RDS／peripherin表达载体的构建和在COS—1细胞的表达

目的 构建大鼠ＲＤＳ／ｐｅｒｉｐｈｅｒｉｎ真核表达载体ｐＡＬＴＥＲ－ＲＤＳ,并观察在ＣＯＳ－１细胞中的表达,方法 将全长度的ＲＤＳ／ｐｅｒｉｐｈｅｒｉｎｃＤＮＡ（１．５ｋｂ）插入到真核表达载体ｐＡＬＴＥＲ－ＭＡＸ中,构建了ＲＤＳ真核表达载体ｐＡＬＴＥＲ－ＲＤＳ,采用电穿孔技术将其转染ＣＯＳ－１细胞,转染４８ｈ后,采用ＲＴ－ＰＣＲ检测ＲＤＳ／ｐｅｒｉｈｐｅｒｉｎｃＤＮＡ的表达,结果 采用ＲＴ－ＰＣＲ     

视网膜母细胞瘤细胞系HXO—Rb44抑癌基因的表达

目的检测视网膜母细胞瘤（ＲＢ）细胞系ＨＸＯＲｂ４４中抑癌基因Ｒｂ的表达状况,为进一步研究ＲＢ的发病机制,利用抑癌基因Ｒｂ进行ＲＢ的基因治疗提供实验依据。方法用ＳＰ免疫组织化学（ＩＨＣ）及流式细胞术（ＦＣＭ）间接免疫荧光法对Ｒｂ基因的表达进行定性、形态学定位及定量检测。结果ＩＨＣ法检测显示：正常视网膜组织中Ｒｂ蛋白呈阳性反应,位于细胞核呈棕黄色;ＨＸＯＲｂ４４中Ｒｂ蛋白表达阴性。ＦＣＭ检测显示：正常人淋巴细胞Ｒｂ蛋白表达量是ＨＸＯＲｂ４４细胞的３．７１倍,ＨＸＯＲｂ４４中Ｒｂ蛋白表达量极低。结论ＲＢ细胞系ＨＸＯＲｂ４４中存在野生型Ｒｂ基因的功能失活,Ｒｂ基因的突变失活与ＲＢ的发生密切相关。     

内皮素、降钙素基因相关肽、内源性类洋地黄物质对HFRS患者心、肾功能的影响

目的：观察内皮素（ET）、降钙素基因相关肽（CGRP）、内源性类洋地黄物质（EDLS）对肾综合征出血热（HFRS）患者心、肾功能的影响。方法：用放免法（RIA）检测血浆ET、CGRP、EDLS,全自动生化仪检测血尿素氮（BUN）、肌酸磷酸激酶（CPK）,给12例患者作了多巴胺激发试验。结果：病程各期见血浆ET升高,CGRP降低,ET／CGRP比值显著上升,且ET／CGRP变化曲线与BUN、CPK之变化趋势大体一致。经多巴胺激发后血浆CGRP较基础值升高十余倍,而ET变化不大。血清EDLS于发热期稍有下降,低血压、少尿期则下降明显,重症组较轻症组下降更著。与此同时心电图大多呈现心肌损害的异常波型如心律失常、Q－T间期延长、低电压、Ⅰ°与Ⅱ°房室传导阻滞、ST－T波改变等;而轻症患者较少出现上述异常。结论：HFRS病程中血浆ET升高、CGRP与EDLS减低是引起心、肾功能损害的重要因素之一,表明体液因子的变化也参与HFRS的发病过程。     

葡萄糖激酶基因与中国人2型糖尿病的相关性研究

目的：研究葡萄糖激酶（GCK）基因多态性与2型糖尿病的关系,并获得GCK基因频率在中国人群中的分布规律。方法：运用聚合酶联反应技术结合短串联重复序列（STR）的方法检测107例2型糖尿病患者及101例正常对照者的GCK基因型。结果：两组1、2、3、4和5等位基因的分布频率分别为0.08、0.46、0.07、0.29、0.10和0.11、0．49、0．16、0．23、0．01,其总体频率分布存在显著性差异,2型糖尿病组的5等位基因频率明显高于对照组。比较GCK基因座在中国人群与欧洲人及北美人群的分布,发现存在明显的种族差异。结论：GCK基因多态标记与中国人2型糖尿病相关联。     

中国汉族人不同年龄和性别载脂蛋白E等位基因频率的群体分布

目的 研究在上海地区健康汉族人中不同年龄和性别的载脂蛋白Ｅ基因频率的群体分布,方法 本次调查包括６４９名健康汉族人（女：２３７人,男：４１２人）载脂蛋白Ｅ基因组ＰＣＲ扩增,前引物：５′－ＧＧＣ,ＡＣＧＧＣＴＧＴＣＧＡＡＧＧＡＧＣＴ－３′;后引物：５′－ＧＡＴ ＧＧＧ ＧＣＴ ＧＡＧ ＧＣＣ ＧＣＧ ＣＴ－３′,ＰＣＲ产物用５单位限制性内切酶Ｃｆ０Ｉ酶切,用２０％聚丙烯酰胺凝胶电泳分离。结果：Ａｐｏ     

采用定点基因缺失突变技术在大肠杆菌中分泌鲑鱼生长激素

目的：为获得与天然鲑鱼生长激素一致的基因工程产物,对已构建的鲑鱼生长激素基因分泌型表达质粒ｐＯｓＧＨ１５３进行改造,删除所编码表达产物氨基端多余的９个碱基,方法：采用ＰＡＬＴＥＲ系统进行寡聚核苷酸指导下的基因定点缺失突变。突变质粒ｐＯｓＧＨ１５８经限制性酶切图谱及Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交分析加以证,结果：含有表达质粒ｐＯｓＧＨ１５８的大肠杆菌株经ＩＰＴＧ诱导后提取周质帽白,经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及免疫     

ACE基因多态性及循环中酶活性与EHT的关系及赖诺普利对其疗效的观察

对１１０例原发性高血压（ＥＨＴ）患者和１６３例正常对照者取血测定其血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）基因Ｉ与 Ｄ多态性及循环中酶活性。高血压组Ｄ等位基因频率高于对照组,分别为 ０．５１８　２和０．４３２ ５（Ｐ＜０．０５）。两组中ＡＣＥ活性均存在ＤＤ＞ＩＤ＞Ⅱ。高血压组及对照组ＩＤ型ＡＣＥ活性分别为３１４．１±６７．９４和２５８．３５±６４．１１（Ｐ＜０．０１）,Ⅱ型分别为２５９．６８±６９．６８和２２０．８８±６２．８５（Ｐ＜０．０５）。高血压组应用赖诺普利后各基因型患者血压均有明显下降,降压幅度ＤＤ＞ＩＤ＞Ⅱ。结果显示ＡＣＥ基因多态性与原发性高血压有密切关系,ＤＤ型有高易患性。ＡＣＥ活性受基因型控制,ＤＤ型活性最高。应用赖诺普利后各基因型血压均有下降,降压幅度 ＤＤ＞ ＩＤ＞ Ⅱ。 ＤＤ型可作为ＡＣＥ抑制剂应用的最佳指征。     

肿瘤的自杀基因疗法

肿瘤是危害人类健康的主要疾病之一。长期以来,人们一直在努力寻找有效的治疗方案。近年,随着分子生物学技术的发展,基因克隆的成功和病毒载体的出现,使肿瘤的基因治疗成为可能,并成为研究热点。根据肿瘤发生的分子机理及相关基因,人们设计了多种肿瘤基因治疗方案[1～4],如:导入肿瘤抑制基因,利用反义技术在转录水平上对癌基因进行调控,在正常细胞内导入耐药基因、通过增强耐药性来提高化疗疗效,通过导入细胞因子基因、MHC基因或其刺激分子基因等激活人体免疫系统或对相关细胞进行改造来增强人体抗肿瘤免疫功能,及自杀基因疗法(suicide ge…     

P53基因的研究进展

１９７９年,Ｌａｎｅ和Ｃｒａｗｆｏｒｄ在ＳＶ４０大Ｔ抗原基因转染的细胞中发现５４０００磷酸化蛋白,命名为Ｐ５３〔１〕,在ＳＶ４０感染或转化的细胞中,Ｐ５３蛋白则与ＳＶ４０Ｔ抗原结合成蛋白复合体。从此,人们开始了对其研究,最初曾认为Ｐ５３基因是一种有显...     

消化道原发性淋巴瘤的免疫表型及与Bcl-2表达的相关性

结外淋巴瘤好发于消化道,仅次于面中线淋巴瘤而居第二位。现将41例消化道原发性淋巴瘤的临床病理、免疫学特点及其与Bcl-2基因的相关性报告如下。1 材料与方法1.1 材料来源41例标本分别取自本省黔东南州、铁五局、毕节地区、都匀414、铜仁及遵义医学院等医院病理科,标本为1995年1月至2000年6月存档的石蜡块,均经10％福尔马林液固定,石蜡包埋切片,HE染色、光镜观察。1.2 试剂及方法 41例检测LCA、CD20、