小儿急性白血病外周血单个核细胞转铁蛋白受体表达与细胞增殖 …

转铁蛋白受体（ＴｆＲ）在恶性肿瘤性细胞上表达比正常细胞或良性肿瘤细胞上表达明显增加。我们分析了１０例急性淋巴细胞性白血病（ＡＬＬ）和５例急性髓系白血病（ＡＭＬ）外周血单个核细胞ＴｆＲ位点数与反映细胞增殖状态的指标“氚－胸腺嘧啶核苷（＾３ＨＴｄＲ）”掺入值的关系，并用植物血凝素（ＰＨＡ）刺激１０例正常健康儿童外周血单个核细胞转化，测定刺激后细胞的ＴｆＲ位点数及其＾３ＨＴｄＲ掺入值，发现三组间细胞Ｔｒ     

载5-氟尿嘧啶细胞囊泡对结直肠癌细胞株HCT116的杀伤作用

目的:探讨载5-氟尿嘧啶细胞囊泡对结直肠癌细胞株HCT116的杀伤作用。方法:设HCT116组、细胞囊泡组(EVs混悬液5mL、10⁶个/mL)、5-氟尿嘧啶组(5-氟尿嘧啶5mL、30μg/mL)、5-氟尿嘧啶载药囊泡组(EVs混悬液5mL、10⁶个/mL+5-氟尿嘧啶5mL、30μg/mL),以上各组细胞每孔设6个平行样,培养72h。培养结束后,测定细胞增殖侵袭、凋亡水平,RT-PCR法及蛋白印迹法测定各组细胞miR-128、PIK3水平。结果:细胞囊泡组OD值、存活率、单克隆形成数目、穿膜数、迁移距离、凋亡率、miR-128水平、PI3K mRNA和蛋白水平与HCT116组比较无统计学差异(P>0.05);5-氟尿嘧啶组、5-氟尿嘧啶载药囊泡组OD值、存活率、单克隆形成数目、穿膜数、迁移距离、PI3KmRNA和蛋白水平明显低于HCT116组、细胞囊泡组(P<0.05),凋亡率、miR-128水平明显高于HCT116组、细胞囊泡组(P<0.05);5-氟尿嘧啶载药囊泡组OD值、存活率、单克隆形成数目、穿膜数、迁移距离、P...     

氟伐他汀钠通过下调lncRNA PTPRG-AS1表达对结直肠癌SW620细胞增殖凋亡的影响

目的:探究氟伐他汀钠对结直肠癌SW620细胞增殖、凋亡的影响及可能机制。方法:体外培养SW620细胞、正常结直肠上皮FHC细胞,qRT-PCR法检测细胞中lncRNA PTPRG-AS1表达。SW620细胞分为对照组、氟伐他汀钠-低、中、高组、si-PTPRG-AS1组、si-NC组、氟伐他汀钠+pcDNA-PTPRG-AS1组、氟伐他汀钠+pcDNA组。CCK-8法、克隆形成实验、流式细胞术分别检测细胞活性、克隆形成数、凋亡率,Western blot法检测凋亡相关蛋白(cleaved-caspase3、cleaved-caspase9)表达。结果:结直肠癌SW620细胞中lncRNA PTPRG-AS1表达量高于FHC细胞(4.38±0.31 vs 1.00±0.00,P<0.05);氟伐他汀钠-低、中、高组细胞活性、克隆形成数均低于对照组(P<0.05),细胞凋亡率、蛋白(cleaved-caspase3、cleaved-caspase9)表达均高于对照组(P<0.05),且lncRNA PTPRG-AS1表达量低于对照组(P<0.05);si-PTPRG...     

上调Mg2+/Mn2+依赖性蛋白磷酸酶1F表达对鼻咽癌HONE-1细胞增殖和迁移的影响

目的 探讨上调Mg²⁺/Mn²⁺依赖性蛋白磷酸酶1F（PPM1F）对鼻咽癌HONE-1细胞增殖、迁移的影响,并阐明其作用机制。 方法 鼻咽癌HONE-1细胞分为pcDNA3.1组（转染pcDNA3.1质粒）和pcDNA3.1-Flag-PPM1F组（转染pcDNA3.1-Flag-PPM1F质粒）。实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法和Western blotting法检测2组细胞中PPM1F和E-钙黏蛋白（E-cadherin）mRNA及蛋白表达水平,CCK-8法和克隆形成实验检测2组细胞增殖活性和克隆形成率,细胞划痕实验检测2组细胞划痕愈合率,Transwell实验检测2组细胞中迁移细胞数。 结果 与pcDNA3.1组比较,pcDNA3.1-Flag-PPM1F 组细胞中PPM1F mRNA表达水平明显升高（P<0.01）,且PPM1F蛋白表达量明显增加,细胞中E-cadherin mRNA和蛋白表达水平明显升高（P<0.01）,细胞增殖活性、克隆形成率和划痕愈合率明显降低（P<0.05或P<0.01）,迁移细胞数明显减少（P<0.05）。 结论 上调PPM1F表达能够抑制鼻咽癌HONE-1 细胞增殖和迁移,其机制可能与细胞间的黏附作用有关。     

KMT2C通过c-Myc/CDK4信号通路调控胃癌细胞的生长与增殖

摘要:目的 探究赖氨酸特异性甲基转移酶2C(lysine specific methyltransferase 2C,KMT2C)在胃癌发生发展中的 作用及机制。方法 通过 TCGA 数据库分析 KMT2C在胃癌与癌旁的表达差异。采用 Western blot检测 KMT2C在胃 癌与癌旁临床样本中的表达差异。通过 Kaplan-Meier Plotter数据库分析 KMT2C 对胃癌患者预后的影响。采用细胞 实验(克隆形成、EdU 及 CCK-8检测)及皮下瘤负荷模型检测 KMT2C 在体内外对胃癌细胞增殖能力的影响。结果 KMT2C在胃癌中高表达。胃癌患者中 KMT2C高表达组相对于 KMT2C低表达组预后较差。敲减 KMT2C在体内外 均有抑制胃癌 细 胞 增 殖 的 作 用。基 因 集 富 集 分 析 (GSEA)发 现 KMT2C 影 响 c-Myc信 号 通 路。敲 减 KMT2C 后, H3K4me1蛋白表达水平降低,同时,CDK4的 mRNA 与蛋白表达水平降低。KMT2C与c-Myc核内结合促进了c-Myc 与 CDK4的启动子区域的结合。结论 KMT2C通过影响c-Myc/CDK4信号通路促进胃癌细胞增殖。     

ART调节PI3K/AKT通路对肝癌细胞增殖及迁移的影响

目的 探究青蒿琥酯(artesunate,ART)调节磷脂酞肌醇3-激酶/蛋白激酶B (PI3K/AKT)信号通路对肝癌细胞增殖及迁移的影响。方法 体外培养HepG2细胞,分为对照组以及不同浓度(30μg/mL、60μg/mL和120μg/mL) ART组。比较不同组别Hep G2细胞的细胞增殖率、细胞迁移数量、侵袭数量以及Ki-67蛋白、凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2、Caspase-3)、基质金属蛋白酶2 (MMP2)、MMP9和PI3K/AKT通路相关蛋白[磷脂酞肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化的磷脂酞肌醇3-激酶(p-PI3K)、磷酸化的蛋白酶B (p-AKT)]的表达水平。结果 不同浓度ART作用于HepG2细胞后,30μg/mL组、60μg/mL组和120μg/mL组的细胞增殖率分别为(81.73±8.39)%、(65.26±6.48)%、(44.27±4.66)%,Ki-67蛋白表达分别为0.76±0.11、0.43±0.09、0.29±0.04,分别与对照组的(100.00±10.51)%、0.98±0.16比较均明显降低,且ART浓度越高,细胞增殖率和Ki-67蛋白...     

长链非编码RNA NORAD在肺癌中的表达及其对肺癌细胞增殖能力的影响

目的 研究长链非编码RNA DNA损伤诱导的非编码RNA (NORAD)在肺癌中的表达及其对肺癌细胞增殖的影响。方法 RNA-seq分析肺癌组织中LncRNA及miRNA的表达改变,根据表达量确定候选LncRNA;q RT-PCR检测分析肺癌组织及肺癌细胞中候选NORAD的表达;免疫荧光检测分析肺癌组织中细胞增殖核抗原Ki-67的表达;通过线性回归分析肺癌组织中NORAD与Ki-67的表达相关性。生物在线软件联合miRNA测序结果,并通过荧光素酶检测分析NORAD与miR-26b-5p、miR-654-5p结合情况。将A549细胞分成空白对照组(Control)、si-NORAD组、miR-26b-5p mimics、miR-654-5p mimics、si-NORAD与miR-26b-5p mimics联合组、si-NORAD与miR-654-5p mimics联合组,利用EdU检测细胞增殖能力、Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡、蛋白印迹(Western blot)检测细胞凋亡相关蛋白(Bad、Bcl-2、Cleaved Caspase-3)的表达。结果 NORAD...     

细胞周期蛋白A2在肝细胞癌中的表达及其意义

目的：探讨细胞周期蛋白A2(CCNA2)在肝细胞癌（HCC）中的表达及其意义。方法：从TCGA、GEO、GETx数据库获得测序数据,通过STATA 15.0进行meta分析评估HCC患者肿瘤组织中CCNA2 mRNA的表达水平;通过数据库GEPIA绘制CCNA2在HCC中的生存曲线,探究CCNA2对HCC预后的影响。在HCC细胞系（Huh7和SK-Hep1）沉默CCNA2(shCCNA2组),并设置空载体对照组（shNC组）,通过细胞功能学实验检测沉默CCNA2对HCC细胞增殖、迁移与侵袭、细胞周期和细胞凋亡中的影响。通过在鸡胚绒毛尿囊膜构建HCC细胞移植瘤模型,观察并分离瘤体,检测CCNA2在体内对HCC生长的影响。结果：CCNA2在HCC患者肿瘤组织中m RNA水平显著高于非癌肝组织（SMD=1.65,95%CI:1.46～1.85,I2=89%）。CCNA2高表达与肝癌患者的不良预后呈负相关关系。与shNC组相比,shCCNA2组细胞增殖、迁移和侵袭能力降低（P<0.05）。shCCNA2组Huh7和SK-Hep1细胞的G0/G1期、S期、G2/M期占比发生改变（P<...     

生物化学和分子生物学

一种新的垂体分泌蛋白Mimecan原核表达、抗体制备及其在垂体瘤组织中的表达；人骨保护素N端片段在大肠杆菌中的表达及其活性分析；重组人内皮抑素的结构改造及抗肿瘤活性变化；一种新的乙型肝炎病毒表面抗原结合蛋白的筛选、表达及其生物学活性的初步研究；人可溶性APRIL基因的克隆、表达及生物学活性检测；P53与TRF1、TRF2的体外结合及P53结合功能区的分析；人成纤维细胞转录因子Sp1／Sp3对p16^INK4a基因的调控；血管舒-缩肽在血管平滑肌细胞中的表达与调控；rhsBLyS及其突变体对小鼠血清免疫球蛋白分泌及B细胞增殖分化的影响；小干扰RNA抑制LRP16基因表达限制了MCF-7乳腺癌细胞增殖；抑制消减杂交分离肿瘤血管生成相关基因；鸟氨酸脱羧酶基因反义RNA对前列腺癌细胞生长的抑制作用；达菲抗原趋化因子受体在不同转移性人乳腺癌细胞中的差异表达；Ezrin在肝癌中的表达及其与肿瘤黏附、侵袭和门静脉癌栓的关系；丙丁酚抑制氧化型低密度脂蛋白诱导系膜细胞转化生长因子-β1表达；雌孕激素对SMMC-7721人肝癌细胞α-1，6岩藻糖基转移酶的调控；多西他赛对结肠癌LoVo细胞增殖的抑制作用；PTH作用于老年大鼠骨髓细胞骨代谢相关基因表达的实验方法；新转移相关蛋白SNC19翻译后加工及其活性形式的研究；大鼠转化生长因子βⅡ型受体胞外区与y干扰紊融合蛋白真核表达载体的构建；小鼠ACE2基因的克隆和体外表达以及序列分析与组织分布；阳离子脂质体包裹的IL-12基因对小鼠黑色素瘤的治疗作用；抗HIV-1 gp120人源mAb重链CDR区分子特性分析；基于斑点免疫金渗滤法的蛋白微矩阵；人肝癌组织中转醛醇酶活性高表达；人IFN-β基因脂质体转染胶质瘤细胞对凋亡的诱导作用；Survivin在2株人脑胶质瘤细胞系中的表达；瘦素受体基因多态性与2型糖尿病的关系及其对血脂的影响。     

双特异性抗体对LAK细胞增殖和细胞毒作用影响的体…

将抗ＣＤ１３与抗ＨＢｓ的单克隆抗体经化学偶联得到的双特异性抗体，观察该双特异性抗体对ＬＡＫ细胞增殖和增强细胞毒性的作用。结果显示双特异性抗体显著提高ＬＡＫ细胞与２．２．１５细胞结合率；促进淋巴细胞增殖．＾１２５Ｉ－ＵｄＲ释放试验检测发现双特异性抗体增强ＬＡＫ细胞对２．２．１５细胞的细胞毒性且与抗体浓度呈正相关 。