妊娠高血压综合征患者胎盘组织中Bax、Bcl-2基因及Fas、Fas-L蛋白的表达

妊娠高血压综合征(PIH)是一种严重的妊娠期并发症，是导致孕产妇及围产儿发病率和死亡率升高的重要原因。近年来，国内外学者对PIH的发病机理进行了大量的研究。本研究探讨了胎盘绒毛细胞的凋亡和Bax、Bcl-2基因及Fas、Fas-L蛋白的表达，旨在从细胞与分子水平探讨PIH的发生机理。     

人输卵管蛋白全长cDNA克隆及真核细胞中的表达

目的:克隆人输卵管蛋白(hOviductin)全长cDNA序列,真核细胞中表达,并了解hOviductin是否与大鼠卵母细胞结合。方法:构建人输卵管黏膜上皮细胞cDNA文库,以~(32)P标记的兔输卵管蛋白全长cDNA序列为探针,自文库中筛选hOviductin全长cDNA序列。将获得的hOviductin编码区cDNA序列插入pEGFP-N1真核表达载体,转染HeLa细胞,表达分泌重组的绿色荧光蛋白(EGFP)-hOviductin,并估量其浓度。激光扫描共聚焦显微镜下观察EGFP-hOviductin与大鼠卵巢的卵丘细胞-卵母细胞复合物(COC)或去除透明带后的裸卵的结合情况。结果:所构建的cDNA文库重组率为98.5％,滴度为1.1×10~6pfu/mL。克隆所得hOviductin全长cDNA约为2500 bp,Gen-Bank的登录号为AY189737。EGFP-hOviductin在条件培液中的浓度为0.236 nmol/L,能结合在去透明带的大鼠裸卵质膜外表面,而未见其与COC结合。结论:hOviductin能在HeLa细胞中表达分泌,其分泌产物可结合于大鼠裸卵质膜外表面。     

巴斯德毕赤酵母真核蛋白表达系统的研究进展

自 1 98 1年 hitzeman等 [1 ] 首次在酿酒酵母中表达了人重组干扰素基因后 ,相继又有多种外源基因表达成功。但是常规的酿酒酵母表达系统由于发酵密度不高 ,蛋白分泌能力较差 ,糖基化修饰过度可能会引起副反应等 ,近年来已被新的酵母宿主细胞所取代 ,如巴斯德毕赤酵母、乳酸克鲁维亚酵母、粟酒裂殖糖酵母、烷烃利用型耶鲁酵母、西方许旺氏酵母和多形汉逊酵母等 ,合称非常规酵母表达系统。它们往往具有营养要求简单、生长旺盛、生物量大、温度适应范围广 (2 5℃～ 4 6℃ )、蛋白质分泌能力强等特点 ,正好补充了酿酒酵母的不足。其中的巴斯德…     

吗啡依赖性小鼠的海马蛋白质组学分析

海马是一个与学习记忆功能有密切关系的脑区，研究资料表明它是参与阿片类物质依赖作用的形成的重要脑区之一。阿片类物质引起的海马神经元突触可塑性改变可能是这些物质引起依赖作用的神经生物学基础。神经元突触可塑性变化是一个复杂的生物学过程，涉及到蛋白质表达的变化及由此引起生物化学反应和信号传导     

柴胡加龙骨牡蛎汤对强迫游泳大鼠不同脑区c-fos蛋白表达水平的下调作用

目的：柴胡加龙骨牡蛎汤出自《伤寒论》，现代临床用于抑郁症获得良好疗效。为探讨柴胡加龙骨牡蛎汤受体后药理学机制，本研究观察了该方对强迫游泳大鼠海马和纹状体c-fos基因表达的影响。     

针刺对吗啡戒断大鼠脑组织一氧化氮合酶基因表达的影响

目的 :观察针刺对吗啡戒断大鼠脑组织神经元一氧化氮合酶基因 (nNOSmRNA)表达的影响 ,探讨针刺改善戒断症状的分子生物学机理。方法 :建立大鼠吗啡自然戒断模型 ,运用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)测定戒断大鼠脑组织nNOSmRNA的表达。观察戒断后 ,针刺“足三里”和一氧化氮合酶 (NOS)抑制剂L N 硝基精氨酸 (L NAME)对吗啡戒断大鼠戒断症状和脑组织nNOSmRNA表达的影响。结果 :戒断组nNOSmRNA表达增加 ,针刺组和L NAME组nNOSmRNA表达比戒断组减少。针刺组戒断积分比戒断组少 ,组间差异显著 (P <0 .0 1 )。结论 :针刺“足三里”穴具有抑制吗啡戒断大鼠脑组织nNOSmRNA表达的作用 ,提示这可能是针刺改善吗啡戒断症状的一个重要机制。     

膀胱癌组织及尿脱落细胞CD44V6表达的研究

目的　探讨尿脱落细胞 CD4 4 V6的表达对膀胱癌诊断的意义 ,以及 CD4 4 V6在膀胱癌组织的表达与临床病理特征的关系。方法　对 4 1例膀胱癌及 37例非癌患者尿液脱落细胞涂片进行 HE染色及免疫组化 S- P法染色 ;术后对膀胱癌组织和对照组膀胱黏膜组织进行 HE染色和免疫组化 S- P法染色。结果　细胞涂片传统细胞学法敏感性 34.1% ,特异性为 94 .6 % ;CD4 4 V6免疫组化法敏感性为 73.2 % ,特异性为 89.2 % ,两者差异有高度显著性 ( P<0 .0 1)。膀胱癌 CD4 4 V6阳性表达率 , 级为 10 0 .0 % ( 7/ 7) , 级为 75 .0 % ( 15 / 2 0 ) , 级为 6 4 .3% ( 9/ 14 )。膀胱癌 CD4 4 V6的表达与病理组织分级呈负相关 ( P<0 .0 5 )。膀胱癌 CD4 4 V6阳性表达率 Ta～ 1 组为 92 .3% ( 2 4 /2 6 ) ,T2～ 4 组为 6 0 .0 % ( 9/ 15 ) ,两组差异有显著性 ( P<0 .0 5 ) ,肌层浸润者 CD4 4 V6表达较无肌层浸润者低。结论　膀胱癌 CD4 4 V6的表达与组织学分级有显著性关系。膀胱癌组织学分级越高 ,则 CD4 4 V6阳性越低。膀胱癌肌层浸润者 CD4 4 V6的阳性表达较无肌层浸润者显著降低。尿脱落细胞 CD4 4 V6免疫组化 S- P法优于常规细胞学检验法。     

T细胞淋巴瘤TCRγV1重排基因真核表达载体的构建

目的 构建含TCRγV1重排基因的真核表达质粒。方法 用PCR法扩增含XbaI与BglⅡ酶切位点的TCRγV1基因序列，对VR1012载体及TCRγV1基因PCR产物经双酶切，用连接酶将两者连接并转化到大肠杆菌DH5α，对重组质粒经序列测定，称VR1012／TCRγ。结果 已构建的质粒VR1012／TCRγ经序列测定含有完整的TCRγV1基因片段。结论VR1012／TCRγ表达载体的构建为基因治疗淋巴瘤奠定了基础。     

细胞凋亡及增殖细胞核抗原在肝癌组织中的表达及意义

目的探讨经肝动脉化疗栓塞(TACE)后肝癌细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)广凋亡细胞比值与肝细胞肝癌分化程度的关系。方法应用原位末端标记法(TUNEL)及免疫组化双染色技术，对60例肝细胞肝癌石蜡包埋组织进行检测。结果不同分化程度癌组织中细胞凋亡和PCNA的阳性率不同。分化程度高，细胞凋亡阳性率高、PCNA阳性率偏低；分化程度低，细胞凋亡阳性率偏低、PCNA阳性率高。随分化程度的降低，PCNA广凋亡细胞的比值显著增加，两者有相关性。结论PCNA/凋亡细胞的比值可作为评估肝细胞肝癌分化程度的指标。