PGC-1基因Ser74Leu、IVS2+52C＞A多态与2型糖尿病的相关性研究

目的 探索中国延边朝鲜族、汉族人群的PGC-1基因Ser74Leu、IVS2 52C＞A多态与2型糖尿病(T2DM)的相关性.方法 采用聚合酶链反应-单链构象多态性技术(PCR-SSCP)确定PGC-1基因的第2外显子及第2内含子的Ser74Leu、IVS2 52C＞A多态位点的基因型,比较等位基因频率及基因型频率在民族之间差异.结果 1. 朝鲜族和汉族的T2DM、NGT组间的PGC-1基因Ser74Leu(C＞A)、IVS2 52(C＞A)两个等位基因三种单体型的频率分布比较未见差异(P=0.178, P=0.671);2. T2DM组中,朝鲜族表型为CC-CA/CC-AA的腰臀比(WHR)水平较表型为CC-CC的高(P=0.030),汉族表型为CC-CA/CC-AA的空腹血糖(FPG)水平高于表型为CC-CC(P=0.005).结论 PGC-1基因可能是中国延边朝鲜族和汉族2型糖尿病的发病的易感基因.     

乳腺癌患者BRCAl基因外显子11突变研究

目的：检测乳腺癌患者（breast and ovarian cancer susceptibility gene1，BRCAl）基因exonll突变情况及突变位置，探讨BRCAl突变与乳腺癌的关系。方法：采取105例乳腺癌标本为实验组，30例非癌乳腺组织为对照组。应用PCR—SSCP技术和DNA直接测序法检测所有标本BRCAl基因外显子11全部序列的突变情况。结果：30例非癌乳腺组织BRCAl基因外显子11未检出突变，105例乳腺癌中有10例发生基因突变，占总例数的9．5％。10例中2例为同义突变：2430T→ C，2630T→G；8例为错义突变：2532T→G，2685T→C（2例），3191C→G，3232A→G，3667A→G（2例），3876C→A。结论：BRCAl基因外显子11突变与乳腺癌的发生关系密切，对其进行检测可能对乳腺癌的患病风险评估及早期诊断具有重要意义。     

吸入性烟尘与大鼠肺组织p53蛋白表达和基因突变的关系

目的分析吸烟对p53在肺组织中表达的影响,研究吸烟与p53基因突变的关系,探讨吸烟导致肺癌的发生发展,为临床上吸烟对肺造成损伤的判定及吸烟者肺癌的早期诊断提供理论依据。方法建立大鼠烟雾吸入模型,常规石蜡切片HE染色,光镜观察肺泡结构等变化情况;免疫组织化学SP法检测吸烟各个设定时期p53蛋白的表达情况;从超低温冷冻肺组织标本中抽提DNA,以PCR-SSCP法检测p53第5～8外显子在吸烟各阶段的突变情况。所得数据采用SAS软件作统计学处理分析,比较各组间差异程度。结果吸烟可以导致大鼠肺泡腔不规则扩大,肺泡壁变薄或断裂,呼吸性细支气管呈囊状扩张,肺泡相互融合成肺大泡,伴有中性粒细胞、淋巴细胞及巨噬细胞等炎性细胞浸润。p53蛋白表达阳性率随吸烟时间的延长而升高（P〈0.05）,p53基因突变率也随吸烟时间的延长而增加（P〈0.05）,并呈逐渐上升趋势。结论在吸烟所致肺癌的发生发展中p53基因的突变是早期事件,为通过筛选吸烟者痰液中脱落细胞中的p53基因突变进行肺癌的早期诊断提供了理论依据。     

PCR-SSCP技术检测中国人肝豆状核变性基因第18、14外显子突变

目的 了解中国人肝豆状核变性（WD）患者基因第18、第14外显子的突变情况，为掌握该痛的突变特点并进行基因诊断提供依据。方法 聚合酶链反应-单链构象多态性（PCR—SSCP）检测中国人WD基因第18、14外显子突变，并对异常带型进行直接DNA测序。结果 45例患者和20例正常人的18外显子PCR—SSCP出现两种泳动带型，异常带型测序证实无突变存在。14号外显子PCR—SSCP出现的带型均一致，结论 14外显子和18外显子可能不是中国人WD基因突变的热区。     

瘢痕疙瘩Fas基因"死亡域"杂合性丢失的研究

目的　探讨Fas抑癌基因在瘢痕疙瘩组织中的缺失及与临床病理的关系。方法　采用PCR -SSCP银染技术 ,检测 1 5例瘢痕疙瘩标本Fas基因“死亡域”外显子 7～ 9的基因结构。结果　 1 5例瘢痕疙瘩 1 0 0 %有Fas基因外显子 8的杂合丢失。 2 0 %有外显子 9等位基因条带增多 ,提示存在基因突变。结论　瘢痕疙瘩Fas基因外显子 8、9区段的基因结构异常与其编码的蛋白无功能关系密切。     

淋球菌mtrR启动子区域中回文序列基因突变与多重耐药关系的研究

目的 :探讨淋球菌mtrR启动子区域中回文序列基因突变与多重耐药之间的关系。方法 :①纸片扩散法检测 5 6株淋球菌对 5种抗生素的敏感性 ;②PCR扩增mtrR启动子区域中包含有 13个碱基回文序列在内的 15 7个碱基 ,并进行SSCP(单链构象多态性 )分析 ;③根据SSCP的结果 ,选取 12株标本进行测序分析 ,将其核苷酸序列与标准敏感株ATCC194 2 4进行比较。结果 :5 6株细菌中有 5株对 5种抗生素都敏感 ;对 1种抗生素耐药的有 2 2株 ;对两种抗生素耐药的有 19株 ,其中有两株mtrR启动子区域中回文序列基因发生了突变 ;对 3种抗生素、4种抗生素和 5种抗生素耐药的株菌分别是 7株、2株和 1株 ,它们的mtrR启动子区域中回文序列基因均发生了突变。并且这 12株标本突变的类型一致 ,在 13个碱基的回文序列中发生了单个A/T碱基的缺失。结论 :①mtrR启动子区域中回文序列基因突变介导淋球菌的多重耐药 ;②回文序列单个A/T碱基的缺失与淋球菌多重耐药的关系密切     

P73基因在鼻咽癌组织中表达的意义

目的:研究鼻咽癌组织中P73基因的表达及其临床意义。方法:运用逆转录聚合酶链反应技术(RT-PCR)及单链构象多态性分析技术(SSCP)检测P73mRNA的表达及P73基因的突变情况。运用免疫组化SABC技术检测P73蛋白的表达情况。结果:47例鼻咽癌组织中29例P73mRNA表达阳性,15例鼻咽粘膜慢性炎症组织中3例P73mRNA表达阳性。鼻咽癌组织中P73mRNA的表达与鼻咽粘膜慢性炎症组织相比,其差异具有显著性(P<0.05)。鼻咽癌组织中P73mRNA的表达与TNM分期存在密切关系,Ⅲ~Ⅳ期患者P73mRNA的阳性表达率较Ⅰ~Ⅱ期高(P<0.05)。P73基因在所检测的标本中未发现有突变。免疫组化技术检测证实鼻咽癌中存在P73蛋白的过表达(P<0.05)。结论:鼻咽癌组织中存在P73基因的过表达现象,P73基因的异常表达与鼻咽癌的发生发展存在一定的关系。     

p53 aberrations in oral submucous fibrosis and oral squamous cell carcinoma detected by immunocytochemistry and PCR-SSCP

Trivedy C, Warnakulasuriya KAAS, Tavassoli M, Steingrimsdottir H, Penhallow J, Maher R, Johnson NW: p53 aberrations in oral submucous fibrosis and oral squamous cell carcinoma detected by immunocytochemistry and PCR-SSCP. J Oral Pathol Med 1998; 27: 72–7. © Munksgaard, 1998.
An archival series of oral biopsies from Karachi, Pakistan, consisting of 21 cases of oral submucous fibrosis (OSF) and 27 cases of squamous cell carcinoma (SCC), of which 6 had arisen from OSF, were used to examine the aberrations in the structure and expression of the p53 tumour suppressor gene. The PCR-SSCP method was used for mutation analysis of exons 2–9, and (over)expression of p53 protein was detected by immunocytochemistry using monoclonal antibody DO 7. Positive immunostaining was observed in 15/20 (75%) of OSF specimens, 3/6 (50%) of SCC arising from OSF and 14/21 (67%) of SCC not arising from OSF. Mobility shifts in SSCP indicative of a mutation in p53 or loss of heterozygosity (deletion of a band) were seen in 13/21 cases of OSF and 15/27 cases of SCC. There was concordance between immunocytochemistry and SSCP results in a majority (33/48) of samples. Though the number of analysed SCC cases arising from OSF was limited, the results suggest that p53 mutation/protein stabilisation may play a part in the pathogenesis of OSF and its progression to SCC.     

Lack of point mutation of the APP gene in sporadic Alzheimer's disease in Japanese

We investigated point mutations of the APP gene in 66 patients with sporadic Alzheimer's disease(AD) and 180 normal individuals by use of the PCR (polymerase chain reaction) method. Both the AD patients and the normal individuals were Japanese. We extracted DNA from blood samples using the phenol-chloroform method and amplified exons 16 and 17 of the APP gene by PCR. PCR products were digested by MBO-11 (exon 16) and BCL-1(exon 17). Electrophoresis was carried out with 3% agarose gel and the separated fragments were stained with ethidium bromide. In addition we investigated other point mutations of exons 16 and 17 by use of the PCR-SSCP (single stranded conformation polymorphisms) method, and found no fragments that exhibited point mutations in the AD patients and normal individuals. These findings indicate that the presence of point mutation of the APP gene is not a major cause of AD in the Japanese population.     

PCR-SSCP研究进展及其在羊经济性状研究中的应用

PCR-SSCP是单核苷酸多态性分析的一项重要技术。本文简要介绍了PCR-SSCP的原理、方法、研究进展及其近年来在绵山羊经济性状研究中的应用。