旋毛虫肌幼虫核酸疫苗的构建及其在小鼠体内的表达

目的　构建和表达旋毛虫肌幼虫编码相对分子质量 (Mr) 31000抗原结构基因 (TspE1)的重组质粒。　方法　通过逆转录 聚合酶链反应 (RT-PCR)特异性扩增TspE1基因 ,构建重组质粒 pUC18-TspE1,并将TspE1基因亚克隆入真核表达载体 pcDNA3中。用基因枪免疫小鼠 ,通过苏木素 伊红 (HE)染色及免疫组化观察重组质粒在皮肤组织内的表达情况。　结果与结论　成功构建 pcDNA3-TspE1重组质粒 ,并在小鼠体内表达。     

弓形虫和乙型肝炎病毒混合核酸疫苗的研究I．pcDNA3-HBsAg—GRA1真核表达质粒的构建及鉴定

目的 构建pcDNA3-HBsAg—GRA1真核表达质粒,为提高弓形虫DNA疫苗保护性做出新的探索,并期望“-／ -苗两用”。方法 采用PCR分别扩增HBsAg、GRA1;经BclI、EcoRⅠ双酶切HBsAg;EcoRⅠ、XhoⅠ双酶切GRA1;BamHⅠ、XhoⅠ双酶切载体pcDNA3．0;HBsAg、GRA1、pcDNA3．0双酶切纯化产物与T4DNA连接酶在22℃连接过夜,用双酶切及双脱氧末端终止法测序鉴定重组质粒。结果 成功构建pcDNA3-HBsAg—GRA1真核表达质粒。结论 为进一步研究pcDNA3-HBsAg—GRA1诱导的保护性免疫奠定了基础。     

仙台病毒HN基因核酸疫苗的构建及表达

用逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)从仙台病毒cDNA中扩增出HN全长序列片段,构建HN基因的真核表达载体pVAX1-HN,用PCR法、酶切进行鉴定.将重组质粒用脂质体法转染至COS 7细胞,用流式细胞术检测抗原蛋白表达,RT-PCR法检测HN基因mRNA表达情况.发现经PCR法和酶切鉴定,目的 片段大小与预期相符,经测序目的 基因序列与GenBank公布结果一致.转染后抗原蛋白表达达到68.3%,明显高于转染前(P＜0.01),HN基因mRNA明显表达.提示成功构建核酸疫苗pVAX1-HN,并在COS 7中能够瞬时表达,为进一步进行免疫学评价奠定基础.     

约氏疟原虫红外期yir基因保守区的克隆、表达与表位分析

目的对红外期的yir基因进行克隆和表达,探讨疟原虫在红外期的抗原变异。方法针对yir基因家族的保守区设计特异引物,以约氏疟原虫BY265株红外期的mRNA为模板,进行RT-PCR扩增,克隆和测定插入片段,所得序列进行BLAST查询,证实其为yir基因,然后构建表达质粒pQE80L/YIR,并转染到宿主菌DH5α中,对获得的yir保守区进行原核表达,经IPTG诱导后,以SDS-PAGE和WesternBlotting检测表达产物。结果从红外期获得了yir基因的保守区cDNA序列,证实红外期存在yir基因的表达;成功构建了表达质粒pQE80L/YIR,对YIR蛋白的保守区片段进行了表达。结论约氏疟原虫红外期存在yir基因的表达,该基因与红外期抗原变异的关系有待进一步研究;约氏疟原虫红外期yir基因保守区原核表达的成功,为疟原虫的红外期阻断疫苗提供了研究基础。     

埃博拉离我们有多远——世卫组织：埃博拉疫情仍十分严峻

世界卫生组织总干事陈冯富珍不久前曾在联合同总部召开的记者会上指出．埃博拉疫情十分严峻．感染人数预料会继续上升。同时,由美国国家过敏症和传染病研究所、制药企业葛兰素史克共同研制的埃博拉疫苗已经获准进行人体实验。另据新华社9月2日电,中国疾病预防控制中心在京举行媒体沟通会,中国疾控中心卫生应急中心副研究员向妮娟说,目前中国疾控中心没有接到埃博拉出血热疑似病例或确诊病例报告,收到的留观病例样品检测结果也均为阴性,一旦有埃博拉出血热病例输入．我国疾病预防控制体系有足够的能力及时发现并有效应对。     

肾综合征出血热自然感染和人工免疫后的抗体形成

目的 调查肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)病毒自然感染,分析免疫接种后抗体变化规律,为调整出血热预防控制策略提供依据.方法 采取分层整群抽样方法,在出血热高发病区、低发病区和非疫区共抽取600人,进行发病调查和血清IgG抗体酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测.结果 既往出血热发病人群IgG水平＞高发区接种人群＞低发区接种人群＞高发区非发病非接种人群＞低发区非发病非接种人群;既往出血热病例的IgG水平每10年衰降25％,30年后仍是接种人群的2倍以上;高发病区汉坦病毒隐性感染率33％,低发病区隐性感染率为23％;完成基础免疫接种即可获得较高抗体水平,末次接种5 ～ 10年后抗体水平下降40％,10～20年下降60％.结论 出血热显性感染可获得持久免疫力,在出血热历史疫区隐性感染率较高,出血热疫苗末次接种7～8年需再加强一针.     

疫苗引入前苏州地区儿童肺炎链球菌的分子流行病学特征研究

目的 了解苏州地区在7价肺炎链球菌结合疫苗(7 heptavalent pneumococcal conjugate vaccine,PCV7)引入前,不同临床治疗压力下肺炎链球菌分离株的耐药特征、血清分型及国际流行耐药克隆株(pneumococcal molecular epidemiology network,PMEN)的流行情况.方法 收集2006年3月～2007年3月期间苏州大学附属儿童医院住院治疗的呼吸道感染儿童(病例组)和非呼吸道感染儿童(对照组)中分离的肺炎链球菌134株,进行抗生素敏感性分析和血清型分型,并对其中86株大环内酯类药物菌株进行基因分型.结果 病例组抗生素的使用率高于对照组(x2=111.19,P＜0.001).病例组分离的菌株血清型以19F、19A和14为主,对照组菌株常见的血清型为6B、19F和23F,两组PCV7血清型覆盖率分别为58.3％和68.1％.对照组菌株对常用抗生素的敏感性均高于病例组(均有P ＜0.05).菌株基因分型共检测出10种PMEN克隆株,最常见的为Taiwan19F-14克隆株.PMEN克隆株对常用抗菌药物的不敏感率高于非PMEN克隆株.结论 在我国引入PCV7前,在抗生素等治疗压力下,苏州地区肺炎链球菌的耐药情况严重,以Taiwan19F-14克隆株流行为主,多种PMEN克隆株并存.     

如何避免骨牌式心理崩溃

乙肝疫苗事件真相基本澄清,不良影响却在持续发酵——根据国家卫生计生委对10个省的监测结果,事件发生1个月来乙肝疫苗接种率下降30％,其余13种免疫规划疫苗接种率下降15％。许多群众改用进口疫苗,推升接种成本也重创了国内疫苗行业。纵观事件应对处置过程,有些问题值得我们沉思。 如何实施积极的危机公关策略,最大限度减少损失？     

乙肝疫苗首针及时接种与乙肝疫苗百白破疫苗和麻疹疫苗全程免疫关系的研究

目的研究及时接种乙肝疫苗首针与完成乙肝疫苗、百白破疫苗和麻疹疫苗全程免疫的关系。方法利用2006年全国乙肝血清流调福建省资料,采用χ2检验比较组间各因素差异,logistic回归分析探讨影响完成3种疫苗全程免疫的影响因素,分层分析研究乙肝疫苗政策对上述关系的影响。结果本研究共有1 443名儿童纳入分析,χ2检验显示,乙肝疫苗首针接种不及时与及时组间（〉24hvs.≤24h）儿童完成3种疫苗全程免疫不同,及时组儿童显著高于不及时组儿童（χ2值分别为457.29,、42.96和74.95,P值均〈0.001）。logistic回归分析显示,及时接种乙肝疫苗首针者完成乙肝、百白破和麻疹疫苗全程免疫的OR值（95%CI）分别为24.36（14.46～41.05）、1.71（1.28～2.29）和2.35（1.68～3.30）。城区儿童完成百白破、麻疹疫苗的OR值分别为0.59（0.45～0.77）和0.36（0.26～0.48）。分层分析显示,乙肝疫苗政策有效降低了及时接种乙肝首针与完成乙肝全程免疫的关系（政策实施前后OR分别为68.09和5.67,差异有统计学意义P〈0.001）。结论及时接种乙肝首针能提高乙肝、百白破和麻疹疫苗全程免疫。     

水痘疫苗保护效果研究

为了研究给儿童打一剂水痘疫苗的保护效果如何,探究怎样加强免疫。利用的方法是采集200份0到14岁的接种了一剂水痘疫苗的儿童的手指末梢血样,用定剂量的酶联免疫吸附试验来测定水痘IgG抗体,同时观察记录儿童的水痘患病率。试验结果表明儿童水痘IgG抗体的几何均值呈现偏态分布,不同年龄与地区的儿童对其都有统计学的意义。最终得出结论是1—4岁的儿童应作为接种水痘疫苗的首选对象。