一种快速分离纯化外周血细胞线粒体DNA方法的建立

目的探索快速分离纯化人外周血细胞线粒体DNA(mtDNA)的方法. 方法收集抗凝外周血,首先破红细胞,然后裂解白细胞,去除细胞膜和核DNA后获得mtDNA;再经过去除蛋白和RNA,获得纯mtDNA.用PCR扩增人线粒体ND1基因片段,PCR产物经纯化后测序和核苷酸同源性分析.结果用本研究中建立的方法制备的mtDNA纯度高,每毫升抗凝血可获得100ng左右的mtDNA.经过PCR扩增ND1基因433bp片段,较用细胞总DNA为模板,模板用量少,扩增产物多.测序后经核苷酸同源性分析证实扩增片段为ND1基因.结论本研究中建立的快速分离外周血细胞mtDNA的方法,可制备高纯度的mtDNA用于线粒体相关研究.     

蝎毒及蝎毒多肽对小鼠免疫功能和外周血细胞计数的作用

目的观察蝎毒(SV)及蝎毒多肽(PSV)对正常小鼠免疫功能和外周血细胞计数的作用.方法取正常小鼠45只,随机分为3组:SV组、PSV组、对照组,分别腹腔注射,1次/d,连续5d.于首次给药6h、24h、8d后,每组取小鼠5只,称体重,眼球取血,计数外周血细胞、处死后脾脏、胸腺,计算脾重指数、胸腺指数.8d取外周血后测试体能.结果 SV组6h、24h、8d白细胞计数增加(p<0.05);PSV组略高于对照组.SV组6h中性粒比例明显增多,24h淋巴细胞比例明显增加(p<0.05),8d二者比例恢复正常;PSV组6h、24h中性粒略有增加,8d恢复正常.两组单核细胞均有增高.血小板计数SV组维持正常,PSV组升高.SV、PSV组脾重指数、胸腺指数和红细胞计数与对照组相比均不减少或略有增加(p>0.05),两组体能增强明显.结论 SV及PSV均可提高正常小鼠的免疫功能,维持或增加外周血各类细胞数目,改善机体整体功能状态.     

夫妇染色体异常伴流产与死胎

患者女,30岁。婚后3年怀孕两次,第1胎在孕6周时自然流产;第2胎在孕10周时发现无胎心,无孕期感染及毒害物质接触史。丈夫,32岁。夫妇非近亲结婚。查体:夫妇表型正常,外生殖器正常。夫妇双方行外周血染色体检查,G显带分析,计数50个分裂相,妻子核型为:45,XX,t(13;14)(p11;p11),见图1;丈夫染色体核型为:46,XY,t(5;17)(q35;q21),见图2。家系调查:其他家系成员因不配合未做染色体检查,主诉均没有类似流产及死胎情况。讨论夫妇双方同为表型正常之平衡易位携带者情况实属罕见。男患者是相互易位携带者,理论上可以形成18种配子,其中一种是正常配子,…     

环磷酰胺和环孢素A对SLE患者外周血Th细胞亚群免疫调节的作用

目的:探讨环磷酰胺(CY)和环孢素A(CsA)对SLE患者外周血Th细胞亚群的免疫调节作用.方法:以10例重度活动的SLE患者和6例正常对照的PBMC为研究对象,将细胞悬液分为空白组、植物血凝素(PHA)刺激组、PHA CY组、PHA CsA组、CY组和CsA组分别给药,体外细胞培养24 h后,利用三色流式细胞术检测CD4 IL-10 T细胞、CD4 IFN-γ T细胞比例和CD8 IL-10 T细胞、CD8 IFN-γ T细胞等比例,同时记录相应细胞的荧光强度.结果:CsA促进静息和活化状态下PBMC培养中表达CD4 IL-10 T细胞比例增加,同时CD4 T细胞表达IL-10荧光强度增强.CY虽然促进SLE PBMC培养中表达CD4 IL-10 T细胞比例增加,但对CD4 T细胞表达IL-10的荧光强度无明显增强.CsA抑制PBMC培养中表达CD8 IL-10 T细胞的比例,同时CD8 T细胞表达IL-10的荧光强度减弱.而CY虽然抑制SLE PBMC培养中表达CD8 IL-10 T细胞的比例,但CD8 T细胞表达IL-10的荧光强度却是减弱的.CsA对活化状态下正常对照和SLE PBMC培养中表达CD4 IFN-γ T细胞比例的抑制作用优于CY,且CY对SLE患者PBMC培养中CD4 T细胞表达IFN-γ荧光强度抑制作用也是减弱的.CsA和CY均可抑制活化状态下,正常对照PBMC和静息状态下SLE PBMC培养中表达CD8 IFN-γ T亚群细胞的比例,且CY的抑制作用优于CsA.但CY对SLE PBMC培养中CD8 T细胞表达IFN-γ荧光强度的增强作用不如CsA.结论:CsA和CY均能使CD4 T细胞受抑,CD8 T细胞上升.但CsA对T细胞活化,炎症相关细胞因子表达启动的反应更为敏感,免疫调节作用更为显著.     

DAF与CD3协同刺激人外周血T细胞活化的实验研究

目的：探讨人促衰变加速因子（decay-accelerating factor,DAF)作为共刺激分子参与T细胞活化的作用机制。方法：观察3株针对DAF不同SCR的单抗单独使用或者与抗人CD3单抗联合使用时，对人外周血T细胞增殖、IL－2分泌以及胞浆Ca^2 水平的影响。结果：所用3株抗人DAF单抗不能活化T细胞，而抗人DAF单抗与抗人CD3单抗可以协同刺激T细胞增殖，促进IL－2分泌以及提高胞浆Ca^2 水平。结论：抗人DAF单抗与抗人CD3单抗可协同刺激人外周血T细胞活化。     

Yq随体染色体一家系的细胞遗传学研究

国内外已有Y染色体长臂末端区有随体的病例报道，但为数不多。我室在对遗传咨询患者进行细胞遗传学检查中，发现一父子外周血淋巴细胞Y染色体长臂末端均可看到明显随体的家系。     

Graves病患者外周血中淋巴细胞表型的变化及其意义

Ｇｒａｖｅｓ病 (Ｇｒａｖｅｓｄｉｓｅａｓｅ ,ＧＤ)是一种器官特异性自身免疫性疾病 ,我们检测了ＧＤ患者外周血中淋巴细胞表型的变化 ,以期了解该异常变化在本病中所起的作用。材料和方法研究对象 :选择门诊初诊的ＧＤ患者 2 3例 ,ＧＤ的诊断符合下列标准 :①有典型的甲亢症状和体征 ;②血清游离三碘甲状腺原氨酸 (ＦＴ3)、游离甲状腺素 (ＦＴ4 )均高于正常 ,促甲状腺素 (ＴＳＨ)低于正常 ;③甲状腺自身抗体呈不同程度阳性 (伴有浸润性突眼和 或其它自身免疫性疾病及近 2周有过感染疾患的患者不在入选范围 )。其中男 5例 ,女 18例 ,年龄…     

罗伯逊易位一家系

患者女,32岁,因生育一对脑瘫的孪生姐妹,且又怀孕18周,而行产前检查。夫妇双方表型均正常,智力正常,非近亲结婚。其兄已婚且生育一正常男孩。患者已生育的一对孪生姐妹均为小脑瘫痪,智力正常,运动能力丧失,生育过程中无外伤。细胞遗传学检查:夫妇双方取外周血淋巴细胞培养,常规     

哮喘患者外周血淋巴细胞ICAM—1,β2整合素及CD44分子的表达

哮喘患者外周血淋巴细胞ＩＣＡＭ１、β２整合素及ＣＤ４４分子的表达张劭夫刘树芬张波（济南军区总医院呼吸科，济南２５００３１）中国图书分类号Ｒ５６２２５作者简介：张劭夫，男，４４岁，医学硕士，副主任医师，主要研究哮喘气道炎症目前认为哮喘本质上系慢性气...     

吗啡依赖小鼠胸腺,外周血T淋巴细胞亚群动态研究

使用流式细胞仪（ＦＣＭ）动态观察吗啡依赖小鼠在摄入吗啡成瘾期间及吗啡消除后中枢和外周血Ｔ淋巴细胞亚群的变化情况。结果表明：①摄入吗啡后２４ｈ始，胸腺中ＣＤ４和ＣＤ８Ｔ淋巴细胞降低，血液中ＣＤ４降低，ＣＤ８升高，两者比值倒置，连续摄药至ｄ５时最甚。②停止摄入吗啡７２ｈ后，胸腺重量增高，胸腺中ＣＤ４和ＣＤ８Ｔ淋巴细胞即恢复至正常；但吗啡消除１ｗｋ后，血液中的ＣＤ４和ＣＤ８Ｔ淋巴细胞始终未恢复正常。上述结果提示中枢和外周的淋巴细胞亚群对吗啡的反应敏感性存在差异，还提示吗啡在体内对中枢未分化成熟Ｔ淋巴细胞的可逆性损伤或抑制作用和对成熟Ｔ细胞的损伤或抑制更为严重，且有不可逆的作用