激光捕获显微切割结合RNA线性扩增技术在膀胱移行细胞癌相关基因研究中的应用

目的当对有间质细胞混杂的膀胱移行上皮细胞与膀胱移行细胞癌进行基因差异表达分析时,激光捕获显微切割技术(lasercap-turemicrodissection,LCM)是不可缺少的,然而从LCM所得的细胞中获取足够RNA量相当困难。本文首次将LCM与RNA线性扩增结合用于膀胱癌相关基因研究,目的是确定一条切实可行的技术路线,将膀胱移行上皮细胞从膀胱粘膜中分离出来,将膀胱癌细胞从肿瘤间质细胞中分离出来,并对其进行RNA体外线性扩增,以备进一步研究。方法采用LCM技术分别从正常膀胱粘膜及膀胱癌组织冰冻切片中获取膀胱移行上皮细胞及膀胱癌细胞,提取RNA,并对微量RNA进行体外线性扩增。然后用RT-PCR验证扩增前、后RNA中β-actin基因表达水平。结果对照实验I证实经LCM后RNA完整性较好;经对照实验Ⅱ初步确定设定条件下LCMshooting次数与可获得RNA量间对应关系。从膀胱粘膜种捕获膀胱移行上皮细胞25万shootings;从膀胱癌组织中获取癌细胞20万shootings。产物RNA扩增后获得片段大小为0.5-2.5kh的aRNA,且β-actin基因表达表达完整。结论LCM结合RNA体外线性扩增技术能成功地获取较为单一的研究目的细胞,扩增后RNA完整性较好,能用于进一步研究中。     

浅谈中西医结合治疗小儿肺炎支原体肺炎的护理

肺炎支原体肺炎的病原为肺炎支原体，是介于细菌和病毒之间的一种微生物，含有DNA和RNA无细胞壁，本病占小儿肺炎的20％左面，常年皆可发生流行周期4～6年。主要经呼吸道传染，可经血行播散至全身各器官组织。我院近八年来采用中西医结合的方法对病儿进行治疗并辩证调护取得了理想的效果。现将护理措施介绍如下：     

Upregulation of voltage-activated potassium channels in hippocampus of Aβ25.35-treated rats

AIM: Potassium channels dysfunction has been indicated in Alzheimer disease. In the present study, the mRNA and protein expression alterations and the functional changes ot VOltage- activated potassium channels were studied in rat hippocampus after a single intracerebro- ventricular injection of β-amyloid peptide 25-35 (Aβ25.35). METHODS: The expressions of mRNA     

HBeAg/HBeAb双阳性慢性乙型肝炎患者血清HBV RNA的变化及临床转归分析

目的 探讨HBeAg/HBeAb双阳性慢性乙型肝炎(CHB)患者血清HBV RNA的变化及临床转归分析。方法选取2020年6月至2022年8月诊治的102例HBeAg/HBeAb双阳性CHB患者作为研究对象,设立为双阳组,同期选取51例HBeAg阳性、HBeAb阴性的CHB患者和52例HBeAg阴性、HBeAb阳性的CHB患者设立为对照1组和对照2组,对比血清HBV RNA变化。根据治疗方法不同将双阳组分为干扰素组(予以干扰素治疗,n=52)和恩替卡韦组(予以恩替卡韦治疗,n=50),对比HBeAg、HBeAb浓度及HBeAg转阴,HBeAb仍阳性、HBeAg和HBeAb同时转阴、HBeAg未转阴,HBeAb仍阳性占比。结果 双阳组的HBV RNA水平均高于对照1、2组(P<0.05)。治疗前,干扰素组和恩替卡韦组的HBeAg、HBeAb、HBV RNA比较,差异无统计学意义(P>0.05),治疗后,干扰素组的HBeAg、HBeAb、HBV RNA低于恩替卡韦组(P<0.05)。干扰素组的HBeAg转阴,HBeAb仍阳性占比高于恩替卡韦组,而HBeAg未转阴,HBeAb仍阳性占比低于恩替卡韦组(P<0.05)。2组HBeAg和HBeAb同时转阴占比比较,差异无统计学意义(P>0.05)。ROC曲线分析显示,HBV RNA预测CHB患者HBeAg/HBeAb双阳性和临床转归不良的AUC值分别为(0.936、0.954,P<0.05);敏感度分别为100.00%、93.10%;特异度分别为88.70%、76.70%。结论 HBV RNA在HBeAg/HBeAb双阳性CHB患者中呈高表达趋势,观察其水平变化有助于为预测临床转归提供指导。     

BALB/c小鼠格雷夫斯病模型靶向TSHR和ICAM-1治疗的研究

目的探讨靶向促甲状腺激素受体(TSHR)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)治疗格雷夫斯病(GD)的新方法。方法设计合成TSHR的小干扰RNA(siRNA)及ICAM-1单克隆抗体(mAb)。30只GD模型鼠按随机数字表法分为siRNA治疗组、ICAM-1 mAb治疗组及未治疗组, 另取10只正常小鼠作为空白对照。治疗前、后测定小鼠血清甲状腺素(T4)、促甲状腺激素(TSH)、TSH受体刺激性抗体(TSAb)、TSH刺激阻断性抗体(TSBAb)水平, 治疗结束后测定各组小鼠体质量、心率, 评估甲状腺摄取99TcmO4-能力、甲状腺大小及病理变化。采用两独立样本t检验、配对t检验及单因素方差分析处理数据。结果 3次治疗后, siRNA组、ICAM-1 mAb组小鼠体质量均低于正常小鼠(F=3.50,P=0.025), 心率均低于未治疗组GD模型鼠(F=24.73,P<0.001), 其中siRNA组心率下降明显, 接近正常小鼠。3次治疗后, siRNA组、ICAM-1 mAb组小鼠血清T4[(27.58±1.94)、(27.24±3.50) μg/L]、TSAb[(331.44±4...     

小干扰RNA在肝癌治疗中的应用

小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)是21～23 nt的短双链RNA,将哺乳动物细胞内特异基因的mRNA特异性降解而使基因失活,引起转录后沉默该基因的作用.siRNA技术在人类恶性肿瘤的基因治疗有特异而强烈的作用,具有非常广阔的情景,但其稳定性是有待解决的新问题.本文针对siRNA在肝癌治疗中的研究现状进行综述.     

lncRNA MALAT1在糖脂代谢相关疾病中的研究进展

随着社会经济的发展以及人类物质生活条件的改善,肥胖症、2型糖尿病、血脂代谢异常以及非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)在全世界广泛流行,不仅发病率高,且呈低龄化及逐年上升趋势.长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1(lncRNA MALAT1)是一种重要的调控基因,在糖脂代谢相关疾病的进展中发挥重要作用.对lncRNA M...