反义：衰而未败

20年来,反义核酸药物的发展非常缓慢,仅有一个反义药物进入市场,其他大部分都在Ⅲ期临床试验中遭遇失败,有关反义新药的申请也很快被FDA驳回。人们开始把目光投向竞争RNA技术平台尤其是小干扰RNA,这是否意味着反义核酸药物没有发展前途了呢?本文就反义药物的发展现状、发展前途以及可能突破现状的切入点作了详细分析,为反义药物的继续发展指出了方向。     

质粒表达的短发夹状RNA特异性抑制鼻咽癌细胞的增殖

目的观察pmU6-sibclD重组体在细胞内表达的bcl-xL短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)能否特异地抑制人鼻咽癌CNE-2Z细胞的增殖.方法将自行构建的表达短发夹状RNA的重组质粒转染到人鼻咽癌CNE-2Z细胞株、卵巢癌HO-8910细胞株和正常人类肝脏L-O2细胞株中,流式细胞仪检测转染率,MTT比色法检测细胞的生长抑制率.结果bcl-xLshRNA能特异地抑制CNE-2Z细胞株的生长增殖,而对正常人类肝脏细胞株的生长增殖和HO-8910细胞中的绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)的表达无抑制作用.结论pmU6-sibclD重组体在细胞内表达的短发夹状RNA能特异性抑制鼻咽癌细胞的生长增殖,为质粒介导的RNAi技术运用于肿瘤的基因治疗提供一定的理论依据.     

患丙型肝炎的肝移植病人的免疫抑制及转归（下）

在特异性免疫抑制剂对丙型肝炎移植病人长期结果的影响方面，存在一些疑惑，使用皮质醇治疗急性细胞排斥对感染HCV的接受是有害的。多年前，Kings学院医院Ed Gane和同事表示皮质醇片剂与血清中HCVRNA浓度增加4到100倍有关。较高的HCV RNA水平也与复发性肝炎的组织学严重程度增加有关。他们也表示皮质醇片剂与急性肝炎和较早时间复发的频率增加有关。     

基层医院一次性分道外剥内扎术治疗环状混合痔98例报告

目的:推出适合基层医院治疗环状混合痔的最有效的手术方法。方法:分析整理近2年来采用该术式治疗环状混合痔98例所取得的临床效果。结果:疗效满意,费用低廉,患者乐意接受。结论:一次性分道外剥内扎术治疗环状混合痔是一种有效,操作方便,费用低廉的手术方式,极适合于基层医院的广泛推广。     

piRNA在生殖系统中的功能研究进展

piRNA（Piwi—interacting RNA）是2006年发现的一种新的小RNA，长度约24到30个核苷酸，其作用与Dicer酶无关．与Piwi蛋白家族成员相结合才能发挥作用。目前研究piRNA的功能都基本限定在生殖细胞中，近来研究表明piRNA对于生殖细胞功能的很多环节有巨大的影响，而且对生殖支持细胞的影响的研究也有了进展。本文就piRNA在生殖系统中的功能的研究进展作一综述。     

运用siRNA建立稳定低表达IGF1R基因的肝癌细胞株的实验研究

目的运用siRNA技术在肝癌细胞株中建立稳定低表达人胰岛素样生长因子1类受体(IGF1R)基因的细胞株。方法构建包含封闭IGF1R基因的真核表达载体pSUPER-IGF1R-siRNA,转染SMMC7721和Hep3B细胞,G418筛选表达稳定的细胞株。通过RT-PCR、Western-blot分析与鉴定IGF1R mRNA和蛋白及cyclin D1、cyclinB1蛋白的表达,并绘制细胞生长曲线。结果在SMMC7721和Hep3B细胞中成功建立低表达IGF1R基因的细胞株,其生长明显减慢(P<0.05),且其cyclinD1表达亦明显下降(P<0.05)。结论pSUPER-IGF1R-siRNA能抑制SMMC7721和Hep3B细胞的生长。     

应用RNA干扰技术抑制神经元E3B1基因表达及对轴突生长的影响

目的:探讨应用RNA干扰(RNAi)技术抑制神经元E3B1基因表达及其对轴突生长的影响.方法:选择针对E381(NCBI:NM-024397)RNAi的3个靶位点Abil1、Abil2、Abil3和1个不针对任何mRNA的RNAi靶位点(阴性对照)以及甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH,阳性对照),用带有neoR选择标志和GFP绿色荧光标志的真核表达载体pGenesil-1构建E381 RNAi质粒,分别转染培养的神经元,在荧光显微镜下观测转染率,经G418筛选得到单一的转染细胞,并用Western blot法检测各转染组神经元E3B1蛋白的表达情况,选出具有最佳抑制效应的siRNA转染神经元,加人轴突生长抑制物,观测轴突生长情况.结果:成功构建了RNAi质粒,各组细胞的转染率相近,均为34%左右.与阴性对照组相比,Abil1、Abil2和Abil3转染组细胞内E3B1 mRNA的表达都受到了不同程度的抑制,其中Abil3转染组细胞的E381 mRNA和蛋白的表达抑制最为显著,加入轴突抑制剂后Abil3转染组神经元轴突仍能继续生长.结论:应用RNA干扰技术能高效特异地抑制神经元E3B1基因的表达,E3B1基因的表达下调可促进神经元轴突的生长.     

先天性环状血管畸形与吞咽困难一例

先天性环状血管引起的临床症状，本科遇见1例．因少见。结合文献复习报道于下。     

PPH手术治疗环状混合痔的疗效观察

目的利用对比实验,进一步探讨用痔上黏膜环切吻合术(PPH手术)对环状混合痔的治疗效果。方法研究组32例,均采用PPH吻合器进行手术治疗;对照组30例,均采用传统的外切内扎术式。结果研究组患者并发症出现率明显低于对照组,康复率高于对照组,复发率低于对照组。结论 PPH手术治疗环状混合痔具有良好临床疗效,明显优于传统的外切内扎术。且对患者的创伤小、安全可靠,减少患者治疗痛苦。