微小RNA在子宫内膜异位症中的研究进展

子宫内膜异位症（endometriosis,EMs）是一种育龄期女性常见的妇科疾病,其临床表现复杂多样,通常表现为疼痛、不孕和性交不适等症状。近年来EMs发病率呈明显上升趋势,给患病女性带来生理与心理痛苦的同时,也给社会带来了巨大的医疗和经济负担,但其发病机制尚未得到清晰阐述。目前大量研究表明一些具有重要功能的微小RNA（microRNA,miRNA）与EMs的发生关系密切。miRNA是一类长约22个碱基的内源性非编码RNA分子,可以在转录后调控靶基因,影响蛋白质表达,从而影响细胞活动。对miRNA调节异位子宫内膜细胞的功能,如细胞增殖、凋亡及细胞黏附转移、血管生成等方面的作用进行综述,以期为EMs的诊断、治疗和预后提供有效帮助。     

病毒miRNA研究新进展

MicmRNA（miRNA）是一类由多细胞真核生物编码的长度约为22个核苷酸的调控RNA分子,它们在许多重要细胞过程中参与转录后基因表达调控。某些病毒也能编码miRNA。目前发现的病毒miRNA已经超过200种,病毒利用这些miRNA可以调节细胞及其自身的基因表达。此文就编码miRNA的病毒,病毒miRNA的作用机制、生物学功能、保守性及其与疾病治疗的关系等内容进行综述。     

胰腺癌PANC1细胞microRNA-217靶基因ANLN的鉴定

目的 通过实验验证ANLN为microRNA-217(miR-217)的靶基因.方法 使用生物学软件预测miR-217调控的靶基因可能为ANLN.设计并合成mR-217结合的ANLN及突变型ANLN(mutANLN)序列,将其PCR扩增的片段插入表达质粒psiCHECK-2,构建重组质粒psiCHECK-2-ANLN及psiCHECK-2-mutANLN.采用脂质体法将2个重组质粒单独或分别与miR-217、miR-217 inhibitor及与人同源性远的miRNA序列(NC)、NC inhibitor共转染胰腺癌PANC1细胞,采用双荧光素酶报告系统检测荧光素酶活性,采用蛋白质印迹法检测ANLN蛋白的表达.结果 转染psiCHECK-2-ANLN、psiCHECK-2-ANLN+miR-217、psiCHECK-2-ANLN+miR-217 inhibitor、psiCHECK-2-ANLN+NC、psiCHECK-2-ANLN+ NC inhibitor各组间的荧光素酶活性分别为2.221±0.188、0.769±0.061、3.764±0.371、2.265±0.201、2.242 ±0.018,差异有统计学意义(F =77.405,P＜0.01),但psiCHECK-2-ANLN组、psiCHECK-2-ANLN+ NC组及psiCHECK-2-ANLN+ NC inhibitor组两两比较差异无统计学意义,而psiCHECK-2-ANLN+ miR-217组的荧光素酶活性较这3组明显下降,psiCHECK-2-ANLN+miR-217inhibitor组活性较其他4组明显升高(P值均＜0.01).转染psiCHECK-2-mutANLN各组间荧光素酶活性差异无统计学意义(P=0.053).psiCHECK-2-ANLN+ miR-217共转染组PANC1细胞的ANLN蛋白表达水平较单纯转染psiCHECK4-ANLN组细胞的ANLN蛋白表达明显下调.结论 在胰腺癌中,ANLN可能是miR-217的直接靶基因.     

MicroRNAs and liver cancer associated with iron overload: Therapeutic targets unravelled

Primary liver cancer is a global disease that is on the increase.Hepatocellular carcinoma(HCC)accounts for most primary liver cancers and has a notably low survival rate,largely attributable to late diagnosis,resistance to treatment,tumour recurrence and metastasis.MicroRNAs(miRNAs/miRs)are regulatory RNAs that modulate protein synthesis.miRNAs are involved in several biological and pathological processes including the development and progression of HCC.Given the poor outcomes with current HCC treatments,miRNAs represent an important new target for therapeutic intervention.Several studies have demonstrated their role in HCC development and progression.While many risk factors underlie the development of HCC,one process commonly altered is iron homeostasis.Iron overload occurs in several liver diseases associated with the development of HCC including Hepatitis C infection and the importance of miRNAs in iron homeostasis and hepatic iron overload is well characterised.Aberrant miRNA expression in hepatic fibrosis and injury response have been reported,as have dysregulated miRNA expression patterns affecting cell cycle progression,evasion of apoptosis,invasion and metastasis.In2009,miR-26a delivery was shown to prevent HCC progression,highlighting its therapeutic potential.Several studies have since investigated the clinical potential of other miRNAs with one drug,Miravirsen,currently in phaseⅡclinical trials.miRNAs also have potential as biomarkers for the diagnosis of HCC and to evaluate treatment efficacy.Ongoing studies and clinical trials suggest miRNA-based treatments and diagnostic methods will have novel clinical applications for HCC in the coming years,yielding improved HCC survival rates and patient outcomes.     

144例维吾尔族与汉族女性子宫内膜癌微小RNA表达特点及临床意义

目的 分析144例女性子宫内膜癌微小RNA(microRNA,miRNA)的表达特点,对比其在维吾尔族与汉族女性子宫内膜癌中的表达差异及其与临床病理特点的内在关联性,阐述临床意义。方法 144例维吾尔族与汉族女性(包括62例维吾尔族和82例汉族),采用Taqman低密度芯片对比两者子宫内膜癌miRNA的表达特点,选取5种miRNA,采用实时定量PCR法验证并分析这些miRNA的表达特点。结果 miRNA表达谱分析显示,Ⅱ型癌突出的特点是许多miRNA在一个民族中表达升高或降低,而在另一个民族中不表达或变化轻微。144例女性的子宫内膜癌miR-141、miR-200a、miR-205表达均升高,维吾尔族女性Ⅰ型癌miR-141/200a表达升高的肿瘤更具侵袭性,而汉族女性Ⅰ型癌的特点相反,miR-200a表达升高的肿瘤侵袭性呈减弱趋势,但Ⅱ型癌miR-200a表达升高的肿瘤趋向更具侵袭性。miR-145、miR-143在维吾尔族与汉族女性子宫内膜癌中的表达特点相反,在维吾尔族表达升高,在汉族显著降低(P<0.05)。维吾尔族中Ⅱ型癌miR-145、miR-143升高更明显,侵袭性相对弱的肿瘤的miR-145表达水平更高,肌层浸润深度<1/2组差异有统计学意义(P=0.042)。汉族女性Ⅰ/Ⅱ型癌中miR-145和miR-143的表达均降低,侵袭性强的Ⅰ型癌中两者降低得更明显,但差异无统计学意义;Ⅱ型癌不具此特点。结论 维吾尔族与汉族女性子宫内膜癌miRNA表达存在一定差异性,miR-141/200a/205在子宫内膜癌中普遍表达升高,但miR-141/200a在维吾尔族与汉族Ⅰ/Ⅱ型子宫内膜癌中扮演的角色可能不尽相同。miR-145/143在维吾尔族与汉族女性子宫内膜癌中的表达特点相反,但可能均发挥抑癌作用。     

血清或血浆MicroRNAs——一种癌症诊断的潜在生物标志物

MicroRNAs(miRNAs)是一类小片段非编码RNA调控因子,广泛存在于各种真核细胞中,参与调节细胞生长发育、分化、凋亡等生命进程。miRNAs以癌基因和抑癌基因方式在肿瘤的发生、发展中发挥重要作用。最近,有证据显示miRNA稳定地存在于人类的血清/血浆中,大量的实验开始探究循环性miRNAs作为一种新的、非侵入性的生物标志物的机制。因此,血清/血浆中的miRNAs有望为肿瘤的诊断提供临床依据。     

MiR-590-3p在胰腺癌干细胞中的表达

目的 应用无血清培养基分离胰腺癌干细胞,检测其miR-590-3p的表达。方法 运用无血清培养基克隆培养ASPC-1、PANC1细胞,检测其单克隆形成、分化及细胞周期、半数抑制浓度(IC50)和表面标记物CD24+、CD44+表达。实时定量PCR法检测细胞miR-590-3p的表达。结果 经无血清培养基培养,(0.94±0.53)％的ASPC-1细胞和(0.57±0.12)％的PANC1细胞能存活,呈克隆球样悬浮生长,并可以在体外连续传代。加入血清后细胞球又重新贴壁生长。ASPC-1细胞球G0/G1期比例和CD24+、C44+、CD24+ CD44+的细胞比例及IC50分别为(75.3±5.4)％、0.96％～2.01％、27.52％～34.47％、0.35％ ～0.44％和(224.37±5.71) μg/ml,均显著高于亲本细胞的(43.7±3.8)％、0.38％～0.42％、17.65％ ～ 18.25％、0.05％～ 0.08％、(11.43±2.10) μg/ml(P值均＜0.05)。PANC1细胞球G0/G1期比例和CD24+、CD44+、CD24 +CD44+的细胞比例及IC50分别为(80.1±4.7)％、5.31％ ～9.84％、72.05％ ～93.06％、4.91％ ～5.21％、(296.58±4.27) μg/ml,均显著高于亲本细胞的(46.1±5.3)％、4.09％～4.97％、47.71％～55.66％、1.48％ ～2.63％、(26.17±3.81) μg/ml(P值均＜0.05)。ASPC-1、PANC1细胞球miR-590-3p表达分别是亲本细胞的4.67和4.52倍。结论 应用无血清培养基可以从ASPC-1、PANC1细胞系中分离出具有干细胞特性的胰腺癌细胞球,其miR-590-3p表达上调,该基因可能是胰腺癌干细胞特性维持的关键基因。     

微小核糖核酸-204和211在人胚胎干细胞向视网膜色素上皮细胞分化过程的变化

目的 观察人胚胎干细胞（hESC）向视网膜色素上皮（RPE）细胞诱导分化过程中微小核糖核酸（miRNA）-204和211的变化特征。方法 采用自然分化法诱导hESC向RPE细胞分化,细胞鉴定。按细胞诱导分化时间秩序,分为hESC组、含色素细胞组、hESC源性RPE细胞组和原代培养的人胎RPE（hfRPE）细胞组。行miRNA基因表达谱芯片分析、miRNA-204和211实时荧光逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测。 结果 miRNA芯片分析结果显示,随细胞诱导分化过程, miRNA-204持续上调。其中,含色素细胞组是hESC组的5.026倍,hESC 源性RPE细胞组是含色素细胞组的3.337倍;hfRPE细胞组是hESC源性RPE细胞的13.574倍。miRNA-211在细胞诱导分化过程中上调不明显,但从hESC源性RPE细胞到hfRPE细胞,上调倍数为44.333倍,是miRNA表达谱中差异最大的miRNA。RT-PCR检测结果显示,hESC组、含色素细胞组、hESC源性RPE细胞组、hfRPE细胞组miR-204相对表达量分别为91.81±4.43、2 263.09±206.39、5 996.80±235.42、171 676.45±999.82,差异有统计学意义（t=18.22、20.66、279.38,P＜0.001）;miRNA-211相对表达量分别为2.23±0.31、129.33±3.75、125.76±4.78、16 682.00±352.97。含色素细胞组和hESC细胞组、hfRPE细胞组和hESC源性RPE细胞组miR-211相对表达量比较,差异均有统计学意义（t=58.58、81.24,P＜0.001）。结论 miRNA-204和211在hESC向RPE细胞诱导分化过程中持续单一变化。     

MicroRNAs的表观遗传学调控机制及其在肝癌中的表达特征

MicroRNAs（miRNAs）是一类广泛存在于动、植物中的内源性非编码小RNA,通过与靶基因mRNA 3′端非翻译区互补结合调控编码基因的表达。miRNAs具有调控细胞增殖、分化和凋亡的作用,与肿瘤的发生有密切关系。表观遗传学调控对miRNAs的转录非常重要。肝细胞癌中miRNAs的表达具有一定特点。