胞内ADR的积累,呈剂量依赖关系.结论 低剂量GNA能显著增加MCF-7/ADR细胞对ADR的敏感性.     

半乳糖白蛋白磁性阿霉素纳米粒的制备及性质评价

目的 制备具有半乳糖基和稳定磁性的半乳糖白蛋白磁性阿霉素纳米粒,并对半乳糖白蛋白磁性纳米粒的糖化比率、磁性及药物含量进行检测.方法 将乳糖和白蛋白用还原胺法合成半乳糖基人血白蛋白(galactosylated human serum albumin,Gal-HAS);采用滴定水解法制备直径在70mm左右Fe3O4磁性纳米粒.再将半乳糖白蛋白、Fe3O4磁性纳米粒及纯盐酸阿霉素按一定的比率混合,通过在精制棉子油中超声乳化、加热固化变性、乙醚洗涤等工艺制备出半乳糖白蛋白磁性阿霉素纳米粒;用苯酚-硫酸比色法测定半乳糖白蛋白的糖化比率;用乙醇提取法提取半乳糖白蛋白磁性阿霉素纳米粒中的阿霉素,并用液相色谱仪测定其含量.将纳米粒溶于生理盐水中,并在光学显微镜下观察在磁场的作用下,半乳糖基磁性纳米粒的运动情况,用激光粒度分析仪、原子力显微镜和透射电子显微镜观察纳米粒粒径的大小和内部结构.结果 半乳糖白蛋白磁性阿霉素纳米粒的糖化比率为32;Fe3O4纳米粒径在(70±30)nm左右,粒径均匀;阿霉素的含量为58.45μg/g,阿霉素的包含率为97.53%;半乳糖白蛋白磁性阿霉素纳米粒溶液在光学显微镜下观察,在磁场的作用下,纳米粒迅速向磁铁的方向移动并发生聚集,当磁铁与纳米粒的距离加大时,纳米粒运动速度减慢,并沿磁力线的方向成串珠状聚集.透射电子显微镜下观察Fe3O4颗粒均匀分布在半乳糖白蛋白磁性阿霉素纳米粒中.结论 半乳糖白蛋白磁性阿霉素纳米粒具有较高糖化比率、稳定的磁性、靶向性强、药物包含率高以及释药速率可控制等特点,为靶向药物治疗,提供了可靠的载药工具.     

3-溴丙酮酸联合阿霉素对乳腺癌细胞增殖及凋亡的影响

目的:研究3-溴丙酮酸(3-BRPA)联合阿霉素(ADM)对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖及凋亡的影响。方法:采用3-BRPA 80、160、320mol/L作用于MDA-MB-231乳腺癌细胞18 h后,测定其对细胞内ATP的影响;分别用3-BRPA 10、20、40、80、160mol/L和ADM 0.75、1.5、3、6、12mol/L,以及3-BRPA 80mol/L与ADM 0.75、1.5、3、6、12mol/L合用作用于MDA-MB-231乳腺癌细胞24、48和72 h后,MTT法检测乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖情况;3-BRPA 80mol/L组、ADM0.75mol/L组以及3-BRPA 80mol/L与ADM 0.75mol/L合用组作用于乳腺癌细胞MDA-Mb-231 24 h后,利用碘化丙啶染色,流式细胞仪检测其诱导乳腺癌细胞凋亡的影响;采用3-BRPA 16mol/L、ADM 0.2mol/L以及3-BRPA 16mol/L与ADM0.2mol/L合用作用于乳腺癌细胞MDA-MB-231,5 d后观察对集落克隆形成的影响。结果:3-BRPA对乳腺癌细胞MDA-MB-231 ATP的生成有抑制作用;3-BRPA联合ADM后可明显增强ADM的细胞毒性作用;3-BRPA 80mol/L与ADM 0.75mol/L合用组诱导乳腺癌细胞MDA-MB-231 24 h凋亡率为39.6%,均显著高于对照组、3-BRPA单用组和ADM单用组(P0.01);3-BRPA增强ADM对乳腺癌细胞MDA-MB-231集落克隆形成的抑制作用。结论:3-BRPA可以增强ADM对乳腺癌细胞MDAMB-231增殖的抑制作用以及增强ADM诱导乳腺癌细胞凋亡的作用。