依托咪酯对神经胶质瘤细胞缝隙连接通讯的影响

背景与目的：细胞缝隙连接(gap junction,GJ)通讯能增强放疗或化疗药物对肿瘤细胞的细胞毒性作用。以往研究发现部分麻醉药物能够改变GJ功能从而影响肿瘤细胞对放疗的敏感性。该研究拟观察依托咪酯对神经胶质瘤细胞由缝隙连接蛋白Cx43组成的缝隙连接功能的影响,为麻醉药对化疗敏感性影响的机制研究提供线索。方法：采用磺酰罗丹明B法观察依托咪酯对神经胶质瘤细胞的抑制作用;细胞接种荧光法观察依托咪酯对神经胶质瘤细胞GJ功能的影响。结果：0.1、0.5、1和5μmol/L依托咪酯在作用4 h时间内均对细胞生长无抑制作用,将不影响细胞缝隙的数量;取药物浓度接近血药浓度的依托咪酯作用细胞4 h,与对照组相比,0.1μmol/L依托咪酯作用细胞4 h后,神经胶质瘤细胞GJ通讯的荧光传递功能无明显变化;而0.5和1μmol/L依托咪酯作用细胞4 h后,神经胶质瘤细胞的荧光传递功能明显减弱。结论：依托咪酯能抑制神经胶质瘤细胞Cx43组成的GJ功能。     

VEGF反义寡核苷酸抑制大鼠胶质瘤生长的时间与剂量的效应关系

目的在大鼠脑内原位注射反义寡核苷酸观察胶质瘤的生长抑制情况的时间与剂量的效应关系。方法所有大鼠均在立体定向导引下右尾状核区接种1×106C6胶质瘤细胞。不同时间和剂量VEGF反义寡核苷酸均在立体定向导引下原穿刺靶点注射。其中实验Ⅰ组在接种细胞的同时原位注射1000μmol/L的VEGF反义寡核苷酸,而实验Ⅱ组则同时注射2000μmol/L的VEGF反义寡核苷酸。对照Ⅰ组为对照。实验Ⅲ和Ⅳ组在细胞接种后的1和2周各原位注射1次,共2次,每次实验Ⅲ组为1000μmol/L、实验Ⅳ组为2000μmol/L的VEGF反义寡苷核酸。对照Ⅱ组为对照。实验V组仅在接种后2周注射1次2000μmol/L的VEGF反义寡核苷酸,并设对照Ⅲ组为对照。实验3周时处死所有的大鼠,解剖出全脑标本,观察肿瘤的生长情况,测量肿瘤大小。结果实验Ⅰ组的抑瘤率为94.5％,实验Ⅱ组的抑瘤率为100％。实验Ⅲ组的抑瘤率为91.5％,实验Ⅳ组为100％,实验Ⅴ组抑瘤率为87.8％。实验组和对照组的肿瘤体积比较有非常显著的差异。结论 原位应用VEGF反义寡核苷酸能取得很好的抗血管生成的治疗效果,抑瘤效果有明显的浓度依赖性。原位早期使用足量反义核酸能取得更好的效果。     

HEF1对神经胶质瘤细胞U251的增殖﹑凋亡、侵袭和迁移的研究

目的：探讨HEF1对神经胶质瘤细胞U251增殖、凋亡、侵袭和迁移影响情况。方法通过RT-PCR、Western Blot检测脑组织正常标本与胶质瘤细胞U251中HEF1的表达水平,化学合成HEF1基因小干扰RNA（siRNA）下调其基因表达,检测siRNA对U251细胞的生物学行为的影响。MTT法、Transwell、Hochest染色分别检测细胞的增殖、侵袭、迁移、凋亡。结果HEF1基因在正常脑组织标本中的表达水平明显低于胶质瘤细胞。与对照组相比,干扰HEF1的表达,神经胶质瘤细胞U251增殖、侵袭和迁移能力受到显著抑制,细胞凋亡明显增强。结论HEF1促进神经胶质瘤恶性增殖及侵袭,抑制细胞凋亡,有可能成为分子治疗有效靶点。     

脑胶质瘤细胞SHG44与U87-MG辐射敏感性差异及其机制初步研究

目的本实验通过研究脑胶质瘤细胞SHG44与U87-MG的辐射敏感性及COX-2 mRNA表达水平差异,初步探讨胶质瘤细胞辐射敏感性差异的可能机制,为临床有效治疗胶质瘤提供实验依据。方法细胞克隆法检测不同60Co-γ射线照射剂量下细胞克隆存活率;RT-PCR法检测两种细胞COX-2 mRNA表达水平。结果实验表明两种胶质瘤细胞的辐射敏感性存在差异,U87-MG的辐射敏感性高于SHG44细胞,其差异具有统计学意义(P<0.05);两种细胞的COX-2 mRNA表达水平不同,U87-MG细胞COX-2 mRNA表达水平高于SHG44细胞,其差异具有统计学意义(P<0.01)。结论本实验研究认为脑胶质瘤U87-MG的辐射敏感感性高于SHG44细胞,其机制与其COX-2 mRNA表达水平密切相关。     

超选择性颅内动脉灌注ACNU、VM-26治疗丘脑、脑干胶质瘤的临床疗效观察

目的 研究丘脑及脑干等不适于手术切除治疗的脑胶质瘤超选择性颅内动脉灌注 ACNU、VM-26的治疗效果及相关问题.方法 治疗组选择位于丘脑及脑干的脑胶质瘤 50例,肿瘤同侧颈内动脉及椎动脉ACNU、VM-26联合灌注化疗.对照组选择丘脑及脑干脑胶质瘤 20例,应用传统经静脉注射卡莫司汀 （卡氮芥,carmustine,BCNU）及口服司莫司汀 （甲环亚硝脲,MeCCNU）治疗,并行疗效对比.结果 超选择性颅内动脉灌注治疗的完全缓解（CR）、部分缓解 （PR）高于对照组,无变化（NC）、恶化 （PD）低于对照组,生存率、生存期高于对照组,差异有统计学意义.结论 超选择性颅内动脉灌注 ACNU、VM-26治疗丘脑及脑干等不适于手术切除治疗的脑胶质瘤疗效高,副作用小,安全可靠,可作为常规化疗手段.     

STAT1基因对胶质瘤细胞系U251细胞周期的影响及其机制

 目的 探讨信号转导与转录激活因子1（STAT1）对胶质瘤细胞系U251细胞周期的影响及其机制。方法 利用LipofectamineTM2000转染试剂体外瞬时将pcDNA3.1-STAT1转染入胶质瘤细胞系U251，将细胞分为Mock组（无转染）、空载组（转染pcDNA3.1）和STAT1组（转染pcDNA3.1-STAT1），采用Western blot法检测胶质瘤U251细胞中STAT1表达水平，MTT法检测转染STAT1的U251细胞增殖活性，流式细胞仪检测细胞周期指标，划痕实验检测细胞迁移指标，通过Western blot法检测转染细胞中P53、P21、bcl-2、Caspase-8的表达水平及变化趋势。结果 与Mock和空载组相比，STAT1组中STAT1蛋白表达量明显增高（P<0.05），细胞增殖明显减慢（P<0.05），G₀/G₁期细胞比例明显升高，细胞的迁移能力明显下降； P53、P21、Caspase-8表达明显增强（P<0.05），bcl-2表达明显减弱（P<0.05）。结论 高表达的STAT1对人脑胶质瘤U251细胞具有抑制增殖或促进凋亡的作用，并且STAT1可调控多分子信号转导通路，对脑胶质瘤的发生和发展起到了关键的作用。     

一条脑胶质瘤相关的全长基因的生物信息学分析

目的报道一条脑胶质瘤相关的全长新基因的生物信息学分析及其研究的结果。方法对507E08克隆子进行了测序,生物信息学分析和Northern blot分析。结果507E08基因为全长基因,长度为2002bp,共编码203个氨基酸,命名为人核糖体蛋白L14．22。经Northern blot证实507E08基因在人正常脑组织中低表达,而在人脑胶质瘤中高表达。结论生物信息学是一种有效分析未知基因的工具。507E08基因可能是与人脑胶质瘤形成有关的一条全长新基因。     

冰己抑瘤丸对胶质瘤患者化疗敏感性及P21、VEGF表达的影响

目的探讨冰己抑瘤丸对胶质瘤患者化疗敏感性及P21、VEGF表达的影响。方法将90例确诊为神经脑胶质瘤的患者随机分为A组（冰己抑瘤丸＋替莫唑胺）30例、B组（汉防己＋替莫唑胺）30例、C组（安慰剂＋替莫唑胺）30例。对比3组总有效率、化疗敏感率及毒副反应发生率。分析治疗前后3组P21、VEGF表达水平的变化。结果 A组总有效率、化疗敏感率高于B、C组（P〈0.05）,毒副反应发生率低于B、C组（P〈0.05）。A组治疗后P21、VEGF表达水平显著低于B、C组（P〈0.05）。结论冰己抑瘤丸可提高胶质瘤患者化疗敏感性及治疗效果,抑制P21、VEGF表达水平,促进患者预后。     

核磁共振弥散张量成像在脑胶质瘤诊断中的应用研究

目的 探讨MRI弥散张量成像（DTI）技术显示胶质瘤与相邻脑白质纤维束解剖关系在脑胶质瘤诊断中的意义.方法 23例脑胶质瘤患者接受术前常规头颅MRI序列检查的同时进行DTI序列扫描,应用Functool软件进行图像分析处理,分别获得各自的部分各向异性图（FA图）、彩色编码张量图及脑白质纤维束图;并测定胶质瘤肿瘤病灶区、灶周水肿区及正常白质区的平均弥散系数（MD值）、各向异性图;进行FA图像信号强度及对比度的分析研究,分析脑胶质瘤与相邻脑白质纤维束的解剖关系.结果 所有病例均成功实现包括DTI序列扫描以及FA图像生成.脑白质纤维束显示为显著的高信号结构,灰质显示为等信号,脑脊液显示为低信号,脑内肿瘤呈类圆形等低信号,灶肿瘤周围间质水肿区白质纤维束仍能在DTI的FA图上显像,DTI的FA图像对于脑白质纤维束显影的信号对比度明显优于常规的T1W图像.肿瘤病灶区和灶周水肿区与正常白质区的MD值比较差异均有统计学意义（均P＜0.05）,而肿瘤病灶区与灶周水肿区的MD值比较差异无统计学意义（P＞0.05）;3个区域的FA值比较差异均有统计学意义（均P＜0.05＝.结论 磁共振DTI技术可在活体清晰、无创、直观地显示脑胶质瘤与周围脑白质纤维束的关系,结合其他序列的MRI应用于脑胶质瘤的术前诊断,可以准确判断肿瘤和周围脑白质纤维束的毗邻关系,对脑胶质瘤术前诊断、手术方案设计以及术后神经功能障碍的预测与预防具有重要意义.     

长链非编码RNA PSMA3-AS1在人胶质瘤细胞中的表达及作用研究

目的探究胶质瘤组织中lncRNA PSMA3-AS1的表达情况,以及其对胶质瘤细胞(U251、LN229、T98G和A172)增殖和侵袭能力的影响。方法使用qRT-PCR实验检测35对胶质母细胞瘤组织和癌旁组织中PSMA3-AS1表达;结合TCGA数据库分析PSMA3-AS1表达与胶质瘤恶性程度及患者预后的关系;采用U251和T98G胶质瘤细胞系进行细胞增殖能力和侵袭能力检测;使用Western blot实验检测侵袭相关蛋白MMP-2/9表达水平。结果 TCGA数据库分析提示PSMA3-AS1在胶质瘤组织中呈高表达状态,结合35对胶质瘤组织和细胞系中PSMA3-AS1的表达,提示PSMA3-AS1在胶质瘤中表达明显上调(P<0.05)。同时发现PSMA3-AS1表达与肿瘤直径有关(P=0.007),而PSMA3-AS1高表达的胶质瘤患者生存期较短(P=0.042)。敲低PSMA3-AS1表达后,胶质瘤细胞内PSMA3-AS1的表达水平及细胞增殖、侵袭能力明显受到抑制,侵袭相关蛋白(MMP-2/9)表达水平明显降低(P<0.05)。结论 PSMA3-AS1在胶质瘤中呈高表达状...