丙谷胺联合NS-398对人大肠癌LoVo细胞增殖和细胞周期的影响

目的：研究胃泌素受体拮抗剂（丙谷胺）联合环氧合酶．2抑制剂（NS-398）对人大肠癌LoVo细胞增殖和细胞周期的影响。方法：人大肠癌LoVo细胞株培养于RPMI1640培养液中,加入丙谷胺6个稀释度1．O、3．0、5．0、6．0、8．0、10．0mmol／L及NS-3986个稀释度0．01、0．1、1．0、10．0、100．0、1000．0μmol／L连续培养24h后用噻唑蓝（MTT）比色实验检测肿瘤细胞增殖抑制率;单用丙谷胺稀释度为6mmol／L,单用NS-398稀释度为100．0μmol／L及两者的混和液作用24、48、72h后检测肿瘤细胞抑制率;单用丙谷胺稀释度为6mmol／L,单用NS-398稀释度为100．0μmol／L以及2者的混和液作用24h后,用流式细胞仪测定细胞周期的变化。结果：丙谷胺与NS．398均能抑制LoVo细胞株增殖,丙谷胺与NS-398能协同作用,抑制大肠癌LoVo细胞增殖,且协同作用随药物作用时间的延长而增强。流式细胞仪检测表明两者均能抑制大肠癌LoVo细胞从G1期到S期的转化,两者联合用药抑制效果更为显著。结论：丙谷胺与NS-398均能抑制大肠癌LoVo细胞从G1期到S期的转化从而抑制LoVo细胞株的增殖,两者合用具有协同抗癌作用。     

食管癌干细胞辐射抗性与相关蛋白表达的研究

目的 探讨NS398联合X射线照射对食管癌干细胞和贴壁肿瘤细胞辐射增敏效应的差异,并分析食管癌干细胞的辐射抗性及其与相关蛋白表达的关系。方法 采用无血清培养基分离细胞系ECA109的食管癌干细胞;流式细胞仪检测细胞表面标记物CD44+和CD271+的表达;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测NS398联合不同照射剂量(0、4和8 Gy)对细胞增殖能力作用的联合效应;克隆形成实验检测NS398对亲本细胞和细胞球辐射增敏效应的差异;Western blot检测细胞内4种相关蛋白的表达水平。结果 在无血清培养基中可分离培养稳定传代的肿瘤干性细胞球。细胞球CD271+的表达高于亲本细胞(t=3.81,P<0.05)。照射后细胞球增殖能力大于亲本细胞。NS398联合照射时,亲本细胞的存活分数(SF₂)小于细胞球(t=2.91,P<0.05),NS398对亲本细胞的SER大于细胞球。细胞球内Bmi-1、c-Myc、β-catenin和CyclinD1的表达水平较亲本细胞均升高(t=8.09、7.90、7.50、7.15,P<0.05);4 Gy照射后细胞内CyclinD1的表达水平均升高(t=9.74、6.67,P<0.05);NS398联合4 Gy照射组与4 Gy照射组相比,亲本细胞β-catenin和CyclinD1表达水平降低(t=10.15、12.12,P<0.05),细胞球β-catenin和Cyclin D1表达水平亦降低(t=3.23、7.45,P<0.05)。结论 无血清培养基分离培养的食管癌干细胞高表达干细胞表面标记物CD271和干细胞相关蛋白,并具有辐射抗性,其机制可能与β-catenin分子及其下游靶蛋白的表达水平有关。     

选择性环氧合酶-2抑制剂NS398对人肺癌裸鼠移植瘤生长抑制作用研究

目的 探讨选择性环氧合酶-2抑制剂NS398对人肺癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用及其机制。方法 建立人肺癌A549细胞的裸鼠皮下移植瘤模型,成瘤后20只裸鼠随机分为4组：对照组、NS398低剂量（1.5mg/kg）组、NS398中剂量（3.0mg/kg）组和NS398高剂量（4.5mg/kg）组。各组均采用腹腔注射给药,每周3次,共4周。给药期间每隔7日测量肿瘤体积。最后一次给药次日,处死裸鼠完整剥取肿瘤,测量肿瘤重量并计算抑瘤率。TUNEL法检测各组移植瘤标本细胞凋亡情况,免疫印迹法检测survivin、XIAP和cleaved caspase-3蛋白表达情况。结果 NS398各剂量组肺癌移植瘤生长速度均慢于对照组,各剂量组肿瘤重量显著低于对照组（P<0.01,P=0.000）,呈剂量依赖性。各剂量组的抑瘤率分别为30.18%、46.50%和53.87%。TUNEL法结果显示,与对照组比较,NS398各剂量组凋亡指数均显著增加（P<0.01,P=0.000）,并呈剂量依赖性。免疫印迹法结果显示,与对照组比较,NS398各剂量组survivin和XIAP蛋白表达量均显著减少,cleaved caspase-3蛋白表达量均显著增加（P=0.000）,也呈明显剂量依赖性。结论 NS398能明显抑制人肺癌裸鼠移植瘤的生长,并诱导肿瘤细胞凋亡,其机制可能与下调survivin和XIAP蛋白表达,上调cleaved caspase-3蛋白表达有关。     

NS-398对宫颈癌Hela细胞顺铂敏感性的影响

目的 研究环氧合酶-2（COX-2）特异性抑制剂NS-398对宫颈癌Hela细胞顺铂敏感性的影响.方法 用含NS-398和顺铂的细胞培养液作用于Hela细胞,应用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测作用后的Hela细胞对顺铂敏感性的变化;采用流式细胞仪分别检测经过NS-398和顺铂作用的细胞与顺铂联合单独作用的细胞的COX-2蛋白表达情况.结果 NS-398和顺铂联合作用后的Hela细胞COX-2表达量较顺铂单独作用后的减少,差异有统计学意义（P〈0.05）;在转染48h后,Hela细胞对顺铂的半数抑制量（IC50值）从（10.475±1.713）μg/ml提高到（0.194±0.021）μg/ml,Hela细胞对顺铂的敏感性增加了53.88倍.结论 NS-398能增加宫颈癌Hela细胞对顺铂的敏感性.     

NS-398对人胃癌裸鼠移植瘤血管生成的影响

目的探讨NS-398对裸鼠胃癌移植瘤血管生成的影响.方法12只裸鼠随机分为2组,以人胃癌细胞株SGC7901建立荷瘤裸鼠动物模型.治疗组于接种第2 d开始给予10 mg/kg NS-398腹腔注射,隔d给药;对照组隔d腹腔注射同体积PBS,连续20 d,观察抑瘤率,应用免疫组织化学技术检测2组肿瘤组织环氧合酶-2(COX-2)、VEGF表达及微血管密度(MVD).结果NS-398抑瘤率达88.7%,COX-2、VEGF及MVD在治疗组分别为2.6±0.8,2.3±1.2和21.2±4.8,显著低于对照组的5.0±0.6,5.8±0.4和41.3±2.6(P均＜0.05).结论NS-398可能通过抑制COX-2、减少VEGF的表达抑制裸鼠胃癌移植瘤血管生成.     

3-(4-甲磺酰基)苯基-2-环己基-2-丁烯酸-γ-内酯的合成

目的　设计并合成了标题化合物。方法　以对甲磺酰基苯乙酮为原料,经溴代、缩合和环合三步反应合成了产物。结果　总收率为82.5%,中间体和产物经核磁共振谱和质谱确证。结论　成功地合成了设计的化合物,而且摸索了反应条件,使反应具有时间短,收率高等优点。     

Nimesulide binding site in the B0AT1 (SLC6A19) amino acid transporter. Mechanism of inhibition revealed by proteoliposome transport assay and molecular modelling

The effect of pharmaceutical compounds on the rat kidney B0AT1 transporter in proteoliposomes has been screened. To this aim, inhibition of the transport activity by the different compounds was measured on Na⁺-[³H]glutamine co-transport in the presence of membrane potential positive outside. Most of the tested drugs had no effect on the transport activity. Some compounds exhibited inhibitory effects from 5 to 88% at concentration of 300 μM. Among the tested compounds, only the anti-inflammatory drug nimesulide exerted potent inhibition on B0AT1. From dose response analysis, an IC₅₀ value of 23 μM was found. Inhibition kinetic analysis was performed: noncompetitive inhibition of the glutamine transport was observed while competitive behaviour was found when the inhibition was analyzed with respect to the Na⁺ concentration. Several molecules harbouring functional groups of nimesulide (analogues) were tested as inhibitors. None among the tested molecules has the capacity to inhibit the transport with the exception of the compound NS-398, whose chemical structure is very close to that of whole nimesulide. The IC₅₀ for this compound was 131 μM. Inhibition kinetics showed behaviour of NS-398 identical to that of nimesulide, i.e., noncompetitive inhibition respect to glutamine and competitive inhibition respect to Na⁺. Molecular docking of nimesulide suggested that this drug is able to bind B0AT1 in an external dedicated binding site and that its binding produces a steric hindrance effect of the protein translocation path abolishing the transporter activity.     

使用比释动能校准因子测量直线加速器吸收剂量的方法

目的 探讨两种使用比释动能校准因子Nk按照TRS 277与TRS 398规范测量吸收剂量方法的差异,旨在为是否可以通过比释动能校准因子Nk按照TRS 398报告测量吸收剂量提供指导.方法 首先从理论上对两种校准方法的校准公式进行推导整理,然后寻找其中的差异,最后对差异进行量化;在此基础上,利用整理后的公式,计算3种常用...     

抗delta阿片受体单克隆抗体对蛋脑啡肽的拮抗作用

目的 :探讨蛋脑啡肽 (MENK)对体外培养的小鼠的骨髓瘤细胞 (NS-1 )增殖的作用及抗阿片受体单克隆抗体对该作用的影响。方法 :用3H-Td R掺入法测定不同给药组细胞的增殖。结果 :1 μmol/ L MENK可促进 NS-1细胞增殖 ,促进作用达 1 0 9.5 % ,而 0 .1～ 1 0 nmo1 / L的抗体可抑制MENK的作用。结论 :抗 delta阿片受体单克隆抗体能拮抗 MENK促进细胞增殖的作用 ,提示MENK促进细胞增殖作用可能是通过阿片受体机理所介导。     

环氧合酶-2及其特异性抑制剂NS-398对膀胱癌细胞体外生长与侵袭能力的影响

目的 研究环氧合酶-2(Cyclooxygenase-2，COX-2)及其特异性抑制剂NS-398在膀胱癌细胞生长和侵袭转移中的作用。方法 利用转基因技术将COX-2 cDNA基因导入低表达COX-2的膀胱癌细胞株EJ，获得高表达COX-2的永久转染细胞EJ-COX2。观察转染前后细胞生长速度的变化；在NS-398作用下，Boyden小室检测细胞的侵袭能力的改变，用RT-PCR和Western blotting检测uPA的表达变化。结果 转染COX-2的EJ-COX2细胞体外增殖能力增强；穿过人工基底膜的体外侵袭能力增强；尿激酶型纤溶酶原激活因子(Urokinase plasminogen activatoi，uPA)的表达上升；NS-398能呈剂量依赖地抑制COX-2、uPA的表达和EJ-COX2细胞的侵袭能力。结论 COX-2能促进膀胱癌细胞生长，并通过促进uPA的表达从而促进其侵袭转移的能力，NS-398能呈剂量依赖地抑制COX-2、uPA的表达和EJ-COX1细胞的侵袭能力。