表面抗原测定低值弱阳性的临床价值探讨

目的:探讨乙型病毒性肝炎HBsAg弱阳性的检测及其临床意义。方法:对ELISA法检测的80例患者HB-sAg弱阳性标本行“乙肝三对半”检测,方法有6种模式。结果:PCR检测5例为阳性,阳性率为6.2%,CIC阳性27例,阳性率为33.7%。测定管与对照管的吸光度比值为(2.91±1.42),同时已测定了相应血清的ALT、AST、GGT分别为(12.34±5.59)U/L、(11.52±6.35)U/L及(14.34±3.25)U/L。结论:产生HBsAg弱阳性的现象可能是患者的免疫功能受损后,机体与HBV或其应答产物产生新的免疫平衡的反应,一般情况下不具严重的致病性,但在重新受到HBV的严重感染下,可能被激发而导致病情加重,甚至癌变。     

抗-HCV分片段酶联免疫确认试剂对ELISA试剂组合的应用

丙型肝炎病毒(HCV)抗体是采供血机构的检测项目之一。目前血液筛查所采用的第3代HCV总抗体酶联免疫吸附试剂,由于抗原的组合、来源及含量等差异,导致不同厂家试剂的测定结果差异较大。卫生部规定,必须采用两种不同厂家的试剂进行初、复检,以尽可能保证输血安全。如何选择初、复     

胎儿胰岛中干细胞的分离与鉴定

目的:已证实胰腺来源的干细胞或祖细胞在体内外均能分化为胰岛素分泌细胞,但成人胰腺来源的干细胞增殖潜能较差.实验旨在分离并鉴定胎儿胰岛样细胞团中的干细胞,为糖尿病细胞移植治疗寻找可用的种子细胞.方法:实验于2006-10/2007-07在解放军军事医学科学院输血研究所干细胞与再生医学研究室完成.①对象:所用胰腺标本取自流产胎儿,胎龄14～20周,由解放军总医院妇产科提供,胎儿组织的使用得到孕妇本人的知情同意,实验经医院医学伦理委员会批准.②实验方法:无菌条件下取出胎儿胰腺,37 ℃下用0.5 g/L的V型胶原酶进行消化,分离得到胎儿胰岛样细胞团,悬浮培养,加入含体积分数为0.1胎牛血清、1 mmol/L丙酮酸钠、1 mmol/L谷氨酰胺、71.5 μmol/L β-巯基乙醇、100 U/mL青霉素和100 mg/L链霉素的RPMI1640培养基,每日转皿除去贴壁细胞,72 h后挑选出悬浮生长的胰岛样细胞团予以贴壁培养,待长成上皮样单层细胞克隆时传代.③实验评估:将悬浮培养的胰岛样细胞团行双硫腙染色.另将少部分胰岛样细胞团及第4代细胞种植于24,96孔板中,采用免疫荧光染色检测细胞表面分子标志物增殖细胞核抗原、胰十二指肠同源盒基因1、Nestin、角蛋白19、波形蛋白、胰岛素、胰高血糖素、CD29的表达情况.MTT法分析第6代细胞的生长曲线.结果:①悬浮及贴壁培养的胰岛形态:刚分离出的胰岛呈簇状,边缘不规整,细胞排列较疏松.贴壁后胰岛样细胞团由簇状逐渐展开形成上皮样单层细胞克隆.传代后细胞形态发生改变,呈梭形或分支样,增殖较快.②悬浮培养的胰岛双硫腙染色检测:分离得到的胎儿胰岛样细胞团双硫腙染色呈阳性表达.③细胞表面标志免疫荧光染色检测:贴壁的第1代细胞大部分呈增殖细胞核抗原、胰十二指肠同源盒基因1、Nestin、波形蛋白阳性,极少数细胞呈胰岛素、胰高血糖素阳性,而角蛋白19为阴性.传代后仍呈增殖细胞核抗原、胰十二指肠同源盒基因1、Nestin、波形蛋白阳性,角蛋白19弱阳性,而胰岛素、胰高血糖素为阴性,所有细胞均不表达CD29.④细胞生长曲线:传代第3天细胞进入对数生长期,第6天进入平台期,细胞生长曲线呈"S"形.结论:由胎儿胰岛成功分离并培养出具有自我更新和良好增殖能力的干细胞,稳定表达多种胰腺干细胞特征性标志,而不表达胰岛细胞标志物,提示该细胞可作为候选的胰岛干细胞用于糖尿病细胞移植治疗.     

原发性腹腔妊娠的超声所见1例

患者女,35岁。停经51d,尿妊娠弱阳性,轻微腹痛,无阴道出血,来我院就诊,行超声检查:子宫大小正常,内膜厚0.6cm,右侧卵巢大小为2.3cm×1.6cm,回声正常,于右侧卵巢左后方可见2.3cm×2.1cm孕囊样回声,周边有增强的厚壁回声,内可见1.4cm×0.7cm胎芽,并可见心管搏动,左侧卵巢未明确显示。超声诊断:右侧宫外孕,考虑为腹腔妊娠(原发性?)(图1、2)。患者随即住院治疗,手术所见:ROV:右侧卵巢;UT:子宫;GS:孕囊位于右侧卵巢左后方图1原发性腹腔妊娠声像图子宫、双侧卵巢及输卵管正常(右侧输卵管较左侧略粗),于右侧输卵管伞端与右侧阔韧带间见一大小约2…     

三种方法测定HBsAg弱阳性样本的分析比较

目的比较电化学发光检测技术（ECLIA）和酶联免疫吸附试验（ELISA）与胶体金免疫层析试验（GICA）检测HBsAg弱阳性样本的结果符合率,以了解三种方法的特异性与灵敏度等诊断指标。方法用三种方法平行检测收集的血清标本HBsAg,并进行相互比较。结果三种方法检测HBsAg的结果符合率为82.1%,其中ELISA与ECLIA结果符合率93.5%;GICA与ECLIA结果符合率为78.9%.GICA检测HBsAg弱阳性样本时的各项诊断指标都不甚理想。结论①GICA的灵敏度和特异性分别为77.8%和77.8%,较ELISA和ECLIA低,检测HBsAg弱阳性样本时存在一定程度的漏检率和误诊率,只能起筛查作用,遇到HBsAg弱阳性的血清标本必须与ELISA法并用,实行双检。②ELISA较ECLIA灵敏度和特异性略低,当测定标本的OD值在Cutoff附近即检测灰区时建议用ECLIA复检。（     

3种检测HBsAg弱阳性样本方法比较

目的了解酶联免疫吸附试验（EuSA）、胶体金免疫层析试验（GIcA）与微粒子化学发光检测技术（MEIA）检测liB—sAg弱阳性样本的结果符合率。以了解3种方法的特异性与灵敏度。方法用3种方法平行检测收集的血清标本HBsAg,并相互比较。结果ELASA与MEIA结果符合率为94．9％：GICA与MEIA结果符合率为76．9％。结论MEIA方法检测乙肝表面抗原的阳性率、灵敏度和特异度高于ELISA法和胶体金法。     

血站试剂的质量评估

目的选择适宜的血液筛查试剂,保证临床用血安全。方法 ELISA方法进行试剂确认筛选。结果确认结果与预期结果一致。结论血站在选择试剂时,要尽量选择灵敏度高、特异性好的试剂。     

两种洗板方法在ELISA中的应用分析

目的:探讨酶联免疫试验(ELISA)中的洗板技术,试图找到一种简单、高效、经济、实用、可靠的ELISA洗板方法。方法:对753例临床体检乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的标本,分别用手工法和全自动洗板机法两种方法进行洗板,进行组间对比分析;将弱阳性标本选出,重新检测2次,分别用两种方法洗板,看看弱阳性是否因洗板方法不同引起。结果:753例用ELISA方法检测HBsAg试验中,用手工法洗板和用洗板机洗板,经χ2检验,P>0.05,两种洗板方法差异无显著性;18例弱阳性标本检测中,洗板方法的不同,不是造成假阳性的根本原因。结论:两种洗板方法无差别,在ELISA实验中,手工法可以代替洗板机法洗板。手工法简单、高效、实用,应可规范推广。     

HIV-抗体筛查弱阳性血清的配制和质控图的制作

HIV-抗体筛查常用的方法是酶联免疫（ELISA）法,为确保试验过程的正确性和准确性,在每次实验中必须包含有内部对照质控血清和外部对照质控血清。内部对照血清由试剂盒提供,外部对照血清可购买或自己配制,并利用其绘制质控图来对每次实验进行质控,现将本实验室自配外部对照血清及质控图绘制过程报告如下。     

三种复检HBsAg弱阳性的方法探讨

目的了解酶联免疫吸附试验（ELISA）,化学发光免疫分析（CLIA）及HBV—DNA荧光定量PCR（HBV—DNA）法检测HBsAg弱阳性标本结果的检出率,探讨三种方法的特异性和灵敏度。方法对临床标本进行ELISA定性分析检测,对HBsAg检测的OD值在0．075～0．135的84份标本再用ELISA法（2次实验条件一致）复检,复检仍为HBsAg弱阳性的标本分别再用CLIA、HBV—DNA复检。结果CLIA法阳性检出率80．6％,HBV—DNA法72．2％,ELISA法63．9％。结论对HBsAg弱阳性结果的处理应采用多种方法比较,并消除可能引起检测标本产生弱阳性的相关因素,参考临床诊断发出报告。