吻合器痔上黏膜环状切除术治疗重度痔疮的护理

痔疮住院手术治疗的疗效不十分满意,存在时间长,术后剧痛,创面愈合慢,有可能造成肛门狭窄或失禁,有一定的复发性等缺点。吻合器痔上黏膜环状切除术(PPH)于1998年由Longo[1]首先提出,国内于2000年7月开始应用此技术。本院于2004—2005年采用PPH技术治疗重度痔疮78例,效果良好。现将护理体会报告如下。1临床资料1.1一般资料本组78例,男48例,女30例,平均年龄42岁。均采用过药物治疗;32例做过外剥内扎术,10例做过激光手术,12例做过注射治疗;其中2度痔36例,3度痔22例,4度痔20例。1.2手术方法PPH吻合器痔上黏膜环状切除术,采用腰麻或硬膜外麻…     

Novel multi-probe RNase protection assay set for detection of endotoxin associated receptors gene expression

Objective: To construct the multi-probe ribonuclease protection assay (RPA) template set to be used for detecting expression patterns of MD-2, TLR4, CD14 mRNAs in human peripheral blood mononuclear cells. Methods : The designed cDNA fragments of the three genes were generated by polymerase chain reaction (PCR)using specific primers and directionally cloned into EcoR I and Hind III sites of expression plasmid pSP72 containing the T7/ promoter, the linearized plasmids was used as template to synthesize anti-sense RNA probes. Then we extracted total RNA from peripheral blood mononuclear cells (PBMC) and detected the dynamic expression patterns of the three genes with RPA method. Results: The proper sequence and orientation of the template set were confirmed by sequencing and the template set was successfully used to assay TLR4, MD-2 and CD14 mRNAs in human PBMC. The results showed that the three detected genes decreased transiently 1-3 hours after 100 ng/ml LPS stimulation. Conclusions: These new RPA multi-probe set provided valuable tool for the simultaneous quantitative determination of expression of TLR4, CD14 and MD-2 mRNAs in both constitutive and inducible types.     

构建细小核糖核酸病毒活疫苗的策略

利用感染性cDNA克隆,已构建了若干1型脊髓灰质炎病毒Mahoney有毒株与sabin1减毒株之间的重组病毒。这些重组病毒的猴体神经毒力试验表明,病毒颗粒的表面结构与神经毒力表型有些相关,神经毒力强的决定簇位于5′端非编码序列。这些结果产生了两种构建活的小核糖核酸病毒减毒株的可能的策略。一种是利用Sabin 1株作为携带外来抗原的载体:另一种是在5′端非编码序列引入突变来构建减毒的细小核糖核酸病毒。Sabin 1株的抗原性成功地改变为脊髓灰质炎病毒其他血清型的抗原性,而疫苗质量不降低。还证明,在Sabin 1株和Mahoney株基因组的5’端非编码序列引入缺失突变可构建具有弱神经毒力表型的病毒。     

乙型肝炎病毒转基因小鼠体内肝靶向反义RNA抗病毒疗效研究

目的：探讨半乳糖修饰的反义RNA真核表达质粒在乙型肝炎病毒转基因小鼠体内的抗病毒作用。方法：以半乳糖多聚赖氨酸（Gal-PLL)作肝靶向载体，将乙型肝炎病毒基因C区的反义RNA真核表达重组质粒（pCEP4-aC）制备为Gal-PLL－pCEP4-aC。将24只血清HBV DNA、HBsAg阳性的小鼠，随机等分为Gal-PLL－pCEP4-aC治疗组、Gal-PLL-pCEP4对照组和生理盐水阴性对照组，于实验第1天尾静脉分别注射Gal-PLL－pCEP4-aC、Gal-PLL－pCEP4（100μg/只）和等体积的生理盐水，观察治疗前后血清HBV DNA以及HBsAg变化。结果：Gal-PLL－pCEP4-aC治疗组21天时血清HBV－DNA转阴率62．5％（5／8），且7，14，21天时血清HBsAg明显降低；而Gal-PLL－pCEP4组血清HBV DNA转阴1只（1／8），生理盐水组8只均未转阴，两组用药后血清中HBsAg与用药前比较差异性均不明显（P＞0．05）。结论：肝靶向反义RNA能在乙肝基因小鼠体内抑制HBV的复制和抗原表达。     

外周血细胞DNA、RNA及血红蛋白同时提取法

采用淋巴细胞分离液分离外周血中的有核细胞。经细胞裂解液处理，上清提取RNA，沉淀提取DNA，用分离液分离所得红细胞沉淀制备血红蛋白溶液，经对抽提物质量进行评价，发现3种提取物质量均高，本法能从少量外周血中同时分离DNA、RNA及血红蛋白，高效易操作，值得推广。     

环状混合痔177例综合治疗临床观察

为了解决缩小环状混合痔手术创面，减轻疼痛，减少出血，促进创面愈合快，我科采用“枯痔油3号”注射内痔，外痔手术治疗，并配合肛泰软膏和肛泰栓治疗，收到满意效果。     

37例病毒性肝炎患者庚型肝炎病毒RNA检测结果分析

应用ＲＴ－ＰＣＲ技术对３７例住院病毒性肝炎患者作庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）ＲＮＡ检测。结果７例阳性，阳性率为１８．９２％。其中１３例原因不明肝炎ＨＧＶ－ＲＮＡ阳性４例，阳性率为３０．７６％。男、女均是ＨＧＶ的易感者，传播途径与丙肝、乙肝可能相似，有各种临床类型，肝功能损害程度较轻，ＨＧＶ可单纯感染，也可与其他肝炎病毒同时或重复感染。７例ＨＧＶ－ＲＮＡ阳性者，其中４例作肝组织病理检查，例７见合胞体巨细胞     

胃肠富集kruppel因子GKLF在宫颈鳞癌中的表达及意义

目的　探讨胃肠富集kruppel因子 (GKLF)在宫颈鳞癌组织及正常宫颈组织中的表达及意义。方法　应用半定量的逆转录聚合酶链式反应 (RT -PCR)方法检测 32例宫颈鳞癌组织 (研究组 )中GKLFmRNA的表达强度 ,以 10例正常宫颈组织作为对照 (对照组 )。结果　GKLFmRNA在正常宫颈组织中的表达强度为 0 .76± 0 .15 ,而在宫颈鳞癌中的相对表达强度为 0 .4 2± 0 .19,与正常宫颈组织相比较 ,宫颈鳞癌组织中GKLFmRNA的表达丰度较低 (P <0 .0 5 )。而且临床分期愈晚 ,GKLFmRNA的表达强度愈低 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。随着病理分级增高 ,GKLFmRNA的表达强度逐渐降低 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　宫颈鳞癌组织中GKLF表达下调 ,而且GKLFmRNA的表达与宫颈癌的临床分期和病理分级呈负相关 ,提示GKLF可能参与了宫颈癌的发生或进展过程     

T7 RNA聚合酶体外转录合成siRNA的方法

目的：建立一种应用T7 RNA聚合酶体外转录合成大量siRNA的方法。方法：以萤火虫荧光素酶为靶标，应用T7 RNA聚合酶体外转录合成siRNA，脂质体转染法将其导入HepG2细胞中，通过测定荧光素酶的量，评价siRNA对萤火虫荧光素酶基因表达的抑制作用。结果：合成了以萤火虫荧光素酶为靶标的siRNA，合成的siRNA能特异性地抑制荧光素酶基因的表达，抑制率为80％。结论：建立了一种经济简便的体外合成siRNA的方法。