HMME在不同溶液中光漂白反应动力学规律

目的 分析国产光敏剂血卟啉单甲醚（HMME）在不同溶液中光漂白反应动力学规律，加深对光漂白反应复杂反应过程的理解，并为HMME-PDT治疗微血管病变的数学建模研究提供实验依据和参数。 方法 根据光化学反应动力学原理，从理论上推导出在单纯溶液和复杂溶液（含可被光氧化的底物）中，单态氧介导的光漂白反应动力学方程，通过对实验测定的漂白数据（不同时间点的HMME浓度）进行拟合，进一步验证理论推导出光漂白反应动力学方程。 结果 HMME在单一溶液体系（PBS、DMSO）中的光漂白符合1级反应动力学过程，在含底物的复杂体系（白蛋白缓冲液、细胞悬液）中符合2级反应动力学过程。 结论 HMME在不同溶液体系中的光漂白遵循不同的反应动力学规律。根据化学反应动力学原理进行光漂白等复杂光化学反应过程的数学模拟是可行的，并有利于对复杂光化学反应过程的深入理解。     

浙江人群幽门螺杆菌cagA/vacA优势基因型和不同基因型混合感染的调查

目的　了解消化性溃疡和慢性胃炎患者感染的幽门螺杆菌 (Hp)cagA vacA优势基因型及不同基因型Hp感染、混合感染与疾病的关系。 方法　选择胃窦、胃体双份活检标本均培养出Hp的 42例慢性胃炎 (CG)和 3 6例消化性溃疡 (PU )患者作为研究对象 ,采用聚合酶链反应 (PCR)检测156份Hp分离株的cagA基因、vacA基因的信号区 (s)和中间区 (m )亚型 ,分析Hp基因型及多株Hp混合感染在CG和PU中的分布。结果　胃窦标本cagA基因的检测中 78例患者中有 75例 (96.2 % )为cagA阳性 ,相应的胃体标本中 ,76例患者 (97.4% )为cagA阳性 ,有 1例 (1.3 % )患者胃窦、胃体检出cagA状态不一的Hp混合菌株。在胃窦标本的vacA基因分型中 ,s1a m1、s1a m2、s1a m1b、s1a m1b m2 4种vacA基因型在 78例患者中所占比例分别为 6.4% (5 78)、55.1% (43 78)、2 6.9% (2 1 78)和 1.3 % (1 78) ,多株混合感染为 3 .8% (3 78) ;而相应的胃体标本中 ,前述四种vacA基因型所占比例依次为 6.4% (5 78)、53 .8% (42 78)、2 5.6% (2 0 78)和 3 .8% (3 78) ,多株混合感染为 5.1% (4 78)。cagA+ s1a m2和cagA+ s1a m1b在胃窦标本中占 51.3 % (40 78)和 2 6.9% (2 1 78) ,而在相应的胃体标本中占 52 .6% (41 78)和 2 5.6% (2 0 78)。少量胃窦、胃体     

多重PCR归化法平行检测HBV和HCV的研究

目的：建立一种多重PCR归化法并应用于对HBV、HCV平行检测。方法：利用PCR反应5′端允许添加非互补序列的原理，运用内外两对引物，经过2轮扩增，使目的产物均带上共有序列，再以共有序列为引物进行扩增，实现多重扩增。比较和筛选四种核酸提取方法。运用正交优化法，优化并确定最佳扩增条件。对28份血标本进行对比试验，并进行质量评价。结果：归化多重PCR方法对于HBV、HCV病毒合并感染患者的诊断敏感性为83.5%，诊断特异性为70.0%，诊断指数为153．3％，诊断效率为72．2％；对HBsAg阳性患者的HBV DNA的诊断敏感性为78．6％，诊断特异性为80．0％，诊断指数为158．6％，诊断效率为79．2％。对抗－HCV阳性患者的HCV RNA的诊断敏感性为75．0％，诊断特异性为90．0％，诊断指数为165．0％，诊断效率为83．3％。结论：多重PCR归化法在多基因扩增或多种病原体的同时平行检测领域具有较大应用潜力。该方法实用、准确、可靠，对HBV HCV的防治具有实际意义。     

D4S1647、D6S2414基因座在中国汉族、蒙古族、藏族的遗传多态性

目的 调查D4S1647、D6S2414基因座在中国汉族、蒙古族、藏族群体中的遗传分布规律。方法 采集308份血及唾液标本应用PCR技术，扩增产物用非变性聚丙酰胺凝胶电泳分离，银染显色分析。结果 两位点各群体基因型频率分布均符合Hardy-Weinberg平衡，每一位点等位基因频率分布在各群体间无显著差异；通过对10个汉族家系的遗传模式分析，证实了两位点等位基因传递遵循孟德尔遗传规律。结论 D4S1647、D6S2414基因座在中国汉族，蒙古族，藏族群体均具有高度遗传多态性。     

实时荧光定量PCR检测PML-RARα融合基因的临床应用研究

目的 利用PML-RARα融合基因作为标志物,应用实时荧光定量PCR技术,监测急性早幼粒细胞白血病(APL)微小残留病(minimal residual disease,MRD)患者体内病毒的状态,探讨预测APL复发风险的方法.方法 利用本实验室建立的定量检测APL患者PML-RARα融合基因的方法,对25例处于初诊、完全缓解(complete remission,CR)、复发等不同阶段的APL患者进行了PML-RARα融合基因的定量检测,并对其中6例患者的MRD状态进行了动态监测.结果 应用荧光定量PCR技术分析患者初诊、CR和复发状态的PML-RARα基因对数值(lg)水平,结果 显示有统计学意义(x2=6.847,P＜0.05);随访期患者的PML-RARα对数值(lg)水平变化较大:初诊时较高(-0.61±0.79),CR时下降(-1.31±0.62),复发时又出现上升(-0.57±0.44),提示若该患者在CR时的对数值呈现上升趋势,患者复发的机率大.结论 应用实时荧光定量(RQ)-PCR技术定量检测PML-RARα融合基因,对监测APL患者MRD状态具有临床适用性,随访期的MRD动态追踪监测具有预后价值.     

视网膜特异性表达人血管内皮生长因子 基因载体的构建

目的构建在视网膜组织特异性表达的人血管内皮生长因子（VEGF）₁₆₅基因。方法用聚合酶链反应(PCR)方法从BLAB/C鼠全基因组扩增能在视网膜组织特异性表达的rho启动子，经限制性内切酶纯化后克隆于质粒pcDNA^3.1+-VEGF₁₆₅中，建立重组质粒pcDNA^3.1+-rho-VEGF₁₆₅，通过限制性内切酶酶切分析及PCR鉴定筛选出正确重组质粒pcDNA^3.1+-rho-VEGF₁₆₅,由jetPEI介导转染人视网膜色素上皮细胞和人脐静脉内皮细胞，并通过免疫组织化学染色以及绘制细胞生长曲线检测在人视网膜色素上皮细胞和人脐静脉内皮细胞中VEGF蛋白的表达。结果在人视网膜色素上皮细胞中，重组质粒pcDNA^3.1+-rho-VEGF₁₆₅比质粒pcDNA^3.1+-rho-VEGF₁₆₅的VEGF蛋白表达强，在人脐静脉内皮细胞，两者的表达量无明显差别。结论pcDNA^3.1+-rho-VEGF₁₆₅载体的构建为进一步研究VEGF在视网膜新生血管形成中的致病机理提供基础材料，并为进一步建立视网膜特异性表达VEGF转基因鼠模型建立了基础。(中华眼底病杂志,2005,21:106-109)     

2型糖尿病患者载脂蛋白E基因多态性的研究

目的：探讨中国人2型糖尿病患者载脂蛋白E（apoE)基因多态性及其与血脂和载脂蛋白水平的关系。方法：采用聚合酶链反应－限制性酶切片段长度多态性法，分别对74例2型糖尿病患者及191例血脂、血糖正常且无糖尿病史者的apoE基因型、空腹血脂及载脂蛋白AI、AⅡ、B100、CⅡ、CⅢ及E进行全面分析。结果：2型糖尿病患者的血清甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC），低密度脂蛋白胆固醇（LDLC），非高密度脂蛋白胆固醇（nHDLC),载脂蛋白B100、CⅡ、CⅢ、E水平及TG／HDLC比值较对照组显著升高（P＜0．01）；血清高密度脂蛋白胆固醇（HDLC），apoE/apoCⅢ比值显著降低（P＜0．05）。2型糖尿病组与对照组apoE基因频率分布无显著性差异（P＞0．05）。携带ε2等位基因组血清TG／HDLC比值较E3／3基因型显著降低；而携带ε4等位基因组血清apoAⅡ水平较E3／3基因型及携带ε2等位基因组显著升高（P＜0．001）。结论：2型糖尿病患者apoE基因多态性与血TG／HDLC及apoAⅡ有一定关联。     

Influence of muscle activation dynamics on reaction time in the elderly

The aim of this investigation was to determine whether age-related changes in the dynamics of muscle activation were, in part, responsible for longer reaction times (RT) in the elderly. A group of 12 young (mean age, 20.6 years) and 12 elderly (mean age, 64.3 years) women performed a series of ballistic forearm supination movements in response to an auditory stimulus while using a simple reaction time test. Surface electromyographic waveforms from biceps brachii (agonist) and pronator teres (antagonist) muscles were recorded, together with the angle-time curves representing the motion of the forearm, on to an IBM compatible microcomputer. The results showed that an age-related increase (P<0.05) in motor reaction time (MRT) contributed to longer RT in the elderly. In addition, the longer (P<0.05) MRTs in the elderly were associated with a significantly slower rate (P<0.05) of biceps brachii muscle activation and a significantly increased proportion (P<0.05) of the initial biceps brachii muscle burst required to initiate the movement. This data suggested that an important part of the slowing of motor behaviour, commonly observed with increasing age, may be due to either decreases in the ability of aged skeletal muscle to rapidly generate tension or to a reduction in motor drive.