复方片仔癀肝宝对酒精诱导的慢性肝损伤氧化应激的保护作用研究

目的:探讨复方片仔癀肝宝对酒精性肝病(Aleoholie Liver Disease,ALD)模型大鼠氧化应激的保护作用。方法:60只SPF级SD大鼠,随机分为正常对照组、模型组、阳性药对照组及肝宝低、中、高剂量组,每组10只。除正常对照组外其余各组用酒精联合高脂饲料喂养2周,造ALD模型,连续给药4周后取材。全自动生化仪检测血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)的含量变化;检测肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的表达;HE染色,观察肝组织病理变化。结果 :模型组血清中ALT、AST、ALP、LDH的活性较正常对照组均有明显的上升,且肝组织中MDA水平明显上升,SOD、GSH-Px水平明显下降(P0.01)。与模型组相比,肝宝各组ALT、AST、ALP、LDH的活性及MDA水平明显降低,而SOD、GSH-Px水平明显上升(P0.05)。HE染色结果显示复方片仔癀肝宝不同剂量组对肝组织脂肪变性、肝内脂类聚集有明显的改善作用,并且存在剂量效应关系。结论:复方片仔癀肝宝能显著减轻酒精和高脂诱导的肝损伤,其机制可能与提高肝组织的抗氧化能力有关。     

基于生信分析和网络药理学的片仔癀治疗肝细胞癌的炎症相关分子靶点的鉴定和预后模型构建

目的 分析片仔癀治疗肝细胞癌的炎症相关分子靶点，对其机制进行初步探索。方法 通过TCMSP和BATMAN数据库获取片仔癀的成分和靶点。通过Genecards、OMIM和TCGA数据库获取肝细胞癌的疾病靶点。对化合物靶点和疾病靶点取交集，得到片仔癀治疗肝细胞癌的靶点。从GSEA数据库获取炎症通路的相关基因，然后对片仔癀治疗肝细胞癌的靶点和炎症相关基因进行相关性分析，筛选出炎症相关靶点，通过GO和KEGG富集分析探索其机制。然后进行单因素cox分析和LASSO回归构建相关预后模型。通过蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction，PPI)网络筛选出核心的10个靶点。将模型基因和核心靶点进行交集。通过药物-化合物-靶点网络筛选出核心的化合物。将核心的化合物和靶点进行分子对接验证。构建列线图用以评估患者的预后情况。结果 得到片仔癀靶点162个，肝细胞癌靶点522个，片仔癀治疗肝细胞癌靶点20个，炎症相关靶点16个。GO和KEGG富集分析显示其发挥作用主要通过单加氧酶活力功能、氧化还原酶活性等生物学功能，化学致癌-受体激活等通路发挥作用。预后模型ROC曲线计算AUC分别为1年0.780，3年0.688，5年0.642，说明模型具有可靠性。预后模型与PPI核心靶点相交得到5个靶点：PON1、IGF2、NQO1、CCNB1和IGFBP3。列线图使用CCNB1、NQO1和T分期进行构建，其c-index为0.726，说明了模型的可靠性。药物-化合物-靶点网络提示槲皮素是核心的化合物，并且靶向上述2个基因。结论 片仔癀治疗肝细胞癌主要通过槲皮素靶向CCNB1和NQO1发挥抗炎作用，其预后模型可用于患者的生存预测。     

六味地黄汤对PMOP模型大鼠股骨MAPK通路动态干预研究

目的 研究六味地黄汤对PMOP模型大鼠股骨 MAPK 信号通路中p38、ERK1/2 磷酸化蛋白及mRNA表达的动态干预作用及其机理。方法 将6~8 月龄未孕雌性 SD 大鼠（SPF 级）编号、称重后随机分为 5 组，除空白组外，其余各组均采用去卵巢法造模。造模后第5天开始，连续给药 90 d。分别在术后 30、60、90 d，双能 X 线骨密度仪检测各组大鼠股骨骨密度；蛋白免疫印迹法（ Western blot ）法检测各组大鼠股骨中 p-p38及p-ERK1/2 表达；实时荧光定量PCR（ RT-qPCR ）法检测各组大鼠股骨中 p38、ERK1/2 mRNA 表达。结果 与空白组比较，模型组大鼠的股骨骨密度值在60、90d时下降（P<0.05）；与模型组比较，六（酒）可上调PMOP术后 30、60、90 d模型大鼠股骨中 p-p38、p-ERK1/2及ERK1/2 mRNA表达（P<0.05、P＜0.01）以及术后 60、90d 模型大鼠股骨p38 mRNA表达（P＜0.01），而六（生）仅能调整术后 90 d 模型大鼠股骨中p-p38及p-ERK1/2及 mRNA 表达（P<0.05、P＜0.01）及术后 30、60 d 模型大鼠股骨中 p-ERK1/2 表达（P＜0.05）。结论 六（酒）、六（生）均可干预绝经后骨质疏松症，其机理可能与该汤通过调控MAPK通路中 p38 及 ERK1/2 两个蛋白，并使其发生磷酸化修饰，激活成骨相关因子，升高BMD，改善PMOP有关；其中六（酒）的干预作用从绝经早期、中期开始。