牵张力对大鼠髁突软骨细胞增殖及相关因子表达的影响

目的:观察牵张力对大鼠髁突软骨细胞增殖、炎性因子及Hedgehog通路基因的表达影响,探讨牵张力对软骨细胞的调控。方法:体外培养软骨细胞并鉴定。用Flexcell 4000TM加力板对细胞施加0.5 Hz,0%、3%和15%的牵张应变,作用4 h后检测细胞增殖情况,对比PCNA、Caspase-3、COL II、IL-1β、TNF-α及Hedgehog通路基因Ihh、Ptc和Smo的表达变化。结果:与对照组相比,3%组细胞增殖速度增加,PCNA、COLII、Ihh、Ptc和Smo的mRNA表达增加,15%组Caspase-3、IL-1β和TNF-α表达增加,而PCNA、Smo表达降低。与3%组相比,15%组细胞增殖速度降低,PCNA、COL II、Ihh和Smo表达降低,而Caspase-3、IL-1β表达增高。结论:不同强度牵张力对大鼠髁突软骨细胞增殖活性及炎性因子表达作用不同。Hedgehog通路对牵张力敏感,可能参与了力学刺激对软骨细胞的调控。     

Indian Hedgehog信号通路在软骨细胞成熟及转分化过程中的调控作用

目的 探究Indian Hedgehog（IHH）信号通路对软骨内成骨过程中软骨细胞成熟以及转分化的影响。方法 取10日龄野生型小鼠的胫骨组织,采用原位杂交和免疫组织化学染色检测生长板区域IHH信号通路相关分子Ihh、Ptch1和Gli1的表达水平。构建肥大软骨细胞特异性Ihh基因敲除小鼠（Col10a1^Cre/+; Ihh^null/C）,并采用影像学检查和阿利新蓝染色评估该小鼠的骨骼发育状况。构建肥大软骨细胞IHH信号通路持续激活小鼠（Col10a1^Cre/+; R26Smo^M2/M2和 Col10a1^Cre/+; Ptch1^LacZ/C）,采用HE染色、原位杂交和TUNEL染色分别对受精15.5天胎鼠胫骨组织形态结构、Ihh（肥大软骨细胞分子标志物）和Col1a1（成骨细胞分子标志物）以及肥大软骨细胞凋亡水平进行检测;另外应用HE染色对10日龄小鼠的胫骨组织进行组织学分析。结果 肥大软骨细胞合成分泌IHH,但不表达Ptch1和Gli1。抑制肥大软骨细胞合成IHH蛋白会导致出生后小鼠出现侏儒症;X线检查结果显示小鼠出现严重的骨骼发育不良,包括胸廓狭小、球形头骨以及椎骨发育异常等表现。持续启动IHH信号通路时,胚胎早期软骨细胞成熟分化过程虽未见异常,但是出生后小鼠的骨小梁、骨内膜以及皮质骨等结构均出现一定的异常表现。结论 IHH信号通路虽然不参与肥大软骨细胞的终末分化过程,但在软骨细胞转分化的过程中起到了重要的调控作用。     

Stage-specific regulation of oligodendrocyte development by Hedgehog signaling in the spinal cord

Elucidation of signaling pathways that control oligodendrocyte (OL) development is a prerequisite for developing novel strategies for myelin repair in neurological diseases. Despite the extensive work outlining the importance of Hedgehog (Hh) signaling in the commitment and generation of OL progenitor cells (OPCs), there are conflicting reports on the role of Hh signaling in regulating OL differentiation and maturation. In the present study, we systematically investigated OPC specification and differentiation in genetically modified mouse models of Smoothened (Smo), an essential component of the Hh signaling pathway in vertebrates. Through conditional gain-of-function strategy, we demonstrated that hyperactivation of Smo in neural progenitors induced transient ectopic OPC generation and precocious OL differentiation accompanied by the co-induction of Olig2 and Nkx2.2. After the commitment of OL lineage, Smo activity is not required for OL differentiation, and sustained expression of Smo in OPCs stimulated cell proliferation but inhibited terminal differentiation. These findings have uncovered the stage-specific regulation of OL development by Smo-mediated Hh signaling, providing novel insights into the molecular regulation of OL differentiation and myelin repair.     

傣药咪多领(云南琵琶甲)对增生性瘢痕中表皮干细胞干性及Hedgehog信号通路的影响

目的 探讨傣药咪多领(云南琵琶甲)对增生性瘢痕中表皮干细胞干性及Hedge-hog信号通路的影响.方法 构建新西兰大耳兔增生性瘢痕模型,并分离增生性瘢痕组织中表皮干细胞.将动物随机分为对照组、模型组、阳性对照组(PC组,用复方肝素钠尿囊素凝胶干预)及傣药咪多领0.667、1.334、2.668 g/kg组;表皮干细胞分...     

局灶性脑缺血大鼠纹状体区域Shh信号通路成分的表达变化及对髓鞘修复的影响

目的检测Sonic Hedgehog(Shh)信号通路及其转录因子Gli1在局灶性脑缺血后不同时间点的表达变化,探讨该通路对脑缺血后髓鞘再生的影响。方法线栓法建立大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,使用免疫组化和RT-PCR的方法观察脑缺血后1 d,3 d,7 d和14 d Shh,Gli1的表达变化。碱性髓鞘蛋白(myelin basic protein,MBP)是髓鞘的组成成分,用作髓鞘的标志物,观察脑缺血后上述各时间点MBP的表达变化。结果正常大鼠Shh和Gli1广泛分布于脑白质和灰质,如皮质,胼胝体和纹状体等区域。Shh和Gli1的表达在脑缺血后3 d~14 d呈逐渐上升趋势。MBP的表达在脑缺血后1 d~28 d逐渐下降。结论脑缺血性损伤可激活Shh信号通路,激活的Shh可能通过调控细胞的增殖参与神经修复,针对Shh的表达量进行干预治疗将为脱髓鞘疾病的治疗提供理论依据。     

Ptch和Smo在舌鳞状细胞癌Tca8113细胞中的表达及其意义

目的:研究Hedgehog(Hh)信号通路相关因子Ptch和Smo在舌鳞状细胞癌Tca8113细胞株中的表达及其意义。方法:Hh信号通路抑制剂Cyclopamine处理Tca8113细胞后,采用MTT实验检测细胞增殖抑制率,再利用RT-PCR法和Western-Blot方法检测 Ptch和Smo的mRNA和蛋白表达情况。结果:Cyclopamine对Tca8113细胞增殖具有抑制作用。加药后的不同时间段中,显示Ptch、Smo的mRNA和蛋白在Cyclopamine药物组中的表达低于对照组。Smo的mRNA和蛋白分别在加药后24 h、72 h中的表达随着药物浓度增高而降低。结论:Cyclopamine可以抑制Tca8113细胞的生长,降低Smo mRNA和蛋白的表达,Hh信号通路可能在舌癌的发生、发展中起重要作用。[关键词] Hh信号通路 Tca8113细胞 Cyclopamine Ptch Smo     

Hedgehog信号通路在前列腺癌中的研究进展

Hedgehog信号通路与哺乳动物的胚胎发育、组织发生以及肿瘤形成等有着密切的关系,在机体发育过程中调节细胞的增殖与分化.研究证实其在晚期前列腺癌中起着重要作用.在前列腺肿瘤异种移植动物模型中,将Hedgehog信号通路阻断后可以使瘤体变小.因此,靶向抑制Hedgehog信号通路可能对前列腺癌的治疗非常有效.