普伐他汀促进对慢性脑缺血β淀粉样蛋白的清除

目的观察降血脂药普伐他汀对慢性脑缺血大鼠的β淀粉样蛋白(Aβ)水平的影响。方法39只雄性SD大鼠分为正常饮食组(6只),高脂饮食组随机分为空白对照组(7只)、普伐他汀服用组(7只)、单纯脑缺血组(9只)及普伐他汀加脑缺血组(10只),采用结扎双侧颈总动脉建立CVI模型,于术后1个月行为学试验后,测血脂及Aβ水平。取脑组织,行病理学分析及ELISA检测Aβ水平。结果未治疗组(空白对照、单纯脑缺血组)血脂水平升高,但无显著差异(p>0.05),治疗组为正常水平。与正常饮食组相比,其余各组均无明显运动功能障碍,第4周平台定位时间、搜索策略无显著性差异(p>0.05)。脑病理学呈慢性缺血性改变结构欠清晰,神经元固缩或均匀着色,但明显的细胞坏死改变较少见;白质疏松明显。ELISA显示单纯缺血组Aβ较对照组明显升高,而治疗组Aβ下降至略高于对照组水平。结论普伐他汀能够降低脑内Aβ水平,这种降脂外的调节Aβ代谢作用提示血脂代谢异常参与了AD发病。     

TGFBR3错义突变与先天性心脏病遗传关联性研究

目的 在先天性心脏病(CHD)人群中检测TGFBR3基因编码区的疾病特异性错义突变,并研究突变的生物学功能。方法 ①研究对象为中国山东地区的汉族人群。病例组为2008年8月至2011年1月连续就诊的404例散发CHD患儿;对照组为同时期收集的排除CHD以及有心脏病家族史的213例体检健康儿童。②提取样本外周血基因组DNA,进行TGFBR3基因外显子靶向测序。测序获得的病例组特异的单核苷酸变异(SNV)与数据库dbSNP(version137)和千人基因组比对,筛选出疾病特异性稀有或新发突变,行Sanger测序验证。③构建野生型和突变型TGFBR3表达载体,在HEK293T细胞中表达后用免疫印迹检测外源TGFBR3蛋白水平,并用荧光素酶报告基因检测突变对TGF-β信号通路的影响。结果 分别于3个CHD患儿中筛选得到3个CHD特异性的TGFBR3新发/稀有杂合突变,其中TGFBR3^K685R为新发现的突变;TGFBR3^A791V和TGFBR3^A804S为稀有突变,并被SIFT和PolyPhen-2软件预测为有害突变。3个被突变的氨基酸都位于TGFBR3蛋白的高度保守区。功能分析实验显示,TGFBR3^K685R和TGFBR3^A804S突变导致TGFBR3蛋白表达水平显著降低,而且3个突变均导致TGFBR3蛋白对参与心脏发育重要信号通路TGF-β信号通路的抑制作用显著降低。结论 突变TGFBR3^K685R、TGFBR3^A791V和TGFBR3^A804S可能通过降低TGFBR3对TGF-β信号通路的抑制作用,参与先天性心脏病的发生。     

RP-HPLC法测定固体脂质纳米粒中β-榄香烯的含量

目的建立固体脂质纳米粒注射液中β榄香烯的反相高效液相色谱法。方法色谱柱:HypersilBDSC18(4.6mm×200mm,5μm);流动相:乙腈水(体积比为88∶12);检测波长:210nm;柱温:30℃。结果β榄香烯与其他组分分离良好,线性范围10.6～53.0mg·L-1(r=0.9999),平均回收率为99.6%,RSD为0.93%(n=5)。结论方法简便、准确,可作为该制剂的质量控制方法。     

益髓生血颗粒治疗β-地中海贫血临床疗效的深入研究

研究中药益髓生血颗粒治疗β-地贫临床效果及疗效特点的分子机制。方法:用补肾益髓法的代表方(益髓生血颗粒)在广西高发区治疗β-地贫92例,疗程3个月,观察治疗前后临床症状,血红蛋白(Hb)、抗碱血红蛋白(HbF)、红细胞(RBC)、网织红细胞(Ret)等血液参数变化及停药后随访观察,采用PAGE、PCR-SSCP、RT -PCR、DNA序列分析、mRNA基因表达、DDRT-PCR等技术研究疗效特点的分子机制。结果:经三个月治疗后,患者临床症状明显改善,Hb、HbF、RBC、Ret等血液指标明显提高,停药后疗效平均维持3-6个月,92例中85例有效,有效率92．39%,患者临床症状明显改善与血液学指标的提高有很好的一致:性中药益髓生血颗粒对各类β-地贫基因型患者均有一定疗效;可明显提高患者血红蛋白珠蛋白mRNA表达和造血刺激因子GM-CSFmRNA表达,诱导HbF合成增加;益髓生血颗粒可明显降低患髓患者铁蛋白基因表达,减少体内铁的蓄积。结论:益髓生血颗粒治疗β-地中海贫血效果显著;中药治疗β-地贫可明显调节功能基因的表达。疗效特点为多靶点的整体效应。     

大肠癌组织中胸腺素β4 基因表达及其临床意义

 目的 探讨大肠癌组织中胸腺素胆基因的表达及其临床意义。方法 采用逆转录一聚合酶链反应（RT-PCR）方法，检测41例大肠癌患者肿瘤组织及正常黏膜组织中胸腺素胆基因mRNA的表达。结果 半定量RT-PCR显示所有癌组织中均有胸腺素胆mRNA表达，但在部分正常黏膜组织中表达缺失。癌组织平均表达量为0．65±0．21，正常黏膜组织为0．42±0．19（P〈0．01）。其表达与淋巴结转移和临床分期有关，在有淋巴结转移组中胸腺素胆mRNA表达（0．82±0．23）明显高于无淋巴结转移组（0．53±0．19）（P〈0．05）；C＋D期组中胸腺素胆mRNA表达（0．82±0．22）明显高于A＋B期组（0．51±0．18）（P〈0．05），与肿瘤大小、分化程度、患者性别、年龄、肿瘤部位无关。结论 大肠癌组织中胸腺素陋的表达与肿瘤的转移播散相关，胸腺素陋可作为判断大肠癌转移播散和临床分期的参考指标。     

归芪方合苯那普利对糖尿病大鼠肾组织转化生长因子β_1的影响

目的研究归芪方联合血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)苯那普利对糖尿病大鼠肾功能和肾组织转化生长因子β_1(TGF-β_1)基因表达的影响。方法Wistar大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)以建立糖尿病模型,将糖尿病大鼠分为糖尿病模型组、苯那普利治疗组、归芪方治疗组、归芪方合苯那普利治疗组,另设正常对照组。实验第8周时统一处死,观察各组大鼠肾重/体重、血糖、内生肌酐清除率(CCr)及肾组织结构的改变,放免法测定24h尿微量白蛋白排泄率(UAER)、β2-微球蛋白(β_2-MG)、血浆及肾组织血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量,原位杂交检测肾脏皮质TGF-β_1基因表达的变化。结果与单用苯那普利或归芪方相比,联合用药可明显减少尿白蛋白、β_2-MG,控制肾脏肥大,改善肾功能,使肾皮质TGF-β_1mRNA表达量进一步减少,同时肾脏病理改变亦减轻。结论苯那普利合用归芪方能更有效地抑制TGF-β_1mRNA的表达,减轻肾脏损伤,改善肾功能,延缓糖尿病肾病慢性病理进展。     

精乌口服液的质量标准研究

目的:完善精乌口服液的质量标准。方法:采用薄层色谱法对精乌口服液中的制何首乌和黄精(制)进行定性鉴别,并采用高效液相色谱法对其中2,3,5,4’—四羟基二苯乙烯—2—O—β—D—葡萄糖苷含量进行测定。结果:精乌口服液中制何首乌和黄精(制)供试品薄层色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;2,3,5,4’—四羟基二苯乙烯—2—O—β—D—葡萄糖苷进样量在0·0562μg~0·6744μg范围内与峰面积积分值线性关系良好(r=0·9996),平均加样回收率为100·1%(RSD=1·89%)。结论:本方法回收率高、重现性好、简便、快速、准确,可用于本品的质量控制。     

蜕皮甾酮对HepG2细胞葡萄糖消耗的影响

目的探讨蜕皮甾酮体外降糖的作用特点或机制,即能否通过刺激胰岛素分泌而产生降糖作用。方法检测HepG2细胞24 h培养液中葡萄糖的消耗量;另外测定βTC3细胞胰岛素的释放量。结果蜕皮甾酮在1×10-6~10-4mol.L-1浓度范围内可使HepG2细胞的葡萄糖消耗量增加(44%~77%);蜕皮甾酮的降糖效能随着培养液中葡萄糖浓度的升高而降低;胰岛素对蜕皮甾酮的降糖作用没有明显的影响。蜕皮甾酮没有刺激βTC3细胞胰岛素分泌的作用。结论蜕皮甾酮可通过肝细胞发挥非胰岛素依赖的降糖作用,但不能刺激胰岛素的分泌。     

NSFC资助下的阿尔采末病药物作用靶点的研究

阿尔采末病(Alzheimesdisease,AD)是一种神经退行性病变,最近几年对AD的研究主要集中在其两个标志性的病理改变上即β样淀粉蛋白和神经纤维缠结。该文主要是根据国内外对AD的研究进展,结合国家自然科学基金委员会(NationalNatureScienceFoundationofChina,NSFC)近10年来资助的有关AD的基金项目,针对AD的药物治疗靶点作一综述。     

二苯乙烯苷对D-半乳糖拟痴呆小鼠海马基因表达的影响

目的　应用cDNA芯片探索二苯乙烯苷(TSG)干预D 半乳糖皮下注射的拟痴呆 (AD)小鼠海马的靶基因。方法　D 半乳糖 (5 0mg·kg- 1·d- 1,6 0d)皮下注射为模型组 ,造模加TSG (0 .1g·kg- 1·d- 1)灌胃为TSG组 ,对照组只注射相同体积的生理盐水。每组 6只小鼠用Morris水迷宫测试学习记忆能力。取海马组织抽提RNA ,掺入荧光分子Cy3和Cy5逆转录合成cDNA探针。以模型比正常组和TSG比正常组为组合混合探针 ,与两张小鼠 4 0 0 0点cDNA芯片杂交 ,经荧光信号扫描及GenePixPro3.0分析TSG组AD疾病相关基因调控得到改善的基因。结果　TSG可缩短小鼠游至目标的距离和时间 ,说明改善了学习记忆能力。TSG组与模型组表达差异的基因有 2 9条上调 ,12条下调 ,其中与AD相关的有 11条。结论　基因表达结果说明 ,TSG可能使能量代谢与神经营养作用增强 ,炎性反应和转录整体水平下降。