脓毒症患者调节性T细胞与CD64指数的相关性研究

目的 探讨CD4+ CD25+/highCD127low/-、CD14+ HLA-DR+在脓毒症发生发展中的作用.方法 流式细胞术检测脓毒症患者(其中生存组17例,死亡组11例)CD4+ CD25+/highCD127low/-、CD14+ HLA-DR+、CD64指数,同时测定白细胞数(WBC)和C-反应蛋白(CRP)的水平,并与正常对照组比较.结果 脓毒症组CD4+ CD25+/highCD127 low/-、CD64指数均明显高于正常对照组,CD14+ HLA-DR+明显低于正常对照组;动态观察结果显示,随着疾病的进展,生存组CD4+ CD25+highCD127low/-、CD64指数均明显回落,而死亡组两者却持续升高;而CD14+ HLA-DR+刚好相反,生存组CD14+HLA-DR+逐渐升高,死亡组CD14+ HLA-DR+明显低于存活组,且持续处于低水平状态;相关性分析显示,CD4+ CD25+/high CD127low/-与CD64指数、CRP正相关;CD14+ HLA-DR+与CD64指数、CRP明显负相关;CD54指数与WBC、CRP正相关.结论 CD4+CD25+/highCD127low/-、CD14+ HLA-DR+与疾病感染和炎症严重程度密切相关,可作为疾病严重程度及预后的指标.     

CD4＋CD25＋FOXP3＋调节性 T细胞在牛奶蛋白过敏发生及耐受中的作用

目的：探讨CD4＋CD25＋FOXP3＋调节性T细胞在牛奶蛋白过敏患儿发病及耐受过程中的作用。方法选取2013年1月至2015年1月东南大学医学院附属江阴市人民医院儿科明确诊断牛奶蛋白过敏的患儿20例,健康对照组20例,牛奶蛋白过敏患儿予深度水解或完全水解蛋白配方粉喂养6个月,6个月后行食物激发试验,过敏耐受者15例,耐受失败者3例。治疗前后测定外周血CD4＋CD25＋FOXP3＋调节性T细胞的水平,分析比较牛奶蛋白过敏患儿治疗前、治疗后及与对照组之间CD4＋CD25＋FOXP3＋调节性T细胞的差异,并比较治疗后过敏耐受患儿和耐受失败患儿CD4＋CD25＋FOXP3＋调节性T细胞的差异。结果牛奶蛋白过敏患儿CD4＋CD25＋FOXP3＋调节性T细胞水平明显低于对照组患儿（3．73±0．42％ vs 6．90±0．35％,t＝2．22,P＜0．05）;治疗后CD4＋CD25＋FOXP3＋调节性T细胞水平较治疗前明显升高（5．18±0．81％ vs 3．73±0．42％,t＝2．10, P＜0．05）;治疗后牛奶蛋白耐受患儿CD4＋CD25＋FOXP3＋调节性T细胞水平明显高于耐受失败患儿（5．36±0．76％ vs 4．28±0．36％,t＝2．31,P＜0．05）。结论 CD4＋CD25＋FOXP3＋调节性T细胞有助于减少牛奶蛋白过敏的发生,并帮助诱导免疫耐受。     

2型糖尿病患者血清25-经维生素D水平与骨密度的关系

目的 探讨2型糖尿病患者不同血清25-( OH) D水平与骨密度的关系。方法 选择住院的2型糖尿病患者288例,根据25-( OH) D水平对其进行分组：25-( OH) D>30ng/mL为维生素D充足组;20ng/mL <25-( OH ) D≤30 ng/mL为维生素D不足组;l0 ng/mL <25-( OH) D <20 ng/mL为维生素D缺乏组;25-( OH) D <10ng/mL为维生素D严重缺乏组。采用双能X线骨密度仪(DXA)测量受试者腰椎L1-4、股骨颈及全髓的骨密度。分析不同水平25-( OH ) D与骨密度的关系。结果 维生素D充足组、维生素D不足组、维生素D缺乏组、维生素D严重缺乏组的患者例数(所占比例)分别为10例(3. 5%) ,74例(25.7%) ,177例(61.5%) ,27例(9.3%)。不同性别组25-( OH ) D水平无明显差异,但是女性患者的腰椎L1-4、股骨颈、全髋的骨密度均较男性低。pearscm相关分析显示25-( OH) D水平与腰椎L1-4、股骨颈、全髓的骨密度均无相关性(分别为r=0.080 P=0.262;r=0. 139 P=0. 051;r=0.068 P=0. 342)。结论 2型糖尿病患者25-( OH) D水平与腰椎L1-4、股骨颈、全髓的骨密度均无明显相关性。     

应用CD4+CD25+Treg细胞诱导大鼠肾移植免疫耐受的研究

目的 应用供体抗原特异性CD4 CD25 Treg细胞诱导移植免疫耐受,抑制大鼠肾移植慢性排斥反应.方法 以SD、Wister大鼠分别为供、受体建立同种异体肾移植慢性排斥反应动物模型;受体脾细胞悬液同供体肾组织抗原孵育培养,诱导获得对供体抗原的特异性;采用MACS法分选具有供体抗原特异性的CD4 CD25 T细胞,FACS流式细胞法检测分选的CD4 CD25 T细胞及CD4 CD25 Treg细胞纯度;获得之供体抗原特异性CD4 CD25 Treg细胞于同种异体肾移植术后2、4、6、8、10周,分别经尾静脉注射入受者体内(实验组,n=12),选取未注射组为对照(n=12).观察两组移植肾脏存活时间;术后第10、40、80天MTT法检测比较两组受体脾细胞对供体抗原刺激反应程度;术后第10、20、40、60、80天分别监测各组血肌酐水平.结果 FACS流式细胞法检测分选的CD4 CD25 T细胞得率为4.13%,分离纯度为73.34%;CD4 CD25 Treg细胞纯度为65.22%.所分选之CD4 CD25 Treg细胞成功获得供体抗原特异性,对供体抗原的抑制率(IR)为85.4%.移植肾存活时间:治疗组移植肾存活时间为(98.83±6.66)d,显著长于对照组的(78.25±4.71)d,组间差异有统计学意义(P＜0.05);术后第40、80天治疗组脾细胞对供体抗原刺激反应程度均明显低于对照组,两组间差异有统计学意义(P＜0.05).术后第20、40、60、80天对照组血肌酐指标明显高于治疗组,同治疗组间差异有统计学意义(P＜0.05).结论 供体抗原特异性CD4 CD25 Treg细胞可特异性抑制受体对供体抗原的免疫反应,有效抑制了移植肾慢性排斥反应的发生.     

1,25(OH)2维生素D3诱导大鼠骨髓单核细胞形成破骨细胞

目的 观察1,25二羟维生素D3[1,25(OH)2 D3]诱导成年大鼠骨髓来源的单核细胞形成多核破骨细胞的作用.方法 实验分为单核细胞诱导组和全骨髓诱导组,每组各10只大鼠.密度梯度离心法分离大鼠骨髓中的单核细胞,α-MEM培养液中加入10-8 mol/L的1,25(OH)2 D3诱导单核细胞向破骨细胞分化.利用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色、倒置相差显微镜和扫描电镜,观察诱导不同时相TRAP阳性(TRAP )多核细胞的形态学特征、特异性酶表达、以及骨吸收陷窝.进而计数诱导的破骨细胞数量,鉴定其功能活性,并与全骨髓诱导方法比较.结果 骨髓单核细胞诱导组在培养第7 d出现TRAP 多核细胞,第14 d TRAP 多核细胞数量达峰值,第21 d TRAP 多核细胞数量开始减少.从培养第14 d到第23 d,单核细胞诱导组TRAP 多核细胞数量多于全骨髓诱导组(P＜0.05);培养第10 d到第23 d单核细胞诱导组骨吸收陷窝数量多于全骨髓诱导组 (P＜0.05).单核细胞诱导组破骨细胞数量高峰期可持续7 d,全骨髓诱导法仅持续3 d.结论 1,25(OH)2 D3能够诱导成年大鼠骨髓来源的单核细胞形成破骨细胞;所诱导的破骨细胞的数量和峰值持续时间、以及骨吸收活性均高于全骨髓诱导方法.     

远志皂苷调控RAGE和LRP1的抗Aβ诱导的氧化应激作用研究

目的 探讨远志皂苷(TEN)对转运蛋白RAGE和LRP1的调控作用,以及对Aβ诱导的PC12细胞氧化应激的保护作用.方法 建立Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤模型,MTT法测定细胞活力,Western blot 检测RAGE和LRP1蛋白表达水平变化,分光光度法检测活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)浓度及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性变化.结果 TEN能明显下调RAGE的表达,上调LRP1的表达,并且抑制Aβ25-35诱导引起的ROS、MDA浓度增加,提升Aβ25-35诱导引起的SOD、GSH-Px活性降低.结论 TEN可能通过调控Aβ转运清除蛋白RAGE和LRP1的表达,抑制Aβ诱导的氧化应激效应,发挥抗Aβ神经毒性和神经保护作用.     

25G腰麻针直接用于腰麻的临床观察

目的探讨直接将25G腰麻针用于腰麻的可行性及优越性。方法选择择期拟行下肢或下腹部手术,随机分为3组（n=100）,A组：普通22G斜面式穿刺针;B组：硬膜外和腰椎联合麻醉穿刺针;C组则直接用套件中的25G细腰穿针进行腰穿。术毕等麻醉平面消散至T10以下后送回病房。交待平卧24h。术后随访3d1,个月后电话随访,记录麻醉消散时间,有无头痛及腰痛、下肢痛或感觉异常。结果所有患者麻醉效果满意,各组患者腰穿穿刺时间差异有统计学意义,与麻醉医生操作熟练程度有关。术后随访：各组间患者麻醉消退时间无差异;头痛发生率以A组最高,腰痛发生率以B组最高,下肢痛或感觉异常以A组为高,而C组未见发生。结论虽然25G腰麻针单独用于腰椎穿刺的技术操作较困难,但术后无腰痛及无头痛的发生,并发症少,麻醉效果确切,患者满意,值得广泛推广。     

25-羟维生素D3水平与2型糖尿病肾病的相关性研究

目的：观察2型糖尿病肾病(T2DN)患者血浆维生素D和肾功能生化指标变化情况,评价维生素D在T2DN发生发展中的意义。方法：对72例T2DN患者按24 h尿白蛋白定量(24 h-UAE)分为正常蛋白尿组( A组)、微量蛋白尿组( B组)和大量蛋白尿组(C组),同时选择相匹配的22名健康人作为对照组(D组)。检测4组血浆尿素(UREA)、血肌酐(Cr)、尿酸(UA)、24 h-UAE及血清25-羟维生素D3[25-(OH)D3]水平。并分析血清25-(OH)D3与肾功能指标的相关性。结果：A、B和C 3组血清25-(OH)D3水平均较D组明显降低(P<0.01),C组患者亦均较A组和B组患者明显降低(P<0.01),A组和B组差异无统计学意义(P>0.05)。 C组患者血浆UREA、Cr和24 h-UAE较A、B、D组患者明显升高(P<0.01),B组和A组患者差异均无统计学意义(P>0.05)。 A、B、C 3组T2DN患者和D组血浆UA水平差异均无统计学意义(P>0.05)。25-(OH) D3与UREA、Cr和24 h-UAE均呈负相关关系(P<0.05),与UA无相关关系(P>0.05)。结论：合并25-(OH)D3缺乏的T2DN患者可能更容易出现肾脏病变。     

糖皮质激素对重症肌无力患者外周血调节性T细胞中Foxp3及其胞内CTLA-4表达的影响

目的 研究糖皮质激素治疗重症肌无力( MG)患者外周血CD4 +CD25 +调节性 T 细胞( Treg )中 Foxp3 和胞内CTLA-4的表达水平的变化. 方法 收集MG患者34例,分为非治疗组8例和糖皮质激素治疗组26 例. 另将20 例健康者设为对照组. 采用流式细胞仪检测分析患者和健康者外周血CD4 +CD25 +Treg细胞Foxp3和胞内CTLA-4的变化.结果 ① MG非治疗组患者外周血 CD4 +CD25 +Treg细胞Foxp3和胞内CTLA-4水平较对照组显著下降( P<0. 05 );②糖皮质激素治疗能显著提升CD4 +CD25 +Treg细胞Foxp3和胞内CTLA-4表达比例( P <0. 05 ) ,但仍低于对照组( P <0. 05);③ CD4 +CD25 +Treg细胞Foxp3和胞内CTLA-4表达呈正相关性(r=0. 870,P<0. 001). 结论 MG患者外周血CD4 +CD25 +Treg Foxp3和胞内CTLA-4呈低表达,糖皮质激素治疗能显著提升Foxp3和胞内CTLA-4表达水平,但尚未达正常者免疫状态.     

男性糖尿病患者25(OH)VD与骨密度等指标关系的研究

目的 探讨男性糖尿病患者25(OH)VD与骨密度及其它指标的关系.方法 纳入82例男性糖尿病患者,其中骨质疏松患者49例,非骨质疏松患者33例,检测其骨密度、血清中25(OH)VD水平及其它指标.结果 ①骨质疏松组与非骨质疏松组相比,25(OH)VD、睾酮(T)、硫酸脱氢表雄酮(DHEA-S)、骨特异性碱性磷酸酶(B-ALP)水平明显降低(P<0.05),抗酒石酸酸性磷酸酶-5b(TRCAP-5b)明显增高(P<0.05),甲状旁腺激素(PTH)、尿白蛋白/肌酐(Ualb/Cr)有升高的趋势,但差异均无统计学意义(P>0.05).糖化血红蛋白(HBAtlc)两组比较无统计学意义;②在骨质疏松组和非骨质疏松组,25(OH)VD水平与年龄未显示相关性,与病程呈负相关(P<0.05).两组中25(OH)VD均与股骨颈、Ward三角区T值、大转子T值、腰椎T值呈正相关(P<0.05),与T,DHEA-S也呈正相关(P<0.05).骨质疏松组25(OH)VD与PTH呈负相关(P<0.05),而非骨质疏松组25(OH)VD与PTH无相关.两组中25(OH)VD与B-ALP呈正相关(P<0.05),而与TRCAP-5b、HbAlc、Ualb/Cr 均未显示相关性.结论 25(OH)VD、T、DHEA-S降低可能是男性糖尿病骨质疏松的重要因素.