CD/5-FC自杀基因体系在正常免疫力动物体内的抑瘤及旁观者效应

目的:观察阳离子脂质体介导的CD/5-FC自杀基因体系协同γ-IFN在正常免疫力小型动物体内对肿瘤的抑制效应及远端旁观者效应.方法:采用阳离子脂质体介导CD基因质粒瞬时转染小鼠肝癌H22及空质粒转染的H22细胞,分别接种于KM鼠双侧前腋下皮下;向小鼠体内注射5-FC及γ-IFN,观察在γ-IFN协同作用下对转染CD基因瘤体的抑制作用和远距离空质粒转染瘤体的抑制即远端旁观者效应.结果:5-FC对转染CD基因侧瘤体抑制明显,抑制率为79.39%;在γ-IFN的协同下CD/5-FC的抑瘤作用得到了增强,抑制率为93.47%,与无γ-IFN协同作用相比,对癌细胞抑制率明显增强(t=3.49,P=0.0036);存在远端旁观者效应,远端未转染瘤体的抑制率为54.42%;在γ-IFN的协同下远端旁观者效应得到显著增强,抑制率达到88.43%,同无γ-IFN相比有差异有显著性(t=2.86,P=0.0212).结论:体内CD/5-FC自杀基因体系联合γ-IFN对肝癌细胞有更好的抑制效应,对肝癌的治疗有很好的应用前景.     

结核性和非结核性脑膜炎患者脑脊液中ADA及NSE表达水平的对比分析

目的探讨脑脊液腺苷脱氨酶（ADA）及神经元特异性烯醇化酶（NSE）表达水平在结核性脑膜炎（TBM）患者诊断中的应用价值。方法利用免疫学技术对TBM患者、无菌性脑膜炎患者及非中枢神经系统病患者脑脊液中的ADA、NSE含量及血清NSE含量进行测定。结果 TBM患者脑脊液中ADA含量明显高于无菌性脑膜炎组及对照组（P〈0.01）,无菌性脑膜炎患者脑脊液中的ADA含量与对照组比较没有明显变化（P〉0.05）。TBM组脑脊液/血清NSE比值比与对照组比较差异有统计学意义（P=0.001）。结论脑脊液ADA含量测定有助于TBM的诊断。脑脊液/血清NSE比值比可能成为一个早期诊断结核性脑膜炎的参数。     

胞嘧啶脱氨酶APOBEC3G可能通过G→A突变抑制乙型肝炎病毒的复制

目的研究胞嘧啶脱氨酶APOBEC3G(A3G)对HBV复制的影响及作用机制。方法利用脂质体介导A3G和HBV的真核表达质粒瞬时共转染人肝癌细胞株HepG2,以空载体pcDNA3.1与HBV真核表达质粒共转染为对照,同时转染含增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的质粒载体以判定转染效率。共转染两天后用荧光定量PCR方法定量细胞内核壳体(core)相关HBV DNA水平,用Western blot检测细胞内A3G和HBcAg的表达,并对细胞内core相关HBV DNA X基因进行PCR扩增、T-A克隆和测序,分析X基因中的碱基突变。结果经EGFP判定的转染效率平均为29%。共转染0.5μgA3G和0.5μgHBV的HepG2细胞内core相关HBV DNA量平均下降为对照的8.9%,共转染2μgA3G和0.5μgHBV的平均下降为对照的0.6%。共转染A3G和HBV表达质粒后,HepG2细胞内HBV的X基因中发生G→A突变的数目明显增多,33个克隆中有9个克隆检测到了16～37个G→A突变,突变总数达254个,而对照的33个克隆中仅有2个克隆各检测到2个G→A突变。进一步的分析发现,共转染A3G后发生的G→A突变大多集中于几个热点区域,突变靶点常在GG二核苷酸中的第一个G上。结论胞嘧啶脱氨酶APOBEC3G可能通过诱导。HBV DNA的X基因发生G→A超突变,抑制HBV在人肝癌细胞HepG2中的复制。     

ADA、ACE、LDH、CEA的联合检测在结核性和恶性胸腔积液中的鉴别诊断价值

目的测定血清和胸水中腺苷脱氨酶（ADA）、血管紧张素转化酶（ACE）、乳酸脱氢酶（LDH）与癌胚抗原（CEA）的水平,探讨其指标联合检测对结核性和恶性胸水的鉴别诊断意义。方法对临床已确诊的72例胸腔积液患者（结核性40例,恶性32例）的胸水和血清分别采用酶免疫法和化学发光法进行ADA、ACE、LDH和CEA含量测定。结果结核性胸水中ADA的含量为（60.2±20.10）U/L,ACE的含量为（35±9.6）U/L,LDH的含量为（338±41）U/L,CEA的含量为（12.8±5.82）μg/L;在恶性胸水中,ADA为（11.02±5.23）U/L,ACE为（16±11.0）U/L,LDH为（379±69.0）U/L,CEA为（39.9±19.7）μg/L。结核性胸水ADA和ACE含量较恶性胸水组明显增高（P〈0.01）,CEA在恶性胸水中含量较结核性胸水组明显增高（P〈0.01）。胸水中ADA和ACE的检测对结性性胸膜积液诊断的敏感性分别为84.3%、87.5%,特异性分别为87.5%、80.0%;而胸水中LDH和CEA的检测对恶性胸膜积液诊断的敏感分别为84.3%、75.0%,特异性分别为80.0%、93.0%。四项指标联合检测敏感性性为78.1%,特异性为97.5%,较单一指标的特异性高。结论胸水中ADA、ACE、LDH和CEA的联合检测对结核性和恶性胸水的鉴别诊断具有一定价值,有助于临床胸水性质的诊断。     

血清胞苷脱氨酶检测对类风湿关节炎早期诊断的价值

目的探讨测定血清中的胞苷脱氨酶活性对类风湿关节炎患者的诊断价值。方法采用分光光度法测定血清中的胞苷脱氨酶活性。结果正常对照组血清中的胞苷脱氨酶活性没有性别和年龄差异(30名男性:4.89±1.96U/ml,30名女性:4.82±1.72U/ml),63名类风湿性关节炎患者血清胞苷脱氨酶活性为12.51±2.71U/ml,与正常人群比较有显著性差异(P<0.001),且显著高于风湿性关节炎患者(P<0.001),36名风湿性关节炎患者血清中的胞苷脱氨酶活性为5.03±1.83U/ml,与正常对照组比较无显著差异(P<0.05)。结论胞苷脱氨酶活性可作为类风湿关节炎急性感染的早期诊断指标,且在风湿性关节炎与类风湿性关节炎的鉴别诊断中具有重要意义,对类风湿关节炎的预后判断亦有临床价值。     

肺结核患者外周血腺苷脱氨酶活性与T淋巴细胞亚群定量检测的相关性及临床意义

目的探讨肺结核患者外周血淋巴细胞内腺苷脱氨酶(ADA)活性和T淋巴细胞亚群定量检测的关系及临床意义。方法应用全自动生化分析仪测定肺结核患者血清ADA的活性和用流式细胞仪(FCM)测定外周血中的T淋巴细胞亚群。结果肺结核患者外周血ADA活性显著高于正常人组,在化疗2个月及6个月后,其活性显著降低(P0.01),外周血CD4、CD8及CD4/CD8比值差异有统计学意义(P0.01),ADA与CD4/CD8之间存在相关性。结论肺结核患者淋巴细胞内ADA活性升高与T淋巴细胞亚群比例失调有关,检测患者外周血ADA、T淋巴细胞亚群的变化有助于临床病情监控、疗效判定及预后判断。     

ADA、TB-Ab-IgG检测对结核性胸膜炎诊断及鉴别诊断的临床价值

目的探讨胸水和血清腺苷脱氨酶（ADA）、结核抗体（TB—Ab—IgG）检测对结核性胸膜炎的诊断价值。方法采用斑点金免疫渗滤试验（DIGFA）和酶连续监测法对117例患者进行胸水和血清TB_Ab．IgG和ADA检测分析。结果87例结核性胸膜炎患者胸水、血清中TB-Ab-IgG的敏感性分别为62．0％和70．1％,特异性分别为93．1％和86．6％。ADA活性在结核性和癌性胸水中分别为52．51和10．26U／L（P〈0．01）。以胸水ADA≥40U／L做为诊断结核的临界值,其敏感性为79．3％,特异性为86．6％;以胸水ADA／血清ADA〉1．00为临界值,其敏感性为97．7％,特异性为96．6％。结论胸水和血清ADA、TB—Ab—IgG检测对结核性胸膜炎和非结核性胸膜炎具有诊断和鉴别诊断价值。     

腺苷脱氨酶诊断结核性和恶性胸腔积液价值

目的:探讨胸腔积液和血清中腺苷脱氨酶鉴别诊断结核性胸膜炎及恶性胸腔积液的价值。方法:因胸腔积液住院,经胸腔镜检查和胸膜活检病理确诊为结核性胸腹炎患者(结核组)42例和恶性胸腔积液患者(恶性组)38例,分别检测2组胸腔积液及血清中腺苷脱氨酶活性,应用ROC曲线确定结核性胸膜炎患者胸腔积液腺苷脱氨酶的最佳临界值。结果:结核组胸腔积液腺苷脱氨酶活性、胸腔积液腺苷脱氨酶与血清腺苷脱氨酶比值分别为(48±25)u/L和4.2±3.0,高于恶性组的(20±9)u/L和1.7±1.0,差异均有统计学意义(P<0.01);结核组和恶性组血清腺苷脱氨酶活性分别为(15±6)u/L和(12±5)u/L,差异无统计学意义(P>0.05)。应用ROC曲线确定胸腔积液腺苷脱氨酶诊断结核性胸膜炎的最佳临界值为30.7 u/L,灵敏度为70.5%,特异度为92.2%。结论:胸腔积液腺苷脱氨酶活性可作为鉴别结核性和恶性胸腔积液的重要指标,对结核性胸膜炎有较高的临床诊断价值,而血清腺苷脱氨酶活性对鉴别二者无临床意义。     

肝脏疾病诊断中腺苷脱氨酶、前清蛋白、α-L-岩藻糖苷酶、胆碱脂酶和5'-NT价值的临床评价

目的 了解腺苷脱氨酶（ADA）、α-L-岩藻糖苷酶（AFU）、胆碱脂酶、前清蛋白和5＇-核苷酸酶（5＇-NT）在肝脏疾病诊断中的意义.方法 选择332例肝脏疾病患者,其中,急性肝炎150例,重型肝炎25例,肝硬化40例,酒精性肝炎35例,慢性肝炎82例;选择同期90例健康体检者作为对照.采用Bayer ADVIA 2400 全自动生化分析仪检测其血清ADA、AFU、前清蛋白、胆碱脂酶和5＇-NT,绘制受试者工作特征曲线（ROC）并计算曲线下面积（AUC）,评价5项指标在不同肝脏疾病中的诊断意义.结果 重型肝炎、肝硬化患者血清ADA、AFU、5＇-NT显著增高,前清蛋白、胆碱脂酶显著降低;ADA、AFU、5＇-NT的异常值比例分别超过80%、65%、90%.急性肝炎、酒精性肝炎患者血清ADA、AFU、5＇-NT轻度升高,前清蛋白、胆碱脂酶轻度下降;急性肝炎患者血清胆碱脂酶、5＇-NT的异常值比例分别为80.0%、54.67%.血清前清蛋白、胆碱脂酶的AUC在重型肝炎患者中分别为0.022、0.000,在肝硬化组患者中分别为0.019、0.000;上述两组患者血清ADA、5＇-NT的AUC均大于0.950,AFU的AU均大于0.800.在急性肝炎和酒精性肝炎组中,患者血清ADA、5＇-NT的AUC均大于0.800,AFU的AUC分别为0.814、0.637.332例患者血清前清蛋白、胆碱脂酶的AUC分别为0.175、0.181,血清ADA、AFU、5＇-NT的AUC分别为0.850、0.743、0.714.结论 血清ADA、AFU、前清蛋白、胆碱脂酶和5＇-NT检测对肝脏疾病的诊断具有重要价值.     

神经元特异性烯醇化酶、细胞角质蛋白19片断、癌胚抗原联合LDH、ADA检测对良、恶性胸腔积液鉴别的意义

目的探讨血清、胸水中神经元特异性烯醇化酶（NSE）、细胞角质蛋白19片断（CYFRA21—1）、癌胚抗原（CEA）对良、恶性胸腔积液的鉴别价值。方法对40例经病理确诊的胸腔积液患者按胸水的性质分为恶性胸水组（23例）和良性胸水组（17例）。2组患者均采用电化学发光法检测血清及胸腔积液中NSE、CYFRA21—1、CEA的含量．生化检测胸腔积液中乳酸脱氢酶（LDH）和腺苷脱氨酶（ADA）。结果恶性胸水组的血清NSE、CYFRA21—1及CEA均显著高于良性胸水组（P=O,02、0．02及0．01）;胸水CYFRA21—1及CEA均明显高于良性胸水组（严如．01或P=0．04）,ADA显著低于良性胸水组（P=0．01）。2组胸水NSE、LDH比较差异无统计学意义（均P〉O．05）。结论血清、胸腔积液中NSE、CYFRA21—1、CEA和ADA联合检测,对良、恶性胸腔积液的鉴别诊断有重要价值,能提高准确率。