Amniotic fluid chemokines and autism spectrum disorders: an exploratory study utilizing a Danish Historic Birth Cohort

Introduction

Elevated levels of chemokines have been reported in plasma and brain tissue of individuals with Autism Spectrum Disorders (ASD). The aim of this study was to examine chemokine levels in amniotic fluid (AF) samples of individuals diagnosed with ASD and their controls.

Material and methods

A Danish Historic Birth Cohort (HBC) kept at Statens Serum Institute, Copenhagen was utilized. Using data from Danish nation-wide health registers, a case-control study design of 414 cases and 820 controls was adopted. Levels of MCP-1, MIP-1α and RANTES were analyzed using Luminex xMAP technology. Case-control differences were assessed as dichotomized at below the 10th percentile or above the 90th percentile cut-off points derived from the control biomarker distributions (logistic regression) or continuous measures (tobit regression).

Results and conclusion

AF volume for 331 cases and 698 controls was sufficient for Luminex analysis. Including all individuals in the cohort yielded no significant differences in chemokine levels in cases versus controls. Logistic regression analyses, performed on individuals diagnosed using ICD-10 only, showed increased risk for ASD with elevated MCP-1 (elevated 90th percentile adjusted OR: 2.32 [95% CI: 1.17-4.61]) compared to controls. An increased risk for infantile autism with elevated MCP-1 was also found (adjusted OR: 2.28 [95% CI: 1.16-4.48]). Elevated levels of MCP-1 may decipher an etiologic immunologic dysfunction or play rather an indirect role in the pathophysiology of ASD. Further studies to confirm its role and to identify the potential pathways through which MCP-1 may contribute to the development of ASD are necessary.     

^99mTc—MIBI鼻咽癌阳性显像的探讨

目的用(~99m)Tc-MIBI来探索鼻咽癌的原发灶和转移灶的诊断.资料与方法 用(~99m)Tc-MIBI断层显像检测21例对照组和41例治疗前鼻咽癌病例,病灶的放射性摄取与头皮比较,由3名以上的医师在不知道任何临床情况下分别阅片.结果41例治疗前鼻咽癌病例中共有36例阳性.特异性为91%,灵敏度为88%.结论用(~99m)Tc-MIBI来探索鼻咽癌的原发灶和转移灶的诊断,是一种灵敏的,值得进一步探讨的影像学方法.     

5-aza-2-dC处理鼻咽癌细胞前后的差异蛋白质组学研究

目的：比较5-杂氮-2′-脱氧胞苷（5-aza-2-dC）处理鼻咽癌细胞前后蛋白质组的差异,为筛选鼻咽癌的甲基化失活基因提供依据。方法：用去甲基化药物5-aza-2-dC处理鼻咽癌细胞系5-8F细胞,应用双向凝胶电泳（2-DE）技术分离5-aza-2-dC处理与未处理5-8F细胞的蛋白质,PDQuest图像分析软件识别药物处理与未处理5-8F细胞的差异表达蛋白质点,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）鉴定差异表达的蛋白质。Western 印迹法检测差异蛋白质nm23-H1在药物处理与未处理5-8F细胞中的表达水平。结果：建立了5-aza-2-dC处理与未处理5-8F细胞蛋白质的2-DE图谱,识别了49个差异表达的蛋白质点,鉴定了33个差异表达的蛋白质,其中15个蛋白质在5-aza-2-dC处理5-8F后表达上调。Western 印迹分析证实了nm23-H1在药物处理与未处理5-8F细胞中的差异表达水平。结论：15个5-aza-2-dC处理后表达上调蛋白质的编码基因可能是5-8F细胞的甲基化沉默基因。     

鼻咽癌组织中人疱疹病毒6型感染及其临床意义

目的　探讨人疱疹病毒６ 型（ＨＨＶ６） 与鼻咽癌（ＮＰＣ） 发病的关系。方法　采用聚合酶链反应（ＰＣＲ） 和原位杂交同时检测正常鼻咽组织和ＮＰＣ 癌前鼻咽组织以及ＮＰＣ 组织中ＨＨＶ６ 和ＥＢＶＤＮＡ 的存在情况。采用免疫组化检测３６ 例ＮＰＣ 组织的ＥＢＶＬＭＰ１ 蛋白表达。结果　在４２ 例ＮＰＣ组织、２１ 例鼻咽癌前病变组织中,经ＰＣＲ检出ＨＨＶ６ ＤＮＡ,阳性率分别为３０－９％ （１３ 例） 和４－７ ％（１ 例） 。ＥＢＶＤＮＡ为９５－２％ （４０ 例） 和６６－６ ％ （１４ 例）。２７ 例正常鼻咽组织未检出ＨＨＶ６ ＤＮＡ,ＥＢＶＤＮＡ为２５－９％ （７ 例）。经ＩＳＨ,仅在１３ 例ＰＣＲＨＨＶ６ ＤＮＡ阳性的ＮＰＣ组织中检出１１ 例阳性,３６ 例ＮＰＣ组织、１０ 例鼻咽癌前病变组织ＩＳＨＥＢＶＤＮＡ 阳性。ＮＰＣ组织的ＥＢＶＬＭＰ１ 蛋白阳性率为４７－２ ％（１７３６）。结论　鼻咽癌组织中存在ＨＨＶ６ 感染,提示ＨＨＶ６ 感染与ＮＰＣ有关。ＨＨＶ６ 感染与ＥＢ病毒ＬＭＰ１ 蛋白表达上调呈正相关,提示在ＮＰＣ 的发生中ＨＨＶ６ 可能直接参与和（ 或） 通过上调ＥＢＶＬＭＰ１ 的表达而起一定作用     

两种验证工具对鼻咽癌调强验证结果对比分析

目的:对比分析两种不同的调强验证工具对鼻咽癌放疗计划的验证结果。方法:用MapCHECK和MatriXX对Pinnacle8.0m计划系统优化出的13例鼻咽癌放疗计划进行剂量验证。分别采用DTA和Gamma方法及各方法应用于不同阈值时验证工具的验证结果进行对比分析。其阈值有选用3%,3 mm,10%和3%,3 mm,5%。统计分析采用SPSS16.0软件包,选用配对t检验。结果:MapCHECK验证结果比MatriXX验证结果都较高,采用不同的比较方法和不同的比较阈值时MapCHECK和MatriXX结果比较都有统计学意义(P<0.05)。但是对于二者的Gamma方法选用3%,3 mm,5%阈值时结果无统计学意义(t=1.740,P=0.085)。结论:调强验证中采用不同的验证工具,评价方法,评价标准,相互之间没有可比性。因本质上的通过率差异可以是验证工具,评价方法,评价标准这三者中任意的一种或几种组合因素所造成的。     

改性载顺铂磁性纳米药物治疗鼻咽癌的体外实验*****

背景：近年来载抗癌药物磁性纳米微粒作为一种新型靶向给药系统,利用其高载药量、靶向定位输送、以及磁粒的热效应、可生物降解等优点,为高效、低毒副作用的化疗带来了新的希望。目的：观察顺铂耦合海藻酸钠改性磁性纳米球载体后对人鼻咽癌CNE2细胞的体外毒性效应。设计、时间及地点：体外对比观察实验,于2005-03在中山大学北校区药理实验室完成。材料：顺氯氨铂(CDDP)由山东齐鲁制药厂提供,海藻酸钠改性载顺铂四氧化三铁磁性纳米球(CDDP-SAMNP),粒径大小43~52 nm,可逆释放的CDDP量(或利用率)约65%。鼻咽癌CNE2细胞株由中山大学肿瘤医院细胞病理实验室提供。方法：实验分药物处理组及对照组,药物处理组分为CDDP组和CDDP-SAMNP组,CDDP和CDDP-SAMNP均用RPMI-1640培养液稀释,加药浓度按CDDP的含量计。对照组分别为RPMI-1640培养液组和单纯SAMNP组(加入四氧化三铁,磁核质量浓度为7 g/L,以培养液稀释)。主要观察指标：采用MTT法分别观察1.89~11.34 mg/L的CDDP及相应剂量的CDDP-SAMNP对鼻咽癌CNE2细胞作用24, 48 h后的杀伤率;并通过透射电镜观察CNE2对CDDP-SAMNP的摄取。结果：①单纯SAMNP对鼻咽癌CNE2细胞无杀伤作用,与培养液组相似(P > 0.05)。②随着CDDP和CDDP-SAMNP药物浓度的增加,药物对CNE2细胞的杀伤率呈明显的量效关系。同一药物相同浓度下,随着作用时间的延长,杀伤率提高,呈明显的时效关系。作用24 h,CDDP-SAMNP对鼻咽癌CNE2的杀伤率与CDDP相似(P > 0.05)。作用48 h,中低浓度(1.89~5.04 mg/L)时,CDDP-SAMNP的杀伤率低于CDDP(P < 0.05),当达到6.93 mg/L时,杀伤率接近同浓度的CDDP。③CNE2细胞能够摄取CDDP-SAMNP和SAMNP。结论：在高浓度下阴离子海藻酸钠改性载顺铂磁性纳米球对鼻咽癌CNE2细胞的体外毒性与同浓度单纯顺铂相近,杀伤作用来源于载体释放的顺铂。改性后顺铂的稳定性提高,药效没有降低。     

绿原酸调控巨噬细胞极化治疗溃疡性结肠炎的机制研究

[目的] 探讨绿原酸(chlorogenic acid，CGA)对葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium，DSS)诱导的溃疡性结肠炎(ulcerative colitis，UC)的治疗作用及分子机制。[方法] C57BL/6小鼠50只，用3%DSS腹腔注射7 d，建立UC动物模型并随机分为5组，除UC模型组外，其余4组分别给予柳氮磺胺吡啶(sulfasalazine，SZ)100 mg/kg·d和CGA 30、60、120 mg/kg·d灌胃10 d，另以C57BL/6小鼠10只设为正常对照组。检测小鼠疾病活动指数(disease activity index，DAI)；以苏木精-伊红(hematoxylin-eosin，HE)染色观察结肠组织病理变化；酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)检测结肠组织中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6，IL-6)、IL-10、IL-1β水平；定量实时聚合酶链式反应(quantitative real time-polymerase chain reaction，qRT-PCR)检测结肠组织中诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase，iNOS)、精氨酸酶-1(arginase-1，Arg-1)的mRNA表达；免疫印迹检测结肠组织小鼠无翅型乳腺肿瘤病毒整合位点家族成员5a(wingless type 5a，Wnt5a)、C1型尼曼-匹克蛋白(Nieman-Pick type C1，NPC1)的蛋白表达；流式细胞术检测结肠组织M1型及M2型巨噬细胞比例。[结果] 与正常对照组比较，UC模型组DAI评分显著增高，结肠组织出现明显炎症病理改变，M1型巨噬细胞比例，TNF-α、IL-6、IL-1β水平，iNOS mRNA表达，Wnt5a及NPC1蛋白表达均显著增高，M2型巨噬细胞比例、IL-10水平及Arg-1 mRNA表达均显著降低(P<0.01)。与UC模型组比较，CGA可显著降低小鼠DAI评分，减轻结肠组织炎症病理改变，降低结肠组织M1型巨噬细胞比例，TNF-α、IL-6、IL-1β水平，iNOS mRNA表达，以及Wnt5a和NPC1蛋白表达，增加M2型巨噬细胞比例、IL-10水平及Arg-1 mRNA表达(P<0.05，P<0.01)。[结论] CGA可通过减少巨噬细胞向M1型极化，从而减轻由DSS诱导的炎症反应以治疗UC，其机制与抑制Wnt5a/NPC1信号通路活化有关。