Genetic basis of neonatal methicillin-resistant Staphylococcus aureus in Japan

Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) is still one of major problems of drug-resistant microorganisms and healthcare-acquired infections. Methicillin-resistant Staphylococcus aureus is highly prevalent in patients in neonatal intensive care units (NICU) in Japan. The most predominant MRSA in NICU is multidrug resistant and produces superantigenic exotoxin, toxic shock syndrome toxin-1 (TSST-1) and staphylococcal enterotoxin C (SEC). These predominant MRSA strains belong to coagulase type II, SCCmec type II, mecA-Tn554 polymorph type I-A and show closely related pulse field gel electrophoresis types. The dissemination of MRSA is wide, and there is a pandemic distribution of a single MRSA clone in the NICU of Japan. Since 1992, the nationwide spread of this clone has also led to the development of a new neonatal disease known as neonatal toxic shock-like exanthematous disease (NTED), which is caused by overactivation of vbeta2+ T cells induced by TSST-1. The spread of MRSA in NICU in Japan has been attributed to overcrowding, high rates of extremely low birthweight babies, understaffing, low control measures of infection and overuse of antibiotics. The environment of NICU and infection control intervention should be improved and a new strategy for control like vaccination or probiotics is required.     

Molekulare und phänotypische Charakterisierung von Methicillin-resistenten Staphylococcus-aureus-Isolaten Untersuchungen an einer Unfallchirurgischen Klinik von 1994–1997

Methicillin resistant Staphylococcus aureus-strains, isolated from 1994 to 1997 from patients of the traumatic surgery hospital Tübingen, were compared using lysotyping and pulsed-field gel electrophoresis. Both typing methods detected two clones causing an outbreak 1994 in 6 patients and a third endemic clone of MRSA, which was isolated from 5 patients (1995), 4 patients (1996), and 6 patients (1997). Additionally other MRSA-types were found in 6 cases of which transmissions occurred in up to three patients. An epidemiological connection to MRSA isolated from patients of the university hospital of Tübingen was made. Possible consequences for patient management and antibiotic strategies in MRSA-infections were discussed.     

黄连与黄芩、甘草配伍前后对金黄色葡萄球菌生长抑制作用的观察

以ＭＩＣ相对值为指标，观察黄连、黄芩、甘草煎液单味或不同比例配伍后对金黄色葡萄球菌生长的抑制作用。结果显示：黄连与黄芩配伍，黄芩的抑菌作用有所降低，但黄连则未见降低；黄芩多于黄连时，黄连的抑菌作用似有增强。黄连与甘草配伍，无论比例如何，配伍后的抑菌作用均呈降低趋势。当三药同时配伍时，黄连、甘草的抑菌作用不变，或反增强，只有黄芩的抑菌作用有减弱趋势。黄连与黄芩、甘草两两配伍，单独使用时，其抑菌作用似不如组成三药配伍。其机制值得进一步研究。     

金黄色葡萄球菌norA基因的研究

目的 研究norA基因介导的金葡菌对氟喹诺酮类药物的耐药机制。方法PCR法制备DIG-norA基因探针；点杂交及狭线杂交检测细菌nor4基因及其转录水平。结果所有实验菌株均检测到norA基因；诱导耐药菌SA2-16的norA基因转录水平明显高于其亲代株，临床分离耐药菌norA基因转录水平略高于敏感菌，但统计学分析无显著性差异，细菌在环丙沙星1／10MIC浓度中生长，未见norA基因转录增加。结论 norA基因可能为金葡菌的结构基因，诱导耐药菌药物泵出增加的原因在于norA基因转录的增加，norA基因介导的耐药在不同的耐药菌株中所起的作用并不相同。     

金黄色葡萄球菌NorA蛋白免疫检测方法的建立

目的建立金黄色葡萄球菌耐药转运蛋白NorA免疫检测方法。方法利用琼脂稀释法测定诺氟沙星（NFLX）对临床分离的6株金葡菌和标准菌株ATCC25923的MIC。对norA基因进行克隆、表达，提取表达产物包涵体，并进行了纯化。将纯化的表达蛋白作为免疫原免疫家兔，获取NorA蛋白的抗体血清。利用制得的抗体通过Western blotting检测临床分离的6株金葡菌的NorA蛋白表达水平。结果氟喹诺酮类药物耐药水平较高的临床分离金葡菌菌株的NorA蛋白表达水平一般较高，敏感菌株的耐药水平较低且接近。结论免疫检测方法可用于检测金葡萄菌耐药转运蛋白NorA的表达水平。     

ZTP-120A1型消毒柜杀菌效果观察

[目的]了解ZTP120A1型消毒柜的实验室消毒效果。[方法]参考卫生部2002年第4版《消毒技术规范》和国家标准《食具消毒柜安全和卫生要求》(GB17988-2000)进行了温度测定试验、细菌繁殖体杀灭试验和乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的抗原性破坏试验。[结果]ZTP120A1型消毒柜在满载状态下,高温消毒运行1个自动程序,柜内温度≥120℃,可维持15min以上;对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌杀灭率均达100.00%;可破坏乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的抗原性;对餐具上的自然菌平均杀灭率为99.99%,且未检出致病菌。[结论]ZTP120A1型消毒柜具有较强的杀菌能力。     

金黄色葡萄球菌DNA体内抗肿瘤研究

目的 探讨金黄色葡萄球菌染色体DNA(S．aureus DNA)体内抗肿瘤免疫的效果及其免疫机制。方法 纯化提取金黄色葡萄球菌染色体DNA进行抗肿瘤及免疫学指标的测定。结果 S．aureus DNA腹腔注射给药可抑制肿瘤生长，提高荷瘤裸鼠血清内IFN-γ含量，调节其TNF-α的水平。结论 S．aureus DNA具有抗肿瘤免疫特性，为微生物DNA制剂开发应用于抗肿瘤治疗提供了科学依据。     

医源性表皮葡萄球菌ica操纵子转录水平对生物膜表型的影响

目的探讨表皮葡萄球菌临床株中ica操纵子转录水平对生物膜表型差异的影响。方法采用微量板半定量法检测细菌生物膜表型,用Southern杂交和聚合酶链反应检测icaA基因及ica操纵子中是否存在插入序列,用RNA狭缝杂交和逆转录实时定量聚合酶链反应检测icaA基因和icaR基因的转录水平;采用χ2检验分析icaA基因与生物膜表型的相关性,采用单因素方差检验分析转录水平的差异。结果101株临床分离株中,32.7%(33/101株)能形成生物膜,其中22株icaA基因阳性;67.3%(68/101株)无生物膜形成,其中15株icaA基因阳性。15株icaA /生物膜表型-分离株中,ica操纵子各基因中均不存在插入序列,icaA基因的转录水平明显低于生物膜阳性的ATCC35984株(P<0.05),其中2株icaR基因的转录水平高于ATCC35984株(P<0.01)。结论表皮葡萄球菌临床株中ica操纵子的存在与生物膜表型相关(χ2=19.045,P<0.01);ica操纵子的低转录是icaA /生物膜表型-临床株不形成生物膜的主要原因。     

臭氧水消毒器对微生物杀灭效果的试验观察

目的：观察臭氧水消毒器产生臭氧水的杀菌效果。方法：采用悬液定量和载体定量杀菌试验进行检测。结果：该机产生含臭氧4．20mg／L的水溶液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌作用5min的杀灭率均为100％；当菌液中含有10％蛋白胨时，对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌作用5min的杀灭率分别为55．67％、59．48％和37．44％。用消毒液流动浸泡载体定量杀菌试验，含臭氧4．20mg／L的水溶液作用30min对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的平均杀灭率分别为99．95％、99．99％和96．94％。结论：该臭氧水消毒器产生的臭氧水具有一定消毒效果。     

不同病区和标本来源金黄色葡萄球菌感染的耐药性监测

目的：了解不同病区和标本中金黄色葡萄球菌的感染情况及其耐药性变化特别是ORSA的耐药情况。方法：应用MicroScan AutoScan-4专用PC12鉴定板检测210例金黄色葡萄球菌对18种的抗生素的敏感程度，根据仪器专家系统自动分析病原菌对抗生素的MIC浓度和β内酰胺酶阳性结果。结果：所有金黄色葡萄球菌菌株β内酰胺酶阳性，OR-SA菌株以白带最高（85．7％）、其次为精液（76．4％）、尿液（55．0％），伤口分泌物（31．2％）和脓液（5．3％）最低，门诊（标本主要为白带、精液等）、一般住院病人、ICU中ORSA菌株分离率分别为79．6、41．9、25．0％；ORSA菌株对氨苄西林、青霉素G耐药率99．2％，苯唑西林敏感金黄色葡萄球菌（OSSA）对氨苄西林、青霉素G耐药率也超过83．0％；ORSA菌株对诺氟沙星、环丙沙星、红霉素、克林霉素、庆大霉素等多种抗生素的耐药性高于OSSA菌株（P〈0．001），并有耐万古霉素菌株的出现；不同病区来源的金黄色葡萄球菌对环丙沙星、红霉素、诺氟沙星、四环素、苯唑西林耐药率高低出现门诊、一般住院病人、ICU依次递减的现象（P〈0．05）；来自精液、痰液标本的金黄色葡萄球菌对环丙沙星、庆大霉素、苯唑西林的耐药率和白带标本中金黄色葡萄球菌对苯唑西林的耐药率明显高于脓液（P〈0．05）。结论：来自社区感染金黄色葡萄球菌高ORSA分离率与标本来源有关，不同标本之间抗生素的敏感性存在差异性，ORSA与OSSA对抗生素耐药性不同。