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31.
目的探讨谷氨酸脱羧酶抗体(GAD-Ab)检测在2型糖尿病患者早期诊断中的意义。方法比较2型糖尿病患者GAD-Ab阳性组12例与阴性组86例的临床特征、体重指数、C肽、糖化血红蛋白等指标。结果GAD-Ab阳性组发病年龄低于阴性组,空腹及餐后2 h C肽值较低,使用胰岛素者比例较高,酮症酸中毒发生率高。结论检测2型糖尿病患者的GAD-Ab可帮助临床上早期发现迟发自身免疫糖尿病病人,尽早采用胰岛素治疗,对保护残存的胰岛功能有重要意义。 相似文献
32.
33.
目的建立测定谷氨酸脱羧酶(GAD)抗体的方法,以探讨该抗体对胰岛素依赖型糖尿病(IDDM)的预测、早期诊断及其发病机制研究的意义。方法用专用酶反应试管建立放射性同位素底物测定GAD活性的分析方法。结果底物浓度为4mmol/ml(37kBq)时,酶活性测定在一定浓度范围内剂量效应呈直线关系(r=0989)。结合免疫沉淀与酶活性分析,建立了免疫沉淀酶活性分析测定GAD抗体的方法,2份IDDM患者GAD抗体阳性血清与酶活性免疫沉淀指数存在剂量效应关系。用免疫沉淀酶法测定15例正常人及20例病程1年以内的IDDM患者血清,两组酶活性免疫沉淀指数分别为0193±0087和0381±0121,差异有显著性(P<001)。按照超过正常人组免疫沉淀指数x+2s为阳性区分,20例IDDM患者血清中GAD抗体阳性9例,占45%。结论该方法简单,能直接反映酶活性的改变,无需高纯度的GAD,特别适用于刚开始从事GAD抗体研究的实验室及阳性血清筛查。 相似文献
34.
新生期大白鼠皮下注射谷氨酸单钠对成年后下丘脑α-促黑素细胞激素神经元免疫反应性的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
本文用免疫组化方法研究了新生期大白鼠注射谷氨酸单钠(MSG)对成年后下丘脑α-促黑素细胞激素(α-MSH)免疫反应神经元的影响,结果显示MSG处理以后下丘脑弓状核区α-MSII免疫反应神经元减少甚至完全消失,但不影响下丘脑背外侧区的α-MSH神经元群。文中还讨论了这两群α-MSH神经元的生理作用。 相似文献
35.
36.
人参银杏复方制剂对缺氧复氧后大鼠海马CA1区GABA、Glu表达的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:探讨人参银杏复方制剂对缺氧复氧后海马CAI区神经元的保护作用机制。方法:应用低压氧舱仿海拔8000米高空缺氧模型,采用免疫组织化学及免疫荧光方法并结合图像分析等技术,观察预防性应用人参银杏复方制剂对缺氧24h复氧0h、24h时段海马CAI区GABA、Glu表达的影响。结果:缺氧24h复氧卟组海马CAI区GABA免疫反应阳性神经元数量、Glu免疫反应阳性神经元荧光强度分别较常氧对照组减少和减弱,复氧24h后上述变化更加明显。预防性应用人参银杏复方制剂后海马CAI区GABA免疫反应阳性神经元数量在复氧0h和24h时较常氧对照组多,以复氧0h时增加最明显;Glu免疫反应阳性神经元荧光强度在复氧0h、24h时段也较缺氧复氧实验组相应时段增加。结论:人参银杏复方制剂可增加缺氧复氧后海马CAI区GABA表达及防止Glu过度释放,对缺氧复氧性脑损伤具有保护作用。 相似文献
37.
目的:研究人工牛黄对致痫大鼠行为的影响,海马及门区神经元丢失情况和谷氨酸脱羧酶(GAD)免疫反应阳性细胞数目的改变,探讨该药的抗惊厥作用。 方法: 采用戊四唑急性惊厥模型,参照Racine标准观察行为学表现,用Nissl染色作海马及门区神经元计数,用免疫组织化学方法作GAD免疫反应阳性细胞计数。 结果: 牛黄防治组惊厥发作的潜伏时间较对照组长,发作次数较惊厥组少,而在海马及门区的神经元和在海马的GAD阳性细胞的丢失数量较惊厥组的少。 结论:人工牛黄能延长惊厥发作的潜伏期,减少发作次数,减轻神经元丢失和保护GAD免疫反应阳性细胞。 相似文献
38.
本文采用过氧化酶—抗过氧化酶(PAP)的免疫组织化学和荧光免疫组织化学的方法,研究了新生期大鼠皮下注射谷氨酸单纳(MSG)对成年后下丘脑弓状核促肾上腺皮质激素(ACTH)神经元和正中隆起内促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)神经纤维免疫反应的影响。新生期MSG处理后,弓状核中ACTH神经元的数目明显减少,正中隆起CRF样免疫反应末稍也大大减少,减少程度随MSG剂量增大而增加。提示MSG通过损伤前阿黑皮素(POMC)衍生的神经多肽,从而影响下丘脑—垂体—肾上腺皮质轴的功能。 相似文献
39.
目的 优化以往构建的以预防 1 型糖尿病为目的的全长谷氨酸脱羧酶(GAD)65 DNA疫苗,尝试构建GAD 65片段与IL-10双基因真核表达载体。方法 从GAD65质粒中扩增出GAD190-315片段和GAD490-570片段的cDNA,以overlap PCR法将之分别与hIL-2信号肽cDNA拼接,得到SGAD190-315、SGAD490-570融合基因。以p43.2-mIL-10质粒为模板,用PCR方法扩增出IL-10基因。将SGAD190-315、SGAD490-570融合基因分别与IL-10基因依次克隆入双启动子真核表达载体pBudCE4.1中,构建出2种双基因重组真核表达载体pBud-SGAD190-315/IL-10和pBud-SGAD490-570/IL-10。2种重组真核表达载体经测序鉴定正确后,用脂质体介导的方法转染COS-7细胞,转染后48和72 h以蛋白质印迹法检测细胞裂解产物及上清液中SGAD190-315和SGAD490-570融合基因的表达,ELISA方法检测细胞上清液中IL-10的表达。结果 核酸序列测定表明克隆的SGAD190-315、SGAD490-570融合基因和IL-10基因序列与报告序列一致。蛋白质印迹法和ELISA方法均检测到SGAD190-315/IL-10和SGAD490-570/IL-10重组真核表达载体在COS-7细胞中的表达。结论 成功构建了2种GAD65片段与IL-10双基因真核表达载体,为1型糖尿病的基因疫苗预防研究提供了实验基础。 相似文献
40.
目的:建立体外谷氨酸诱导神经元兴奋损伤模型,探索其凋亡发生是否通过线粒体信号转导途径介导的细胞色素C(Cyt C)释放而实现,为今后干预性使用神经保护剂提供依据。方法:分离及培养新生Wistar大鼠海马神经元,选用合适谷氨酸浓度建立神经元损伤模型;利用LDH测定及流式细胞仪Annexin V/PI双染色法检测谷氨酸暴露后不同时点神经元凋亡及坏死的动态改变;采用Western blotting法检测caspase-3活性及线粒体内和胞浆内Cyt C水平动态变化。结果:谷氨酸诱导神经元损伤呈明显浓度及时间依赖性,50 μmol/L浓度可使LDH释放量明显增加 (18.4%,P<0.05),暴露后6 h凋亡率显著增加;凋亡发生前,神经元caspase-3活性已明显增高(3 h),6 h达高峰;线粒体Cyt C释放发生在caspase-3增高前,30 min时胞浆内Cyt C水平即明显增加(P<0.05),3 h胞浆内Cyt C水平超过线粒体内,而线粒体内Cyt C水平进行性减少。结论:50 μmol/L谷氨酸可诱导海马神经元凋亡,凋亡机制可能是通过损伤线粒体膜,使Cyt C易位释放入胞浆激活caspase级联反应而致。 相似文献